雅連、味連治療急性感染性腹瀉療效差異性研究—分層區(qū)組、隨機(jī)雙盲、平行對照、多中心臨床試驗報告

曾潔萍，閻博華，李繼書，丁紅*，張瑞明，張慶，李明權(quán)，周宜

·臨床中藥·

雅連、味連治療急性感染性腹瀉療效差異性研究—分層區(qū)組、隨機(jī)雙盲、平行對照、多中心臨床試驗報告

曾潔萍1，閻博華1，李繼書4，丁紅*1，張瑞明2，張慶3，李明權(quán)1，周宜4

目的：比較不同基源黃連（雅連、味連）治療急性感染性腹瀉療效差異，確定最能代表黃連清熱燥濕、瀉火解毒功效的基源種。方法：急性感染性腹瀉(胃腸濕熱證)的患者，隨機(jī)分為2組。雅連組口服雅連提取物3 g，每日3次，味連組口服味連提取物3 g，每日3次，療程3天。結(jié)果：共有130例受試者入組，其中味連組65例、雅連組65例；治療3天后比較，兩組疾病療效差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜ 0.05），雅連與味連相當(dāng)；治療3天后比較，兩組胃腸濕熱證療效差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜ 0.05），雅連與味連相當(dāng)；治療3天后比較，兩組主證（大便次數(shù)）改善程度差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），雅連優(yōu)于味連；味連組和雅連組均無不良事件發(fā)生。結(jié)論：雅連在改善大便次數(shù)方面優(yōu)于味連；兩種基源黃連中，雅連可能更能代表黃連清熱燥濕、瀉火解毒之功。

基源；雅連；味連；清熱燥濕；瀉火解毒

黃連為毛莨科植物黃連（Coptis chinensis Franch.）、三角葉黃連（Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao）和云連（Coptis teeta Wall.） 的干燥根莖。 分別習(xí)稱“味連”、“雅連”、“云連”[1]。黃連性味苦、寒。歸心、脾、胃、肝、膽、大腸經(jīng)，具有清熱燥濕，瀉火解毒功用，臨床用途廣泛。“味連”主要分布于湖北、湖南、陜西、甘肅、四川、貴州等地，主產(chǎn)于四川石柱縣和湖北，“雅連”僅產(chǎn)于四川洪雅、峨嵋。傳統(tǒng)認(rèn)為雅連功效優(yōu)于味連，李時珍在《本草綱目》說：“黃連……惟取蜀郡黃肥而堅者為善……今雖吳、蜀皆有，惟以雅州、眉州者為良”。但近年雅連品種資源出現(xiàn)嚴(yán)重危機(jī)，一是由于雅連生長條件要求高，栽種難度大，種植技術(shù)沒有突破，生長慢而單產(chǎn)低，種植經(jīng)濟(jì)效益低，藥農(nóng)不愿種植；二是由于自20世紀(jì)50年代開始，國內(nèi)開始從石柱引種試栽黃連，而作為唯一適合雅連生產(chǎn)并能提供商品基地的四川峨嵋、洪雅也不例外，遂使雅連的主產(chǎn)地已幾乎沒有栽種生產(chǎn)，同時野生雅連經(jīng)過多年的采挖，貨源越來越少，致使雅連產(chǎn)量逐年下降，現(xiàn)商品黃連中以味連占絕對優(yōu)勢。為發(fā)展雅連這一特色川產(chǎn)道地藥材，為其功效提供科學(xué)數(shù)據(jù)，在國家科技支撐計劃地方專項資金支持下進(jìn)行了本研究。

1 對象與方法

1.1 病例選擇

急性感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)參照實用內(nèi)科學(xué)（第12版）有關(guān)內(nèi)容制定[2]。中醫(yī)證候（胃腸濕熱證）參照《中藥新藥治療泄瀉的臨床研究指導(dǎo)原則》、國家中醫(yī)藥管理局《中醫(yī)病癥診斷與療效判定標(biāo)準(zhǔn)》(ZY/T001.9-001.9-94)及國家技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布《中醫(yī)臨床診斷術(shù)語證候部分》(GB/T16751.2～1997)制訂。診斷標(biāo)準(zhǔn)制定，其中主癥（便質(zhì)稀溏，便次增多）必備，次證（腹痛、泄下急迫或瀉下不爽、肛門灼熱、腹中腸鳴，煩熱，口渴、小便短赤）3項，結(jié)合及舌象、脈象，即可診斷為胃腸濕熱證。

癥狀評分標(biāo)準(zhǔn)：便次增多：大便每日≤3次(0分)、大便每日4～5次(2分)、大便每日6～7次(4分)、大便每日8次及以上(6分)；便質(zhì)改變：黃軟成型(0分)、糊狀或溏便(2分)、水樣便(4分)、黏液便(6分)；腹痛：無腹痛(0分)、偶有輕微腹痛(1分)；2～3次/日，疼痛較明顯，但能忍受(2分)、腹痛劇烈，難以忍受(3分)；泄下急迫：無(0分)、有(1分)；瀉下不爽：無(0分)、有(1分)；肛門灼熱：無(0分)、有(1分)； 腹中腸鳴：無(0分)、有(1分)；口渴：無(0分)、有(1分)；小便短赤：無(0分)、有(1分)；心煩：無(0分)、有(1分)；發(fā)熱：體溫≤37.3℃(0分)、體溫37.3～38.0℃(1分)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合西醫(yī)急性感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)；②符合中醫(yī)辨證屬胃腸濕熱證；③受試年齡范圍18～65歲，本次發(fā)作72小時以內(nèi)；④病程72小時以內(nèi),病情為輕、中度者；⑤就診前24小時內(nèi)未服用抗生素或止瀉藥；⑥志愿受試，簽署知情同意書者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①細(xì)菌性痢疾、霍亂、傷寒、副傷寒、食物中毒、霉菌感染、寄生蟲感染、潰瘍性結(jié)腸炎、腸易激綜合征等引起腹瀉者。慢性腹瀉患者；②重度脫水者；③體溫＞38℃，或血常規(guī)WBC≥12×109/L，且中性粒細(xì)胞百分比≥80%；④全身性疾病，藥物及惡性腫瘤引起腹瀉者;⑤病程雖未超出72小時，但已用其它療法使病情緩解者；⑥妊娠及哺乳期婦女；⑦過敏體質(zhì)或?qū)煞N以上藥物過敏者；⑧合并心腦血管、肺、肝、腎和造血系統(tǒng)嚴(yán)重原發(fā)性疾病、精神病患者；⑨試驗前3個月內(nèi)參加過其他的藥物臨床試驗；研究者認(rèn)為不適宜參加本試驗者。

本研究通過成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院臨床試驗倫理委員會審查同意。從2009年8月至2009年4月，共納入受試者130例，其中雅連組65例，味連組65例。

1.2 研究設(shè)計

本研究采用隨機(jī)、對照、雙盲、多中心設(shè)計。研究在四川省中醫(yī)醫(yī)院、四川大學(xué)華西醫(yī)院、成都市第五人民醫(yī)院三個中心同時進(jìn)行。每個中心計劃入組病例數(shù)均為44例。由統(tǒng)計人員采用SAS軟件隨機(jī)數(shù)字，置于密閉、不透光的信封內(nèi)密封。受試者根據(jù)入組時間嚴(yán)格按照隨機(jī)序列號進(jìn)入不同組。試驗療效評價結(jié)束后由統(tǒng)計人員和試驗負(fù)責(zé)人分二次揭盲。

1.3 樣本量

由于未能檢索到以往類似的研究報道，本次試驗所涉及樣本量依據(jù)臨床方案要求確定為132例，味連組:雅連組=1:1。

1.4 治療方案

參考既往文獻(xiàn)[3]將雅連、味連制備為藥粉加入干燥淀粉裝膠囊使用，保留了其有效成分。

試驗用研究藥物味連（Coptis chinensis Franch.）和雅連（Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao）由四川大學(xué)藥學(xué)院生藥教研室負(fù)責(zé)提供并鑒定，鑒定人：王曙，四川大學(xué)藥學(xué)院教授。藥物制備由四川省中醫(yī)醫(yī)院藥劑科完成（將雅連、味連分別粉碎、浸泡、提取、過濾、噴霧干燥成藥粉加入干燥淀粉裝膠囊、滅菌備用。每粒膠囊裝0.4 g相當(dāng)于原生藥1.5 g/粒）。規(guī)格：0.4 g/粒，批號090416。雅連、味連的用法用量相同均為口服，1次2粒，1日3次。療程3天。兩組藥物外觀、包裝完全一致。納入后原則上不得使用其他的合并藥物，且不得加大試驗藥物的劑量。

1.5 觀察指標(biāo)

分別于治療前和治療后3天詳細(xì)觀察并記錄患者的中醫(yī)癥狀、體征。治療前、治療后第3天各檢查血、尿常規(guī)、便常規(guī)、肝腎功能、心電圖各1次。治療過程中觀察患者有關(guān)不良反應(yīng)。

主要療效指標(biāo)：①大便次數(shù)、大便質(zhì)地；②腹瀉起效時間；③止瀉時間。

次要療效指標(biāo)：①腹瀉療效；②證候療效；③癥狀療效。

1.6 療效效判定標(biāo)準(zhǔn)

急性感染性腹瀉療效判定標(biāo)準(zhǔn)：痊愈：大便次數(shù)及便質(zhì)恢復(fù)正常，癥狀積分減少≥95%，大便常規(guī)檢查正常；顯效：大便每日2-3次，基本成形，或便溏僅1次/日，癥狀積分減少≥70%，大便常規(guī)檢查正常；有效：大便次數(shù)及便質(zhì)好轉(zhuǎn)，癥狀積分減少≥30%，大便常規(guī)有所改善；④無效：大便次數(shù)及便質(zhì)無好轉(zhuǎn)，癥狀積分減少＜30%，大便常規(guī)無改善。

胃腸濕熱證中醫(yī)證候療效判定標(biāo)準(zhǔn)：痊愈：治療后癥狀積分和減分率≥95%；顯效：治療后癥狀積分和減分率≥70%，＜95%；有效：治療后癥狀積分和減分率≥30%，＜70%；④無效：治療后癥狀積分和減分率＜30%。

主癥療效判定標(biāo)準(zhǔn)：痊愈：主癥消失，主癥積分和為0；顯效：主癥積分和減少≥70%；有效：主癥積分和減少≥30%；無效：主癥積分和減少＜30%。

腹瀉起效時間及大便復(fù)常時間評定標(biāo)準(zhǔn)

腹瀉起效時間：從服藥開始至大便次數(shù)及性狀減少1級的時間即為起效時間。

止瀉時間：從服藥開始至大便次數(shù)降至每日3次以下，性狀正常時的時間。

1.7 統(tǒng)計學(xué)處理

采用全分析集（full analysis set，F(xiàn)AS）人群、符合方案（per-protocol set，PP）人群和安全性（Safety set，SS）人群。對藥物不良事件的統(tǒng)計，納入至少接受一次治療且有試驗記錄的受試者。根據(jù)研究目的和資料的性質(zhì)選用恰當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計方法，如t檢驗，χ2檢驗、 檢驗，秩和檢驗等。利用SAS統(tǒng)計軟件包對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，P值小于或等于0.05將被認(rèn)為所檢驗的差別有統(tǒng)計意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料

本試驗共入組患者130例，4例脫落，脫落率3.08%，2例剔除，剔除率1.54%，4例脫落原因均為患者自動退出，1例剔除原因為撤回知情同意全未治療，1例為病程3天，不符合納入標(biāo)準(zhǔn)。全分析集128例，雅連組65例，味連組63例；符合方案集124例，雅連組62例，味連組62例；安全性數(shù)據(jù)集129例，雅連組66例，味連組64例。雅連組和味連組在性別、年齡構(gòu)成和年齡均值、病程、既往史、中醫(yī)癥狀積分、舌脈象、病情程度、用藥依從性、合并用藥等組間比較，無統(tǒng)計學(xué)差異，組間具有可比性。

2.2 臨床療效判定分析

2.2.1 大便次數(shù)和大便質(zhì)地 本次研究中有4例患者因門診失訪未完成研究而脫落，F(xiàn)AS集128例，PP集124例，各項指標(biāo)FAS集與PP集結(jié)論均一致，因此文中只列出了FAS集的相關(guān)圖表。

表1 兩組主要癥狀治療后分值變化比較（FAS）

2.2.2 腹瀉起效時間和止瀉時間

表2 兩組腹瀉起效時間和止瀉時間比較（FAS）

2.2.3 疾病療效

如圖1所示，雅連組和味連組在控制中心效應(yīng)影響后，兩組腹瀉分級療效差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）。

圖1 FAS集雅連、味連對急性感染性腹瀉患者腹瀉療效比較

2.2.4 胃腸濕熱證證候療效

如圖2所示，雅連組和味連組在控制中心效應(yīng)影響后，兩組胃腸濕熱證分級療效差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞ 0.05）。

圖2 FAS集雅連、味連對急性感染性腹瀉患者證候療效比較

2.2.5 癥狀體征治療前后分值變化分析

如表3和表4所示，療后3天雅連和味連組間癥狀療效差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞ 0.05）。

表3 FAS集次要癥狀治療后分值變化比較（n）

表4 FAS集次要癥狀治療后分值變化比較（n）

2.3 安全性評價

試驗期間無不良事件發(fā)生，無實驗室檢查異常。

3 討論

研究結(jié)果顯示雅連、味連均能改善患者的便次增多、便質(zhì)改變等癥狀，減輕腹痛、泄下急迫、瀉下不爽、肛門灼熱、腹中腸鳴等癥狀。雅連在減少便次方面療效優(yōu)于味連，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。在治療急性感染性腹瀉時，兩種不同基源黃連中，雅連可能較能代表黃連清熱燥濕，瀉火解毒之功。

關(guān)于黃連的記載可以上溯到《神農(nóng)本草經(jīng)》，直至目前仍為臨床常用。中國藥典（2005版）收載了3個基源種味連、雅連、云連，其中雅連與味連是目前黃連作為商品流通的主流品種，但既往臨床研究較多集中于黃連復(fù)方或黃連提取物進(jìn)行急性感染性腹瀉療效評價[4～6]，單獨(dú)以觀察不同基源種為目的，且僅使用黃連治療急性感染性腹瀉的觀察較少。

雅連生長環(huán)境要求較高，以野生為主，是具有代表性的川產(chǎn)道地名貴藥材，但近年產(chǎn)量逐漸減少，阻礙了雅連作為道地藥材的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，目前市場所用多為味連。中藥記載均以“雅連”為上品，近年對二者的區(qū)別研究局限在植物學(xué)和藥材鑒定方面[7～9]，缺乏足夠的臨床證據(jù)證明二者的區(qū)別，因而對雅連的品種保存和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展極為不利，因此本研究結(jié)合前期動物實驗研究結(jié)果，從基源著手進(jìn)行雅連和味連的功效比較，研究篩選出最能代表黃連功效的基源種以便大力發(fā)展，重點(diǎn)扶持，形成特色的川產(chǎn)道地藥材具有重要的現(xiàn)實和長遠(yuǎn)意義。

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（責(zé)任編輯：陳思敏）

A stratifed blocked, mutli-center, randomized double-blind , and parallel controlled trial on the functional differencebetween Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao and Coptis chinensis Franch. in curing acute infectious diarrhea

ZENG Jieping1, YAN Bo-hua1, LI Ji-shu4, DING Hong1, ZHANG Rui-ming2, ZHANG qing3, LI Ming-quan1, ZHOU Yi4//(1.Sichuan Province Hospital of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610075, Sichuan; 2.West China Hospital of Sichuan University, Chengdu 610041, Sichuan; 3.Chengdu Fifth People’s Hospital,Chengdu 611130, Sichuan; 4.Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610075, Sichuan)

Objective:To compare the curative effect on acute infectious diarrhea of Yalian (Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao) with Weilian (Coptis chinensis Franch.), and to identify the most representative species of Huanglian in clearing heat and drying dampness, alleviating pathogenic fire and disintoxicating.Method:The patients with acute infectious diarrhea (gastrointestinal damp-heat syndrome) were randomly divided into two groups. Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao group (Superfne powder of Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao 3g, po, tid, for 3 days.) and Coptis chinensis Franch. group (Superfne powder of Coptis chinensis Franch. 3g, po, tid, for 3 days).Result:130 cases were included in the trial with 65 cases in Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao group and 65 cases in Coptis chinensis Franch. group. After 3 days treatment, no statistical signifcance was found of the curative effect between two groups on acute infectious diarrhea (P＞0.05) which suggested that both groups had equivalent effcacy. After 3 days treatment, no statistical signifcance was observed of the effect between two groups on clearing gastrointestinal damp-heat syndrome (P＞0.05) which suggested that both groups had equivalent effcacy. Signifcant different was observed in the improvement of main symptoms such as increased defecation frequence between the two group (P ＜0.05) which suggest that the curative effect of the Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao group was better than the Coptis chinensis Franch. group. No severe adverse effect was observed in two groups.Conclusion:The Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao has a better effect than the Coptis chinensis Franch. in reducing defecation frequence. Between both species, the Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao may be more representative species of Huanglian in clearing heat and drying dampness, alleviating pathogenic fre and disintoxicating .

Species; Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao; Coptis chinensis Franch.; clearing heat and drying dampness ; alleviating pathogenic fre and disintoxicating

R 28

A

1674-926X(2014)05-016-04

國家“十一五”科技支撐計劃“不同基源川貝母、黃連功效差異性及相關(guān)成方制劑的臨床再評價研究”（2007BAI40B06）

1.成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，四川 成都 610075；2. 四川大學(xué)華西醫(yī)院，四川 成都 610041；3. 成都市第五人民醫(yī)院，四川 成都 611130；4. 成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 610072

曾潔萍，博士，主治醫(yī)師，主要從事中藥臨床藥理研究 Tel:02887718923 Email:987175654@qq.com[通訊作者]丁紅，碩士，主任醫(yī)師，主要從事中藥臨床藥理研究 Tel:028-87765620 Email:gcpdh@163.com

2014-05-03