藏藥革葉兔耳草揮發油的化學成分研究

劉 娜，周樹婭，尹艷清，趙雪秋,楊麗娟

(云南民族大學 民族藥資源化學國家民委-教育部重點實驗室，云南 昆明 650500)

革葉兔耳草(Lagotisalutacea)系玄參科(Scrophulariaceae)兔耳草屬(Lagotis)多年生草本植物，藏藥名為“洪連”，為藏藥中上品藥物，主要分布于青海﹑西藏、甘肅、云南等地[1].其全草入藥，具退熱﹑降血壓、調經解毒之功效.用于治療肝膽病、高熱、煩渴、腸痧、炭疽、瘡毒、傷筋等癥[2].目前，藏醫用云南兔耳草主治各種類型的肝炎，有較好的療效.近年來，已有文獻對兔耳草屬植物的化學成分進行了研究，發現其中主要成分為黃酮﹑環烯醚萜苷、苯丙素苷及有機酸類化合物[3-6].研究顯示藏藥革葉兔耳草的粗提物具有抗氧化活性[7].革葉兔耳草的化學成分及揮發油成分研究至今未見報道.本研究用水蒸氣蒸餾法提取革葉兔耳草的揮發油，采用氣相色譜-質譜聯用法，對其化學成分進行了分析，從揮發油中分離出約70個峰，經分析鑒定了其中59種成分，用面積歸一法測定各種成分的相對質量分數，所鑒定成分占總峰面積的82.38%.

1 實驗部分

1.1 儀器與材料

Trace 1 310 型氣相色譜與ISQ單四級桿質譜聯用儀.氣相色譜條件：石英毛細管柱TG-5MS，30 m×0.25 mm，膜厚0.25 μm.載氣為氦氣，分流比60∶1，柱前壓40 kPa，柱流量0.8 mL/min，進樣口溫度250 ℃，接口溫度250 ℃，進樣量1 μL. 升溫程序：從40 ℃開始以3 ℃/min升到10 ℃，保持1 min，然后4 ℃/min升到180 ℃，保持1 min，再以5 ℃/min升到250 ℃，保持4 min；質譜條件：離子源溫度250 ℃，電離方式EI，電子能量70 eV，掃描質量范圍30～500m/z.

革葉兔耳草(Lagotisalutacea)全草于2009年11月采于云南香格里拉，樣品經云南民族大學楊青松副教授鑒定.

1.2 提取方法

革葉兔耳草干燥全草粉碎5.0 kg，于室溫下用95%的工業乙醇浸泡，合并提取液，過濾，減壓濃縮得到乙醇浸膏，然后用石油醚萃取，回收石油醚，石油醚萃取物加入乙醚溶解，再加入蒸餾水進行水蒸氣蒸餾，收集餾出液；用無水乙醚萃取3次，合并乙醚萃取液，回收乙醚；用無水硫酸鈉干燥24 h，得到淺黃色油狀物，具有特殊芳香氣味，密封保存.

2 結果與分析

2.1 革葉兔耳草中揮發油成分的總離子流圖

革葉兔耳草中揮發油成分的總離子流圖如圖1.

經計算機質譜數據系統檢索(NIST MS Search 2.0)，從云南產的革葉兔耳草揮發油中總共鑒定了59個成分，其相對質量分數占總峰面積的82.38%，主要成分及其在揮發油中含量見表1.

2.2 對革葉兔耳草揮發油的化學組分進行氣相色譜-質譜分析

表1 革葉兔耳草揮發油的化學成分分析結果

續表

序號t/min分子式相對分子質量化合物相對質量分數/%611.72C8H16O1283-羥基-1-庚烯0.13711.93C12H16O6256苯基-β-D-葡萄糖苷0.05812.07C9H121201,2,5-三甲基苯0.05912.27C8H16O128正辛醛0.041012.71C6H12O2116正庚酸0.701113.64C8H16O8240l-Gala-l-ido-octose0.131215.05C8H16O1282-辛烯-1醇0.171315.71C16H30O224011-環戊基十一酸0.061416.1C9H18O142壬醛0.351518.04C9H16O140鳶尾醛0.551618.78C9H10O1341-(3-甲基苯基)乙酮0.151719.22C9H16O21562-乙基丁酸烯丙酯0.071819.73C10H20O2172辛酸乙酯0.481919.93C9H14O138(E,E)-2,4-壬二烯醛0.362020.44C8H13NO1392 - 氧雜-6 - 氮雜三環[3.3.1.1(3,7)]癸烷0.142120.61C9H16O21564-氧代壬醛0.822221.28C14H25F3O22823-三氟乙酸基十二碳烷0.452321.73C10H18O154(E)-2-癸烯醛0.852422.61C9H16O31722-羥基環己甲酸乙酯 0.392522.83C21H38O23222′-己基-[1,1′-二環]-2-辛酸甲酯0.242623.06C10H16O31841,4-過氧化-2,3-環氧驅蛔萜0.172723.21C20H40O2312(Z)-2-(9-十八碳烯基氧基)-乙醇0.172823.51C10H16O1522,4-癸二烯醛1.462923.8C9H16O1404,4,6-三甲基-2-環己烯-1-醇3.643024.54C11H20O21845-庚基-2(3H)呋喃酮0.293126.04C11H22O2186壬酸乙酯1.773227.17C9H10O3166香草乙酮2.273327.83C12H22O11342β-D-乳糖苷0.533428.17C9H10O3166藜蘆醛3.173528.39C18H34O22824-辛烯酸乙酯0.703629.08C10H14O1502-(2-丁烯基)-環己酮0.433729.29C11H20O32009-氧代壬酸乙酯8.693829.77C11H16O2180(R)-5,6,7,7a-四氫-4,4,7a-三甲基-2(4H)-苯并呋喃酮0.633930.22C12H20O4228愈傷酸1.024031.92C11H20O32009-氧代癸酸甲酯0.624132.68C12H11N169二苯胺5.214232.94C17H36O2562-甲基-1-十六烷醇0.404333.24C19H40268十九碳烷0.594433.90C28H48O4002-甲烯基-3-羥基膽甾烷0.474534.80C12H22O2198乙酸香茅酯1.744636.03C19H40268十九碳烷1.704738.23C16H32O2256肉豆蔻酸乙酯2.64

續表

序號t/min分子式相對分子質量化合物相對質量分數/%4838.84C17H362402,6,10-三甲基-十四碳烷1.124939.64C18H36O268 植酮4.505040.40C18H34O2282油酸4.545140.90C17H34O2270十五酸乙酯1.625241.68C13H16O42363,4-二甲基肉桂酸乙酯1.005342.71C18H34O2282棕櫚油酸乙酯0.615443.31C18H36O2284棕櫚酸乙酯20.835543.77C18H36O268十八碳醛1.185645.41C19H38O2298珠光脂酸乙酯0.545746.65C20H36O2308亞油酸乙酯9.215846.81C20H38O2310油酸乙酯4.005947.39C20H40O2312硬脂酸乙酯1.49

3 討論

從分析結果可以看出藏藥革葉兔耳草揮發油中主要成分為棕櫚酸乙酯(20.83%) ﹑亞油酸乙酯(9.21%)﹑9-氧代壬酸乙酯(8.69%)﹑二苯胺(5.21%)﹑肉豆蔻酸乙酯(2.64%)﹑正己烷(3.73%)﹑藜蘆醛(3.17%)﹑4,4,6-三甲基-2-環己烯-1-醇(3.64%)﹑油酸(4.54%)﹑植酮(4.50%)﹑香草乙酮(2.27%)﹑油酸乙酯(4.00%)﹑硬脂酸乙酯(1.49%)﹑壬酸乙酯(1.77%)﹑十九碳烷(1.70%)﹑乙酸香茅酯(1.74%)等.其中最主要成分是棕櫚酸乙酯，該成分呈微弱蠟香、果爵和奶油香氣，用做食品添加劑﹑食用香料﹑香精以及有機合成等；另外，揮發油中的亞油酸乙酯是人體必需脂肪酸之一，它直接影響著動物的生長和繁殖能力，亞油酸及亞油酸乙酯具有降低血清膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇的作用.在醫療方面，亞油酸及其衍生物主要用作預防和治療動脈硬化等疾病的藥物[8]；9-氧代壬酸乙酯具有強烈的葡萄香氣、玫瑰香氣、果香和酒香，用做食用香料、香精.此外，植酮是合成維生素E醋酸酯的中間體；愈傷酸與凝膠多糖聯合具有愈合創傷活性，因此它是一種治療外傷不留傷痕的理想藥品.從化合物類型來看，革葉兔耳草的揮發油中，主要有單萜和倍半萜類化合物，其具有多方面的生物活性，并且是某些中藥的主要有效成分.

氣質聯用技術集成了色譜和結構鑒定的光譜手段之優點，已廣泛應用于中藥研究領域，特別是對揮發油成分的分析研究[9-10].本研究通過GC-MS聯用技術對革葉兔耳草揮發油含量和有效成分的分析評價，對開發利用革葉兔耳草資源在創制中成藥新品種，天然香料及綜合利用等方面提供了科學依據.

參考文獻:

[1] 全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編[M].3版. 北京: 人民衛生出版社，2009.

[2] 云南省藥材公司. 云南中藥資源名錄[M].北京: 科學出版社, 1993.

[3] 郗峰, 鄧君, 王彥涵, 等. 藏藥短管兔耳草的化學成分研究[J].中國中藥雜志, 2010, 35(7) : 869-871.

[4] 羊曉東, 趙靜峰, 任海英, 等. 藏藥云南兔耳草的化學成分研究(I)[J].云南大學學報：自然科學版, 2003, 25(2) : 141-143.

[5] 楊麗娟, 羊曉東, 李良. 藏藥云南兔耳草的化學成分研究[J].中藥材,2005, 28(9) : 767-768.

[6] 楊麗娟, 羊曉東, 趙靜峰, 等. 藏藥云南兔耳草的化學成分研究(II)[J].中藥材，2006, 29(2) : 128-130.

[7] 張娜, 周樹婭, 尹艷清, 等. 藏藥革葉兔耳草粗提物的抗氧化活性研究[J].云南民族大學學報：自然科學版, 2012, 22(1) : 5-9.

[8] 吳建良, 郝聰俐, 宋曉華, 等. 藥用亞油酸乙酯的研制[J].浙江化工, 2004, 35(5) : 5.

[9] 楊秀嶺, 張蘭桐, 袁志芳. 色譜聯用技術在中藥研究領域的應用[J].中國藥房, 2006, 17(1): 63.

[10] 吳玫涵, 聶凌云. 氣相色譜-質譜聯用技術在我國中藥研究中的應用[J].解放軍藥學學報, 2002, 18 (2): 34.