草烏毒性及“減毒存效”實驗研究進展

王聿成等

[摘要] 通過檢索文獻并整理分析，總結了1988～2013年間有關草烏毒性及“減毒存效”的實驗研究進展。主要包括3方面：（1）草烏毒性及其機制的實驗室研究進展；（2）草烏“減毒存效”實驗研究進展；（3）訶子對草烏“減毒存效”機制的實驗研究進展。

[關鍵詞] 草烏；毒性；減毒；存效

[中圖分類號] R932 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2014）01-41-03

草烏為毛茛科多年生野生植物北烏頭的干燥塊根，其味辛、苦，性熱，有大毒，具有祛風除濕，溫經止痛的功效。草烏在臨床上治療一些疑難疾病取得了較好療效，但因其有毒性在一定程度上制約了草烏的使用，為此，本文通過檢索CNKI數據庫和萬方數據庫，合并“草烏”“毒性”“解毒”等關鍵詞，獲取了近1988～2013年間的研究文獻，對草烏在毒性及其“減毒存效”方面的實驗室研究進展綜述如下，為研究草烏“減毒存效”方法提供參考。

1 草烏毒性實驗室研究進展

現代研究表明，草烏的主要毒性成分為雙酯型生物堿，包括烏頭堿、次烏頭堿和中烏頭堿等，其毒性主要是損害循環系統及中樞神經系統，刺激神經系統，特別是迷走神經系統和感覺神經系統，先興奮后抑制，對心肌尚有直接作用，可因呼吸或心肌麻痹而死亡[1]。

1.1 心臟毒性實驗室研究進展

王衍堂[2]對生草烏的心臟毒性進行了心肌細胞體外實驗研究，結果表明其毒性與給藥濃度密切

相關，低劑量組心肌細胞無明顯毒性損害，高劑量組則出現大量細胞形態改變甚至凋亡、細胞搏動特征丟失、細胞活力下降、氧化損傷作用明顯等強心肌細胞毒性。劉剛等[3]對草烏急性中毒時組織病理學改變及血漿中毒性成分的研究結果表明：兔在灌胃草烏乙醇提取物后，迅速出現心律失常、血壓下降并呈進行性加重趨勢，心肌、肝、腦組織均可見水腫、充血、細胞浸潤等病理學改變，且毒性程度與血漿中的雙酯型生物堿濃度呈正相關性。

對于草烏中雙酯型生物堿致心肌毒性的機制研究，主要有以下幾個觀點：致心肌細胞線粒體能量代謝障礙，誘導心肌細胞凋亡，Na+通道異常致Na+內流[4]。其中線粒體能量代謝障礙方面研究較多，李宏等[5]研究顯示，烏頭堿抑制琥珀酸脫氫酶（SDH）活性，導致線粒體有氧代謝障礙，并通過研究線粒體細胞色素C氧化酶（CCO）發現，烏頭堿干擾呼吸鏈的跨膜電子傳遞，失去單方向傳遞的特點，使跨膜質子不能形成，ATP合成發生障礙。梁強榮等[6]研究顯示，烏頭堿干預后的30min、2h、4h，還原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶（NADHD）活性明顯降低，而NADHD是NADH氧化呼吸鏈的第一個酶環節。梁強榮等[7]研究發現，烏頭堿干預后大鼠心肌乳酸脫氫酶（LDH）活性增強，LDH是無氧氧化標志酶，其活性增強為有氧氧化途徑能量生成障礙的繼發表現。

1.2 草烏神經毒性實驗室研究進展

韓屾等[8]通過體內和體外研究發現，草烏在大鼠整體動物實驗中未見神經毒性，而在體外培養的海馬神經元模型表現出神經毒性，認為可能與血腦屏障及體內代謝有關。何曉娟等[9]從自發活動、肌肉耐力和學習記憶3方面了解生草烏對小鼠神經系統的毒性作用，結果顯示其高、中、低劑量組均對小鼠精神神經系統無毒性作用。

2 草烏“減毒存效”實驗室研究進展

2.1 中醫藥對草烏“減毒存效”實驗室研究進展

中醫臨床使用草烏主要采取的減毒方法為炮制減毒，即長時間煎煮，以切開內無白心、口嘗微有麻舌感為標準[10]。其主要原理是雙酯型生物堿受熱后C8位上的乙酰基和C14位上的苯甲酰基先后水解最終生成毒性較小的苯甲酰單酯型烏頭堿和烏頭原堿[11]。

劉瑤等[12]通過研究草烏煎煮時間及給藥劑量與其毒性的相關性得出結論，草烏在煎煮30min，給藥劑量為臨床用量120倍時，草烏水煎液對痹證動物產生的毒性最大，但此時藥效也最佳。張宏[13]研究草烏煎煮時間及給藥劑量對抗炎藥效的影響，認為草烏抗炎作用的最佳煎煮時間為6h，最佳給藥劑量為2.4g/kg。柴玉爽等[14]研究了草烏及其炮制品的毒效情況，結果顯示草烏以2005版《中華人民共和國藥典》方法炮制后毒性和藥效同時降低。

2.2 藏、蒙醫藥對草烏“減毒存效”的實驗室研究進展

在藏醫藥和蒙醫藥中，臨床應用草烏時多采取訶子湯制草烏、甘草制草烏、酸奶制草烏、童便制草烏等炮制方法以及配伍訶子的配伍減毒方法。侯敏等[15]通過急性毒性試驗，研究不同炮制方法的草烏毒性由低到高依次為：高壓蒸制草烏、訶子制草烏、清水制草烏、甘草制草烏、酒炙草烏、去尖刮皮制草烏、酸奶制草烏、鹽水制草烏、童便制草烏。楊暢等[16]通過測定并比較訶子配伍草烏、訶子制草烏與生草烏各水煎液中生物堿的含量認為，訶子可以通過使草烏中雙酯型生物堿緩慢水解而起到解毒作用，且訶子制草烏較訶子與草烏配伍后草烏毒性小。李福全等[17]通過比較訶子湯制草烏與生草烏中總生物堿對體外大鼠乳鼠心肌細胞的毒性作用，得出結論：訶子湯制能有效的降低草烏的心肌毒性。烏蘭其其格等[18]對草烏及其炮制品的藥理毒理及藥效學進行了實驗研究，結果顯示烘制能顯著降低草烏毒性，童便炮制也能降低草烏毒性，而訶子湯炮制不能降低草烏毒性；炮制品的體外抗菌作用均較生品提高，其中訶子制的抑菌作用最好；實驗僅就草烏烘制品進行了抗炎、鎮痛和抑制毛細血管通透性的研究，結果顯示烘制品在減毒的同時均保證了原有的療效。

3 訶子對草烏“減毒存效”機制的實驗室研究進展

潘燕等[19]認為訶子可以通過影響心肌酶的變化而起到解草烏毒的作用，結果提示訶子對烏頭堿引起的心肌細胞內Ca2+增多有恢復作用，可促進鈣泵（Ca2+-ATPase）活性的恢復，且有一定劑量依賴關系。其主要依據是烏頭堿心肌毒性與其使細胞膜上鈉通道開放，鈉泵（Na+-K+-ATPase）受抑，細胞內Na+增多有關，Na+/Ca2+交換使細胞內Ca2+增多，心肌收縮加強導致心律失常[20]。訶子的丁酮和正丁醇提取物具有強心作用（直接作用于心臟，而不通過β1受體），訶子中的訶子素具有罌粟堿樣的緩解平滑肌痙攣作用[21]，這可能是訶子對抗草烏心臟毒性的依據。辛楊[22]利用電噴霧質譜技術對生草烏與訶子藥對的不同極性提取物中雙酯型生物堿成分進行了檢測，發現在低極性條件下，訶子會減緩雙酯型生物堿的釋放，由于人體小腸屬低極性環境，且酯型生物堿的主要吸收發生在小腸，當含有酯型生物堿的藥物到達小腸時，訶子的存在可以使雙酯型生物堿在小腸內的吸收減緩，從而起到緩釋和減毒作用。endprint

4 展望

實驗室研究表明，在體內外實驗中草烏具有明顯的心臟毒性，其主要毒性成分為雙酯型生物堿，作用機制涉及心肌細胞線粒體能量代謝障礙，誘導心肌細胞凋亡，Na+通道異常致Na+內流等方面；其神經毒性僅體現在體外實驗中上。煎煮、烘制以及訶子制或與訶子配伍等均可有效降低草烏的心臟毒性，烘制方法既能減草烏毒，又能保證草烏抗菌、抗炎和鎮痛方面的療效；其中訶子對草烏的減毒作用基本得到證實，但也有其不能減毒或減毒作用弱的實驗結果，且訶子能否在降低草烏毒性的同時保證草烏的藥效仍需要進一步研究。

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（收稿日期：2013-11-06）endprint