醫院感染肺炎克雷伯菌的分布及耐藥性分析

李玉芬 劉楊 劉金祿

肺炎克雷伯菌是臨床重要的條件致病菌之一，主要存在于人體上呼吸道和腸道，當人體免疫力低下時可以引起感染［1］。近年來，隨著廣譜抗菌藥物在臨床的廣泛應用，該菌的耐藥性日趨嚴重。特別是產ESBLs肺炎克雷伯菌的耐藥性更廣更強。給臨床治療及醫院感染的控制帶來困難，而且已對人類的健康造成極大威脅［2］。因此，對于肺炎克雷伯菌的臨床感染分布，特別是耐藥性分析顯得尤為重要，現對我院2013年分離得到的267株肺炎克雷伯菌進行分析，報道如下。

1 材料和方法

1.1 標本來源267株肺炎克雷伯菌分離自我院住院患者臨床各科室送檢的感染性標本，包括痰液、尿液、咽拭子、膿性分泌物、血液等。

1.2 試劑與器材 細菌鑒定及藥敏試驗采用Phoenix-100全自動細菌鑒定儀(BD公司生產)及配套的鑒定卡BD PhoenixTM NMIC/ID-4;天津市金章科技發展有限公司生產的一次性血瓊脂培養基;杭州天和微生物試劑有限公司生產的細菌干粉培養基系列麥康凱瓊脂。

1.3 培養及鑒定(1)細菌分離:首先涂片做革蘭染色，除血標本外其余標本分別接種于血平板培養基和麥康凱培養基，37℃培養18～24 h待觀察。其中尿標本需定量培養計數菌落數(cfu)＞105/ml，血標本需床旁接種于血培養瓶中，置全自動血液分析儀中培養，待報陽以后去除血培養瓶轉種于血平板培養基和麥康凱培養基，37℃培養18～24 h待觀察。(2)鑒定及藥敏:培養和鑒定按《全國臨床檢驗操作規程》，分離出的菌落即按標準方法進行革蘭染色，挑選麥康凱平板上隆起、大而黏液樣、粉紅色菌落，染色結果為革蘭陰性桿菌。用無菌棉簽挑選該單個菌落研磨至Phoenix-100全自動細菌鑒定儀配套的生化試劑瓶內，配制0.5麥氏比濁度，從中取25 μl加入滴加指示劑的藥敏試劑瓶中，將配好的兩瓶菌液分別加入陰性板(BD PhoenixTM NMIC/ID-4)的生化孔與藥敏孔，上機。(3)結果判定:按照美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)2013年推薦的標準判讀。

1.4 質量控制 用肺炎克雷伯菌ATCC 700603為質控參考菌株。

1.5 統計學分析 數據處理采用WHONET 5.6統計軟件分析。

2 結果

2.1 科室分布2013年1月-2013年12月我院分離得出的267株肺炎克雷伯菌科室分布以神經內科、呼吸內科、心血管內科、ICU、內分泌科等為主，分別為14.6%、12.0%、11.6%、11.2%、6.7%。見表1。

表1 267株肺炎克雷伯菌的科室分布構成比 株(%)

2.2 標本類型2013.01-2013.12我院分離得出的267株肺炎克雷伯菌的標本類型以痰液標本最多，占77.1%;其次為尿液、分泌物標本，占10.9%、5.2%。見表2。

表2 267株肺炎克雷伯菌的標本類型構成比 株(%)

2.3 藥敏試驗結果267株肺炎克雷伯菌對除亞胺培南、美洛培南、阿米卡星耐藥率較低以外的16種抗生素有不同程度耐藥，產超廣譜β-內酰胺酶菌株的檢出率為19.5%;非產超廣譜β-內酰胺酶菌株的耐藥率明顯低于產超廣譜 β-內酰胺酶菌株的耐藥率。見表3。

表3 267株肺炎克雷伯菌對19種抗菌藥物的耐藥率%

3 討論

近年來，肺炎克雷伯菌已經成為醫院感染以及免疫缺陷者感染患者的重要機會致病菌，可通過患者之間的交叉感染或者人工呼吸機等相關醫療器械傳播，其在免疫力低下或者接受有創性診療的患者中可以引起敗血癥、肺炎、尿道或腹腔感染［3］。由表1分析可知，肺炎克雷伯菌科室分布主要在神經內科、呼吸內科、心血管內科、ICU、內分泌科，可能由于這些科室的患者病情嚴重，免疫力水平低下、患病時間長、聯合多種藥物治療等有關［4］。由表2分析可知，肺炎克雷伯菌的標本類型以痰液標本為主，其次為尿液標本，說明肺炎克雷伯菌常引起的是呼吸道感染以及泌尿系感染，于相關文獻［5］報道一致。

由表3分析可知，肺炎克雷伯菌對多種抗菌藥物產生耐藥，對我院分離出的278株肺炎克雷伯菌的19種抗菌藥物的耐藥性檢測數據進行分析可知，除亞胺培南、美洛培南、阿米卡星耐藥率偏低外，非產超廣譜β-內酰胺酶菌株對氨芐西林、氯霉素、四環素、氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑啉、哌拉西林的耐藥率分別是73%、15.5%、14.1%、10.2%、10.8%、10.7%，其余對12種抗生素的耐藥率均低于10%，而產超廣譜β-內酰胺酶菌株對亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率分別是3.8%、5.9%、9.8%、17.3%、25.5%，對其余14種抗生素均高于50%，甚至達100%。因此非產超廣譜β-內酰胺酶菌株的耐藥率明顯低于產超廣譜β-內酰胺酶菌株的耐藥率，而本院肺炎克雷伯菌產ESBLs菌株的檢出率為19.5%，低于劉業霞［6］報道的臨沂市沂水中心醫院的檢出率，這與不同地區、不同醫院的用藥習慣有關，同時也說明我院在ESBLs陽性菌株引起的感染控制工作較好。

雖然本院肺炎克雷伯菌產超廣譜β-內酰胺酶菌株的檢出率較其他醫院低，但卻出現了3株耐碳青霉烯類菌株，其檢出率與2011年度全國細菌耐藥監測網［7］報告基本一致，在前幾年未曾發生。由于產酶菌株的出現將大大增加臨床治療中的困難，因此，在臨床治療中，臨床醫生應對細菌耐藥性引起高度重視，且必須根據藥敏結果合理、有效的選用抗菌藥物，特別是對該菌檢出率較高的科室以及易患人群。

1 劉曉平，蔡朝陽，邵小華，等.肺炎克雷伯菌耐藥性趨勢及特征性分析.蚌埠醫學院學報，2013，38:339-342.

2 陳瑤，韓昌洪，鮮于麗.肺炎克雷伯菌臨床感染分布及耐藥性分析.實用藥物與臨床，2010，13:229-230.

3 王曉君，應斌松.醫院感染肺炎克雷伯菌的分布及耐藥性分析.海峽藥學，2013，25:183-184.

4 楊懷德，張進軍.臨床感染肺炎克雷伯菌耐藥性分析.國際檢驗醫學雜志，2010，1:1267-1269.

5 曲穎，蔣曉飛.醫院感染肺炎克雷伯菌的分布及耐藥性分析.中華醫院感染學雜志，2011，21:5068-5071.

6 劉業霞.超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌耐藥性分析.工企醫刊，2011，24:4-5.

7 張偉麗，孔海深，楊青，等.Mohnarin 2011年度報告:華北地區細菌耐藥監測.中華醫院感染學雜志，2012，22:4965-4970.