張家口地區角膜潰瘍病原菌的流行病學調查研究

閆俊琴，閻敏娜，李 偉，馬朋朋，李雙霞

(1.萬全縣中醫院檢驗科，河北 張家口 075000； 2.河北北方學院第一附屬醫院檢驗科，河北 張家口 075000；3.中國人民解放軍251醫院病理科，河北 張家口 075000； 4.河北北方學院第一附屬醫院骨科，河北 張家口 075000；5.中國人民解放軍251醫院檢驗科，河北 張家口 075000)

近年來，角膜潰瘍的發病率顯著升高。該病病因復雜，可影響患者的視力和生活質量，治愈后常會留下瘢痕，且致病菌因地域及氣候不同而發生變化，據估計每年全球范圍內因眼外傷和角膜潰瘍導致的失明人數高達200萬[1]。正常角膜防御機制損傷后，幾乎所有的病原體均可侵入角膜基質，造成復雜的角膜感染[2]。但因缺乏明確且特殊的臨床特征，很難明確導致角膜潰瘍的病因，因此確定為何種病原體引發的感染以明確診斷,從而確保角膜潰瘍得到準確具體的治療非常重要[3]。張家口地處高寒地區，環境條件復雜，角膜潰瘍多發，對致病菌病原學和流行病學特點了解不多。本研究旨在調查確定張家口地區角膜潰瘍相關的病原體流行病學特點及風險因素，以期為疾病控制和臨床診治提供一定的依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2010年12月至2012年6月張家口地區萬全縣中醫院、河北北方學院第一附屬醫院及解放軍251醫院收治的367例角膜潰瘍患者作為研究對象，其中男253例、女114例，年齡(33.8±2.7)歲；職業構成：農民141例，體力勞動者87例，商人63例，學生22例，其他職業54例。患者主訴視物模糊，有異物感、輕度眼痛、畏光、流淚、眼瞼痙攣等癥狀，球結膜充血或混合性充血、睫狀體充血、前房積膿。

1.2方法

1.2.1標本采集與診斷 首先對患者實施詳細的眼部檢查，進行麻醉后在無菌條件下從患者潰瘍邊緣取得病灶組織，取適量涂布于載玻片上，用制備好的10%氫氧化鉀(購于上海生物工程公司)溶液處理后行革蘭染色鏡檢，進行初步判斷。

1.2.2病原體培養與鑒定 ①細菌培養：將獲得的角膜潰瘍組織接種于平板上進行培養。每日觀察培養板生長情況，若7 d后仍無任何生長情況即棄去；②真菌培養：將獲得的角膜潰瘍組織接種于含有氯霉素的沙氏葡糖瓊脂(sabouraud′s dextrose glucose agar，SDA)固體平板上(培養液配制試劑購于上海生物工程公司)，每個標本接種兩塊平板，分別置于25 ℃和37 ℃進行培養。每日觀察SDA平板生長情況，3周后仍無任何生長情況即棄去。

待形成菌落后鏡下觀察病原體生長情況，根據病原體形態和結構特點及菌落特征使用鑒定標準進行菌種鑒定[4]。

2 結 果

2.1角膜潰瘍患者基本情況 367例角膜潰瘍患者中男性占68.9%，其中以21～30歲年齡段居多，占38.7%(98/253)；女性占31.1%，以31～40歲年齡段居多，占30.7%(35/144)。

2.2微生物培養及鑒定情況 所有角膜潰瘍患者中，共有218例(59.4%)病原體培養顯示陽性，其中130例(59.6%)為真菌性感染，88例(40.4%)為細菌性感染。對細菌培養陽性的患者進一步評估其職業和易患風險因素，其中潰瘍發生率由高到低依次為農民(114例，52.3%)，勞動者(50例，22.9%)，商人(24例，11.0%)，學生(8例，3.7%)；203例患者有明確外傷史，其中植物劃傷136例、塵埃21例、白內障手術19例、糖尿病13例、其他傷14例，15例無外傷史。

2.3微生物流行病學情況 真菌性角膜潰瘍中分離出的真菌以鐮刀菌屬最為常見，其次為曲霉菌屬和假絲酵母屬，其他菌屬占28.5%，多種感染形式并存(表1)；在細菌性角膜潰瘍中，革蘭陽性球菌為分離出的最主要的細菌類型以肺炎鏈球菌最常見。假單胞菌是分離出的最主要的革蘭陰性桿菌，多種感染形式并存(表2)。

表1 角膜潰瘍患者分離出的真菌情況

表2 角膜潰瘍患者分離出的細菌情況

3 討 論

角膜潰瘍可由細菌、真菌、寄生蟲和病毒及其他多種原因引發[5]，危害非常嚴重，其迅速發展造成的眼部損傷，可能對視力造成威脅并有可能引起角膜穿孔而導致失明[6]，是發展中國家導致失明的一個主要原因，因此及時準確的病因判定對其臨床有效治療非常重要[7]。

角膜潰瘍的發病范圍廣，可影響所有的年齡段[8]。張家口地區地理環境復雜，部分地區處高寒區域，風沙較大，農業人口居多，經濟作物以玉米為主。本研究中角膜潰瘍患者以男性為主(68.9%)，以21～30歲年齡段居多；女性患者占31.1%，以31～40歲年齡段居多。男性發病率高于女性，與其在戶外工作期間容易受傷有關；中年階段潰瘍發生率較高，這也與該年齡段人群從事戶外工作為主有關，符合本地區人群分布特點。結合研究對象工作情況分析得出，大部分患者從事農業相關工作，多與農作物種植有關，其中玉米秸稈葉和塵埃造成的眼部損傷是角膜損傷的主要風險因素。

多種因素決定微生物性角膜潰瘍的臨床治療效果[9]，病原學與流行病學調查顯示該病有明顯的氣候特異性和地域性差異，可因條件不同而存在區別[10]。本研究367例角膜潰瘍患者中，有218例(59.4%)病原體培養陽性，149例(40.6%)培養陰性，未發現病原體的例數較高，可能與這些患者入院就診前已經進行局部用藥治療有關。培養陽性標本中以真菌較多(130例，59.6%)，主要致病菌屬為鐮刀菌屬(49.2%)，其次為曲霉屬(13.1%)和假絲酵母屬(9.2%)；細菌檢出率為40.4%，革蘭陽性球菌是分離出的最主要的細菌類型，其中肺炎鏈球菌最常見(25例，28.4%)，葡萄球菌次之(19例，21.6%)；假單胞菌(9例，10.2%)是分離出的最主要的革蘭陰性桿菌。本研究中，病原體培養陽性的患者中存在細菌/真菌復合感染的情況，且存在細菌和真菌的交叉感染，說明病原體危害嚴重，多種病原體的復合感染使患者的診治更加困難。本研究通過分析目前張家口地區角膜潰瘍致病病原體流行病學特點，初步了解了該病常見病原真菌菌種的種類和變化方向，為指導臨床疾病的控制和治療提供重要依據，具有重要意義。

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