離線二維高速逆流色譜分離制備湖北海棠葉中的黃酮化合物

丁 瓊 任達(dá)兵 秦燕華 梁逸曾

(中南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院中藥現(xiàn)代化研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410083)

引言

湖北海棠(Malus hupehensis)，又稱(chēng)茶海棠、野海棠，廣泛地作為一種觀賞樹(shù)種，其嫩葉可作茶，果能消食并供釀酒[1]。湖北海棠廣泛生長(zhǎng)于湖北西部山地，長(zhǎng)江中游，湖南，云南中、南部。湖北海棠含有茶多酚、黃酮、Zn、Cr、Mn等多種礦物質(zhì)等,具有抗菌消炎、耐缺氧、抗疲勞、降血糖等多種藥理作用[2]。

高速逆流色譜(high-speed countercurrent chromatography，簡(jiǎn)稱(chēng)HSCCC)是由美國(guó)的Ito博士在液-液分配色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的新型制備分離色譜技術(shù)[3]。相對(duì)于其他色譜技術(shù)，HSCCC具有不需要固定相支撐體、溶劑可回收、樣品前處理要求低等優(yōu)點(diǎn)[4]。尤其是其無(wú)不可逆吸附的特點(diǎn)在天然物質(zhì)的分離提取中有無(wú)可比擬的優(yōu)勢(shì)。雖然高速逆流色譜的引進(jìn)時(shí)間比較晚，但是它已經(jīng)廣泛用于天然產(chǎn)物的分離分析[5]。本文采用離線二維高速逆流色譜法[6]分離提取湖北海棠葉中的主要黃酮成分，獲得三個(gè)高純度黃酮化合物，為該中藥的提取工藝提供了一個(gè)新的選擇。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器、試劑與材料

TBE-300B半制備型高速逆流色譜儀(上海同田生物技術(shù)有限公司)，包括恒流泵，紫外檢測(cè)儀(254nm,280nm)，N2010色譜工作站，采用多層聚四氟乙烯螺旋管(直徑1.6nm，總?cè)莘e280mL)，20mL進(jìn)樣圈，HX-1050恒溫循環(huán)器(北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)，BSZ-100自動(dòng)餾分收集器(上海青浦滬西儀器廠)。Ultimate 3000高效液相色譜(HPLC)儀(美國(guó)Dionex公司)，包括HPG-3x00RS二元梯度泵，WPS-3000RS自動(dòng)進(jìn)樣器，MWD-3000RS DAD檢測(cè)器，TCC-3000 RS柱溫箱，CHROMELEON色譜工作站，在線脫氣機(jī)。R-1002型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)；……