瑞香狼毒的化學成分

陳健勇，劉光明，張 于，郝小江，何紅平

（1.大理學院藥學與化學學院，云南大理 671000；2.中國科學院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續利用國家重點實驗室，昆明 650201；3.云南中醫學院藥學院，昆明 650500）

瑞香狼毒的化學成分

陳健勇1，2，劉光明1，張 于2，郝小江2，何紅平3*

（1.大理學院藥學與化學學院，云南大理 671000；2.中國科學院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續利用國家重點實驗室，昆明 650201；3.云南中醫學院藥學院，昆明 650500）

目的：對瑞香狼毒（Stellera chamaejasme）的化學成分進行研究。方法：采用硅膠柱層析、C18反相柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析和HPLC等方法分離瑞香狼毒的化學成分，采用波譜技術鑒定化合物的結構。結果：從中共分離鑒定了5個化合物，分別是：（2R，3S）-3-（3，4-二甲氧基芐基）-2-（3，4-亞甲二氧基芐基）丁內酯（1）、haplomyrfolin（2）、雙氫芝麻素（3）、異新狼毒素A（4）和瑞香狼毒素B（5）。結論：化合物1～3為首次從該植物中分離得到。

瑞香狼毒；瑞香科；化學成分

瑞香狼毒（Stellera chamaejasme），為瑞香科狼毒屬多年生草本植物，產我國北方各省區及西南地區〔1〕。其干燥根莖為中藥“狼毒”的正品〔2〕。其性味苦平，有逐水祛痰，破疾殺蟲之功效〔3〕。現代報道瑞香狼毒具有較強的抗腫瘤、抗HIV、抗菌和殺蟲等多種生理活性〔4-8〕。瑞香狼毒的化學成分主要是雙二氫黃酮、香豆素、木脂素和二萜等〔9〕。為了進一步發現其生物活性成分，我們對產于云南的瑞香狼毒藥材進行了化學成分的研究。從瑞香狼毒根部的乙酸乙酯萃取部位中分離得到5個化合物，分別為（2R，3S）-3-（3，4-二甲氧基芐基）-2-（3，4-亞甲二氧基芐基）丁內酯（1）、haplomyrfolin（2）、雙氫芝麻素（3）、異新狼毒素A（4）和瑞香狼毒素B（5）。其中，化合物1～3為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

1.1儀器與試劑Bruker AM-400核磁共振儀，以四甲基硅烷（TMS）為內標；ESI質譜由Waters 2695 HPLC–Thermo Finnigan LCQ Advantage型離子阱質譜儀測定；HPLC為Agilent 1100；凝膠Sephadex LH-20（Pharmacia）；柱色譜用硅膠和GF254型薄層層析硅膠均為青島海洋化工廠產品；所用有機試劑均為工業純，使用前重蒸；顯色劑有碘顯色劑和2% H2SO4的乙醇溶液（噴灑后加熱顯色）。

1.2試驗材料瑞香狼毒于2011年10月采自云南省香格里拉縣，由中科院昆明植物研究所陳渝老師鑒定為瑞香狼毒（Stellera chamaejasme L.），樣品標本（No.H20111006）存放于中國科學院昆明植物研究所。

2 提取與分離

瑞香狼毒根干燥，粉碎，取樣8.0 kg用甲醇回流提取3次，每次4 h；合并提取液后進行減壓蒸餾回收甲醇得到浸膏，將浸膏加水稀釋后用乙酸乙酯萃取4次，得浸膏500 g。將浸膏用500 g硅膠（60～80目）拌樣，2.5 kg硅膠（200～300目）裝柱，依次用石油醚∕丙酮（v/v=9∶1，8∶2，7∶3，6∶4）和氯仿∕甲醇（v/v=9∶1，8∶2，0∶1）分為A-M等13段，在經過硅膠柱層析、C18反相柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析以及HPLC等分離手段反復分離純化，從F段中分離得到化合物1（23.2 mg），2（9.6 mg），3（5.3 mg），5（20.3 mg）；從K段中分離得到化合物4（5.2 mg）。

3 結構鑒定

化合物1：淡黃色油狀；C21H22O6；ESIMS m/z 371〔M+H〕+，393〔M+Na〕+，409〔M+K〕+，763〔2M+Na〕+；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.75（1H，d，J=8.1 Hz，H-5"），6.70（1H，d，J=7.7 Hz，H-5'），6.60（1H，d，J=1.7 Hz，H-2'），6.57（1H，d，J=7.7 Hz，H-6'），6.56（1H，d，J=8.1 Hz，H-6"），6.47（1H，d，J=1.7 Hz，H-2"），5.92（2H，s，3'-OH2O-4'），4.14（1H，dd，J=9.2，7.1 Hz，Ha-4），3.87（1H，dd，J=9.2，7.4 Hz，Hb-4），3.84（3H，s，-OCH3），3.82（3H，s，-OCH3），2.95（1H，dd，J=14.0，5.1 Hz，Ha-5），2.84（1H，dd，J=14.0，7.0 Hz，Hb-5），2.52（4H，m，H-2，3，6）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：178.5（s，C= O），149.0（s，C-3"），147.8（s，C-3'，4"），146.4（s，C-4'），131.3（s，C-1'），130.4（s，C-1"），122.2（d，C-6'），120.6（d，C-6"），111.6（d，C-2"），111.2（d，C-5"），109.4（d，C-2'），108.1（d，C-5'），101.0（t，3'-OCH2O-4'），71.2（t，C-4），55.9（q，-OCH3），55.7（q，-OCH3），46.4（d，C-2），41.2（d，C-3），38.2（t，C-6），34.7（t，C-5）。以上數據與文獻〔10〕的波譜數據基本一致，故鑒定該化合物為（2R，3S）-3-（3，4-二甲氧基芐基）-2-（3，4-亞甲二氧基芐基）-丁內酯。

化合物2：淡黃色無定形粉末；C20H20O6；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.74（1H，d，J=7.9 Hz，H-5），6.65（1H，d，J=7.4 Hz，H-5'），6.53（1H，brs，H-2'），6.52（1H，d，J=7.4 Hz，H-6'），6.45（1H，d，J= 7.9 Hz，H-6），6.39（1H，brs，H-2），5.87（2H，s，3-OCH2O-4），5.51（1H，s，-OH），4.08（1H，t，J=7.3 Hz，Ha-9'），3.81（1H，overlapped，Hb-9'），3.71（3H，s，3'-OCH3），2.89（1H，dd，J=13.5，4.8 Hz，Ha-7），2.83（2H，dd，J=13.7，6.7 Hz，Hb-7），2.48（4H，m，H-7'，8'，8）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：178.5（s，C-9），147.8（s，C-3），146.5（s，C-3'），146.4（s，C-4），144.4（s，C-4'），131.3（s，C-1），129.7（s，C-1'），122.2（d，C-6），121.2（d，C-6'），114.5（d，C-5'），110.9（d，C-2'），109.5（d，C-2），108.2（d，C-5），101.0（t，3-OCH2O-4），71.2（t，C-9'），55.8（q，3'-OCH3），46.4（d，C-8），41.3（d，C-8'），38.3（t，C-7'），34.7（t，C-7）。以上數據與文獻〔11〕的波譜數據基本一致，故鑒定該化合物為haplomyrfolin。

化合物3：淡黃色油狀；C20H20O6；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.86（1H，s，H-2），6.78～6.65（5H，m，arom.H），5.97（2H，s，-OCH2O-），5.95（2H，s，-OCH2O-），4.82（1H，d，J=6.2 Hz，H-7），4.07（1H，dd，J=8.5，6.7 Hz，Ha-9'），3.92（1H，dd，J=10.7，7.0 Hz，Ha-9），3.78（2H，m，Hb-9，9'），2.90（1H，dd，J=14.0，5.3 Hz，Ha-7'），2.72（1H，m，Hb-7'），2.55（1H，dd，J=13.4，10.6 Hz，H-8），2.39（1H，m，H-8'）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ:147.8（s，C-3），147.7（s，C-4），146.8（s，C-3'），145.9（s，C-4'），137.0（s，C-1'），134.1（s，C-1），121.4（d，C-6'），119.0（d，C-6），108.9（d，C-5'），108.3（d，C-5），108.0（d，C-2'），106.2（d，C-2），101.0（t，3-OCH2O-4），100.9（t，3'-OCH2O-4'），82.8（d，C-7），72.9（t，C-9'），60.8（t，C-9），52.6（d，C-8），42.3（d，C-8'），33.2（t，C-7'）。以上數據與文獻〔12〕的波譜數據基本一致，故鑒定該化合物為雙氫芝麻素。

化合物4：淡黃色無定形粉末；C30H22O10；ESIMS m/z 431〔M-H〕-；1H NMR（400 MHz，acetone-d6）δ：11.98（2H，s，5，5′′-OH），7.13（4H，d，J=8.4 Hz，H-2′，6′，2′′′，6′′′），6.85（4H，d，J=8.4 Hz，H-3′，5′，3′′′，5′′′），5.94（2H，d，J=1.8 Hz，H-8，8′′），5.83（2H，d，J=1.8 Hz，H-6，6′′），5.06（2H，brs，H-2，2′′），3.81（2H，brs，H-3，3′′）；13C NMR（100 MHz，acetone-d6）δ：196.5（s，C-4，4′′），167.8（s，C-7，7′′），165.3（s，C-5，5′′），164.0（s，C-9，9′′），159.4（s，C-4′，4′′′），130.6（d，C-2′，6′，2′′′，6′′′），128.5（s，C-1′，1′′′），116.4（d，C-3′，5′，3′′′，5′′′），102.5（s，C-10，10′′），97.1（d，C-6，6′′），95.8（d，C-8，8′′），81.9（d，C-2，2′′），48.4（d，C-3，3′′）。以上數據與文獻〔13〕的波譜數據基本一致，故鑒定該化合物為異新狼毒素A。

化合物5：褐色無定形粉末；C33H28O10；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：11.96（1H，s，-OH），11.92（1H，s，-OH），7.06（4H，d，J=8.2 Hz，H-2′，6′，2′′′，6′′′），6.90（4H，d，J=8.1 Hz，H-3′，5′，3′′′，5′′′），6.08（1H，d，J=2.2 Hz，H-6′′），5.99（1H，d，J=1.8 Hz，H-6），5.97（1H，d，J=2.2 Hz，H-8′′），5.88（1H，d，J=1.8 Hz，H-8），5.97（2H，d，J=11.1 Hz，H-2，2′′），3.79（6H，s，4′，4′′′-OCH3），3.88（3H，s，7-OCH3），2.84（2H，d，J= 12.0 Hz，H-3，3′′）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：196.6（s，C-4′′），196.0（s，C-4），167.9（s，C-7′′），164.6（s，C-7），164.2（s，C-5′′），164.0（s，C-5），162.9（s，C-9′′），162.5（s，C-9），160.4（s，C-4，4′′），129.2（d，C-2′，6′，2′′′，6′′′），128.4（s，C-1′，1′′′），114.2（d，C-3′，5′，3′′′，5′′′），103.1（s，C-10′′），103.0（s，C-10），96.7（d，C-6′′），95.3（d，C-6），95.2（d，C-8′′），94.1（d，C-8），83.4（d，C-2，2′′），55.7（q，4′，4′′′-OCH3），55.4（q，7-OCH3），49.6（d，C-3，3′′）。以上數據與文獻〔14〕的波譜數據基本一致，故鑒定該化合物為瑞香狼毒素B。

〔1〕中國科學院中國植物志編委會.中國植物志:52卷〔M〕.北京:科學出版社，1999:397.

〔2〕卓兆蓮，高英，李衛民，等.中藥狼毒的本草考證:為“瑞香狼毒”正名〔J〕.時珍國醫國藥，2007，18（12）:3119–3122.

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〔14〕徐志紅，秦國偉，李曉玉，等.瑞香狼毒中新的雙黃酮和活性化合物〔J〕.藥學學報，2001，36（9）:668-671.

*通信作者：何紅平，教授，博士.

（責任編輯 李 楊）

Chemical Constituents of Stellera chamaejasme

CHEN Jianyong1，2,LIU Guangming1,ZHANG Yu2,HAO Xiaojiang2,HE Hongping3*
（1.College of Pharmacy and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China;2.State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources Sustainable Utilization in West China,Kunming Institute of Botany,Chinese Academy of Sciences,Kunming 650201, China;3.School of Pharmacy,Yunnan University of Traditional Chinese Medicine,Kunming 650500,China）

Objective:To research the chemical constituents ofStellera chamaejasme.Methods:The constituents were isolated from the plant by silica gel column chromatography,C18 reversed phase chromatography,Sephadex LH-20 gel filtration chromatography and HPLC.Their structures were elucidated by spectroscopic methods.Results:Five known compounds were isolated and identified as (2R,3S)-3-(3,4-dimethoxybenzyl)-2-(3,4-methylenedioxybenzyl)-butyrolactone(1),haplomyrfolin(2),dihydrosesamin(3), isoneochamaejasmine A(4)and ruixianglangdusu B(5),respectively.Conclusion:Compounds 1-3 were isolated from this plant for the first time.

Stellera chamaejasme;thymelaeaceae;chemical constituents

R284.1

A

1672-2345（2014）08-0001-03

10.3969∕j.issn.1672-2345.2014.08.001

云南省中青年學術技術帶頭人后備人才資助項目（2010CI047）

2014-04-21

2014-04-28

陳健勇，碩士研究生，主要從事天然藥物化學研究.