尼美舒利對蟾蜍上腭粘膜纖毛毒性作用的研究

陳新梅

（山東中醫藥大學藥學院，山東濟南250355）

尼美舒利對蟾蜍上腭粘膜纖毛毒性作用的研究

陳新梅

（山東中醫藥大學藥學院，山東濟南250355）

目的考察尼美舒利對蟾蜍上腭粘膜纖毛運動的影響。方法采用蟾蜍在體上腭法，考察尼美舒利對蟾蜍上腭粘膜纖毛持續運動時間和對粘膜纖毛形態的影響。結果尼美舒利對蟾離離體上腭粘膜的纖毛具有一定影響作用，纖毛持續運動百分率為23%，與生理鹽水組相比，P＜0.05，具有顯著性差異。結論尼美舒利鼻腔給藥需慎重。

尼美舒利；鼻腔給藥；纖毛毒性

尼美舒利（Nimesulide，NIM）是非甾體抗炎藥，具有顯著的鎮痛、解熱和抗炎作用，臨床常用來治療急慢性疼痛、上呼吸道感染引起的發熱。雖然尼美舒利能選擇性地抑制環氧化酶－2（COX－2）的活性，但該藥口服后仍有一定的胃腸道不良反應［1，2］。鼻腔給藥具有避免胃腸道不良反應、起效快、劑量小、生物利用度高等優點［3］，但NIM鼻腔給藥是否安全？本研究考察NIM對蟾蜍在體上腭粘膜的運動的影響，借此對尼美舒利鼻腔給藥的安全性進行初步研究與評價。

1 材料

1.1 儀器 JJ79－1型磁力加熱攪拌器（山東鄆城光明儀器有限公司）；XSP－2C光學顯微鏡（上海長方光學儀器有限公司）；JA2003型電子天平（上海天平儀器廠）。

1.2 試藥 NIM原料藥（武漢大華偉業醫藥化工有限公司，批號：XH201301248002，純度＞99%）；去氧膽酸鈉（（上海伯奧生物科技有限公司）。

1.3 蟾蜍 山東中醫藥大學實驗動物中心提供［生產許可證：SCXK（魯）2011－0003］。

2 方法與結果

2.1 尼美舒利對纖毛運動時間的影響［4］將蟾蜍仰臥固定，用止血鉗牽拉，使口腔張開，于上腭粘膜處滴加藥液0.5 mL，使藥液完全浸沒上腭，接觸30 min后，用生理鹽水洗凈藥物，用眼科手術剪分離蟾蜍兩眼之間的粘膜，面積為3 mm×3 mm，用生理鹽水洗凈血塊及雜物，粘膜面向上，平鋪于載玻片上，于粘膜表面滴加0.2 mL生理鹽水，輕輕蓋上蓋玻片，于1 040倍光學顯微鏡下觀察纖毛運動情況，隨后置于加有少量蒸餾水的層析缸中，密閉，使水蒸氣近飽和狀態，環境溫度保持在20～25℃。每隔適當時間取出，顯微鏡觀察。如纖毛繼續運動，則放回層析缸中，直到纖毛停止運動。記錄從開始給藥到纖毛完全停止運動所需要的時間。另取蟾蜍如上操作，滴加生理鹽水0.5 mL作為陰性對照，并以文獻公認的具有纖毛毒性的1%去氧膽酸鈉作為陽性對

照。以尼美舒利溶液組蟾蜍的纖毛持續運動時間除以生理鹽水組蟾蜍的纖毛持續運動時間，得到纖毛持續運動時間相對百分率（%）。纖毛持續運動時間相對百分率越高，藥物的纖毛毒性越小。各組藥物對蟾蜍上腭粘膜纖毛運動時間的影響見表1。

表1 藥物對纖毛運動時間的影響（n＝5）

與生理鹽水組相比，尼美舒利纖毛持續運動時間相對百分率為23%，試驗結果表明尼美舒利對纖毛運動時間有一定的影響。

2.2 尼美舒利對蟾蜍上腭粘膜纖毛形態學的影響

將上述各組蟾蜍上腭粘膜制片，置光學顯微鏡下觀察（10×40）。鏡檢結果顯示：作為陰性對照的生理鹽水組纖毛排列整齊、運動活躍、向同一個方向有規律的擺動、擺動頻率較高。去氧膽酸鈉是公認的具有纖毛毒性的藥物，本試驗以此作為陽性對照，給予1%去氧膽酸鈉后纖毛脫落、粘膜表面雜亂、5 min后纖毛停止擺動、顯微鏡視野中出現血細胞。尼美舒利溶液組的纖毛隨放置時間延長，纖毛擺動頻率逐漸減弱，擺動纖毛的數量逐漸減少。

3 討論

3.1 鼻腔作為藥物全身吸收的給藥部位日益受到人們關注，鼻腔給藥后可獲得滿意的生物利用度，但是這種給藥方法必須注意對鼻纖毛的毒性作用［3～5］。鼻腔粘膜表面覆蓋著一層柱狀纖毛，正常情況下，纖毛協調一致擺動，可以清除進入鼻腔的異物，起到保護作用。鼻腔給藥后，纖毛運動受到不同程度影響，從而影響鼻腔正常生理功能。因此，研究藥物及輔料對鼻腔纖毛運動的影響，是藥物鼻腔給藥的一項重要內容［3～5］。研究藥物鼻纖毛毒性的動物模型有雞胚氣管的粘膜纖毛和蟾蜍上腭粘膜纖毛，后者與哺乳動物鼻粘膜纖毛在組織上相似，且材料易得，操作簡便，故應用較廣［5］，故本試驗采用該法。

3.2 本試驗采用在體蟾蜍上腭粘膜，觀察了尼美舒利溶液對蟾蜍上腭纖毛運動的影響。參照文獻［6～8］，本試驗考察了2%的尼美舒利溶液，該濃度是由人體臨床使用的濃度折算而來。試驗結果證明：2%的尼美舒利溶液對蟾蜍纖毛的持續運動百分率為23%，因此尼美舒利對纖毛具有一定的毒性。文獻報道，鼻腔給藥的藥物或輔料，纖毛持續運動百分率在80%～100%的范圍內可認為是安全的［9，10］。因此尼美舒利鼻腔給藥需慎重。

3.3 對纖毛運動有影響的藥物，如進行鼻腔給藥，可通過藥劑學手段在一定程度上能降低纖毛毒性和粘膜毒性［8］，這為鼻腔給藥制劑提供了新的思路［11～13］。

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［2］高冬虹.尼美舒利致不良反應中文文獻分析［J］.藥物流行病學雜志，2012，21（5）：234－236.

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Study on the mucociliary toxicity of nimesulide in toads

CHEN Xin-mei
（College of Pharmacy，Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Jinan 250355，China）

ObjectiveTo study the mucociliary toxicity of nimesulide in toads.MethodsIn situ toad palate model was established as the experimental model to evaluate the effects of Nimesulide on percentage of persistent vibration of toad palate cilia as well as the mucosal ciliary features.ResultsThe percentage of persistent vibration of Nimesulide group was 23%，showing significant difference with physiologic saline group（P＜0.05）.ConclusionNimesulide nasal administration should be careful.

Nimesulide；Nasal administration；Cililary toxicity

R965

A

2095－5375（2014）01－0009－002

陳新梅，女，博士研究生，副教授，研究方向：藥劑學，E－mail：xinmeichen＠126.com