浙南地區(qū)女性人群OPRM1基因多態(tài)性（rs1799971）與舒芬太尼自控鎮(zhèn)痛效果的研究

諸光峰 上官王寧 張高嬌

浙南地區(qū)女性人群OPRM1基因多態(tài)性（rs1799971）與舒芬太尼自控鎮(zhèn)痛效果的研究

諸光峰 上官王寧 張高嬌

目的 探討OPRM1基因多態(tài)性（rs1799971）對(duì)浙南地區(qū)女性婦科手術(shù)患者舒芬太尼自控鎮(zhèn)痛效果的影響。方法收集浙南地區(qū)婦科手術(shù)患者200例，抽取外周血，采用直接測(cè)序法，分析患者OPRM1基因多態(tài)性（rs1799971），比較不同基因組患者之間舒芬太尼的累積量，記錄鎮(zhèn)痛起效時(shí)間、持續(xù)時(shí)間、VAS分值及不良反應(yīng)。結(jié)果 AA型127例，AG型62例，GG型11例，OPRM1基因多態(tài)性（rs1799971）基因突變頻率為36．50%，各基因組術(shù)后2、6、12h舒芬太尼累積量比較，AA組累積量最少，AG組及GG組均較AA組增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），術(shù)后24、48h，GG組較AA組及AG組增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。各基因型組間不良反應(yīng)發(fā)生率的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0．05）。結(jié)論 在浙南地區(qū)女性人群中，OPRM1基因多態(tài)性（rs1799971）對(duì)舒芬太尼鎮(zhèn)痛效果有顯著影響。

OPRM 基因多態(tài)性 舒芬太尼 自控鎮(zhèn)痛

手術(shù)患者由于手術(shù)本身及麻醉等因素的需要，術(shù)后常需要鎮(zhèn)痛。阿片類鎮(zhèn)痛藥，如舒芬太尼，主要作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的μ受體，其鎮(zhèn)痛療效在不同個(gè)體間差異甚大，其中一個(gè)重要機(jī)制為不同基因?qū)Π⑵愂荏w，尤其是μ受體的影響存在差異，μ受體是G蛋白偶聯(lián)受體，由μ阿片受體基因（OPRM）來(lái)編碼[1]。不同的基因型對(duì)嗎啡用量及其代謝產(chǎn)物6-葡萄糖醛酸嗎啡（M-6-G）有不同的影響[2]。筆者通過(guò)研究OPRM1基因多態(tài)性（rs1799971）對(duì)患者自控鎮(zhèn)痛舒芬太尼用量的影響，以闡述不同基因型與舒芬太尼代謝及鎮(zhèn)痛效果的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 收集2010-01—2014-05溫州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院婦科收治行婦科手術(shù)患者200例（包括子宮全切術(shù)、子宮次切術(shù)、開(kāi)腹子宮肌瘤剝除術(shù)），均為漢族，浙南地區(qū)，年齡20～53（41.71±11.98）歲；ASAⅠ～Ⅱ級(jí)。術(shù)前行簡(jiǎn)易智能精神狀態(tài)檢查量表（MMSE）評(píng)估，消除認(rèn)知功能障礙對(duì)術(shù)后鎮(zhèn)痛及疼痛評(píng)估的影響，排除患有嚴(yán)重肝臟和腎臟疾病、糖尿病、肝病、抑郁癥、焦慮癥、長(zhǎng)期使用止痛藥患者，術(shù)前1周服用解熱鎮(zhèn)痛類或者阿片類藥物者，使用與阿片類藥物動(dòng)力學(xué)相抵觸的聯(lián)合制劑者。排除因采血失敗、不合作、缺乏隨訪、初期疼痛視覺(jué)模擬評(píng)分法（VAS）＜2的患者，以及嚴(yán)重惡心、嘔吐等原因中途退出研究者。經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均充分了解研究方案并簽署知情同意書。

1.2 方法 術(shù)前禁食12h，禁飲8h。入手術(shù)室后，在手術(shù)開(kāi)始60min內(nèi)輸入乳酸林格液以補(bǔ)充禁食所失液體量。麻醉誘導(dǎo)：予咪唑安定0.1mg/kg、芬太尼5μg/kg、維庫(kù)溴銨0.1mg/kg靜脈注射，誘導(dǎo)氣管插管，接Drag麻醉機(jī)行純氧機(jī)械間歇正壓通氣（IPPV），維持呼末二氧化碳分壓（PETCO2）4～5kPa。術(shù)中靜脈持續(xù)輸注效應(yīng)室靶控濃度為2～3μg/ml的丙泊酚、每隔30min靜推維庫(kù)溴銨2mg，吸入濃度為2.5%～3.2%的七氟烷維持全麻；術(shù)中低血壓采用麻黃堿5mg，心動(dòng)過(guò)緩采用阿托品0.5mg處理。術(shù)中維持PETCO2的穩(wěn)定，同時(shí)監(jiān)測(cè)心率（HR）、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、平均動(dòng)脈壓（MAP）和中心靜脈壓（CVP），維持血流動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定。所輸入的液體均置入溫水箱中保溫達(dá)35℃。術(shù)中維持平均動(dòng)脈壓60～90mmHg。

舒芬太尼PCA泵配方：100ml 0.9%氯化鈉溶液中含舒芬太尼200μg，單次量0.04μg/kg，鎖定時(shí)間10min，設(shè)定最大量24μg/h，不設(shè)背景輸入量。拔管后10min開(kāi)始鎮(zhèn)痛。

1.3 觀察指標(biāo) 鎮(zhèn)痛效果評(píng)估指標(biāo)采用VAS，0分為無(wú)痛，10分為最痛，并在患者靜息狀態(tài)記錄VAS分值。患者入院即記錄VAS分值作為基礎(chǔ)對(duì)照值，并依次記錄術(shù)后2、6、12、24、48h VAS分值。術(shù)前一晚由固定的神經(jīng)精神科醫(yī)師對(duì)患者進(jìn)行焦慮抑郁評(píng)估，消除心理因素及其他因素對(duì)術(shù)后鎮(zhèn)痛的影響。觀察患者不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.4 基因型分型

1.4.1 DNA提取 所有受檢者均晨起抽取靜脈血3ml，采用DNA試劑盒（日本Takara公司），提取人白細(xì)胞基因組DNA。將提取好的DNA置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 基因型檢測(cè) 上游引物∶5＇-GGT CAAA CTT GTC CCA CTT AGA TCG C-3＇，下游引物∶5＇-AAT CAC ATA CAT GAC CAG GAA GTT T-3＇。行直接測(cè)序方法，讀取個(gè)體的基因型。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以表示，不同基因型組間比較采用方差分析，等位基因、基因型頻率和遺傳平衡定律（Hardy-Weinberg定律）及不良反應(yīng)發(fā)生率的比較采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 各基因分型及其一般資料的比較 OPRM1基因多態(tài)性（rs1799971）不同基因型分布如下：AA型127例，AG型62例，GG型11例，基因突變頻率為36.50%，結(jié)果顯示各組年齡、BMI、SBP、DBP、FPG、AST、ALT、肌酐、麻醉持續(xù)時(shí)間、MMSE評(píng)分比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），詳見(jiàn)表1。

表1 OPRM基因多態(tài)性（rs179997）各組患者一般資料的比較

2.2 Hardy-Weinberg平衡分析 OPRM基因多態(tài)性（rs1799971）基因型Hardy-Weinberg平衡分析，結(jié)果顯示趨向于遺傳平衡（χ2=0.86，P=0.35）。

2.3 各基因型患者術(shù)后舒芬太尼累積量及VAS比較 各基因型患者術(shù)后2、6、12h舒芬太尼累積量比較發(fā)現(xiàn)，AA組累積量最少，AG組及GG組均較AA組增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），術(shù)后24、48hGG組較AA組及AG組增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。其余比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。3組間術(shù)后2、6、12、24、48hVAS分值比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），詳見(jiàn)表2、3。

2.4 各基因型組不良反應(yīng)的比較 所有患者僅9例出現(xiàn)惡心、嘔吐、大汗等不良反應(yīng)，其中AA組4例，AG組2例，GG組3例，各組不良反應(yīng)的比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

本研究中浙南地區(qū)女性人群rs1799971基因突變頻率為36.50%，其在亞洲人中發(fā)生率35%～47%（中國(guó)人35%，泰國(guó)人44%，馬來(lái)西亞人45%，印度人47%），本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)外研究基本一致[3]。本研究選取浙南地區(qū)女性人群作為研究對(duì)象，盡量消除性別因素及地域因素的影響，術(shù)前進(jìn)行MMSE評(píng)分，盡可能排除認(rèn)知功能差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響[4]。本研究發(fā)現(xiàn)，與AA基因型相比，AG基因型患者舒芬太尼累積量在術(shù)后2、6、12h明顯增多，而GG基因型舒芬太尼累積量在術(shù)后各個(gè)時(shí)段均明顯增多；GG基因型較AG基因型舒芬太尼累積量在術(shù)后24h明顯增多。各基因型組間不良反應(yīng)的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。

表2 OPRM基因多態(tài)性不同基因型組患者術(shù)后PCA鎮(zhèn)痛期間舒芬太尼累積量（μg）

表3 OPRM基因多態(tài)性不同基因型組患者術(shù)后PCA鎮(zhèn)痛期間VAS的比較（分）

舒芬太尼、芬太尼、嗎啡等外源性阿片類鎮(zhèn)痛藥主要作用于μ受體繼而發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用。μ受體基因至少存在43個(gè)SNP[4]，在編碼區(qū)僅數(shù)個(gè)SNP會(huì)引起μ受體氨基酸順序的改變。例如，如果位點(diǎn)268的絲氨酸被脯氨酸替代后可嚴(yán)重?fù)p害μ受體的信號(hào)[5]。有研究發(fā)現(xiàn)，rs1799971基因突變導(dǎo)致μ受體N末端區(qū)的N-糖基化的40位點(diǎn)的天冬酞氨變?yōu)樘於彼幔瑥亩淖兪荏w與配體的親和力和受體的作用效能，且提示G等位基因純合子個(gè)體OPRM1與內(nèi)啡肽的親和力是A等位基因純合子的3倍[6]，致β-內(nèi)啡肽與μ阿片受體親和力增加，影響其代謝率及利用率。這可解釋本研究中AG及GG基因型患者在術(shù)后48h內(nèi)需要更多的舒芬太尼才能達(dá)到鎮(zhèn)痛效果。Chou等[7]發(fā)現(xiàn)，在全膝關(guān)節(jié)整形術(shù)后，突變純合子GG組對(duì)術(shù)后鎮(zhèn)痛嗎啡的需要量比AA組、AG組均明顯增多，研究結(jié)果與本研究結(jié)果類似。

本研究對(duì)OPRM1基因多態(tài)性（rs1799971）在浙南地區(qū)女性人群中的分布及其對(duì)舒芬太尼累積量的影響做了初步研究。但本實(shí)驗(yàn)仍存不足之處：首先，由于實(shí)驗(yàn)室條件限制，本研究暫未對(duì)血漿舒芬太尼及其代謝產(chǎn)物濃度進(jìn)行測(cè)定，缺少其藥代動(dòng)力學(xué)指標(biāo)；其次，本研究樣本量尚小，不足以代表浙江地區(qū)人群，有待加大樣本量進(jìn)一步研究；第三，對(duì)還有待進(jìn)一步研究關(guān)于增加術(shù)后舒芬太尼用藥量的確切作用機(jī)制。。

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Association between OPRM1 gene polymorphisms and effect of sufentanil in postoperative patient-controlled analgesia

Objective To investigate the association between OPRM1 gene polymorphisms and efficacy of sufentanil in postoperative patient-controlled analgesia．Methods Two hundred patients undergoing hystermyoma received postoperative patient-controlled analgesia(PCA)with sufentanil from January 2010 to May 2012．Peripheral blood samples were collected for DNA extraction．OPRM1 gene(rs1799971)polymorphisms were detected．The sufentanil consumption,the release time on analgesia,analgesic duration,VAS,and adverse reaction were documented and compared among different genotype groups． Results Genotyping analysis revealed that the genotype distribution of polymorphisms in OPRM1 gene was AA in 127 cases,AG in 62 cases,and GG in 11 cases．The frequency of OPRM1 mutation was 36．5%．The sufentanil consumption at 2h,6h and 12h after surgery and VAS at 24h and 48h after surgery in GG group were higher than those in AG and AA groups(P＜0．05)． Conclusion The results indicate that OPRM1 gene polymorphism has the significant impact on analgesic efficacy of sufentanil．

μ-opioid receptor gene Polymorphisms SufentanilPostoperative analgesia

2014-07-28）

（本文編輯：嚴(yán)瑋雯）

325000 溫州醫(yī)科大學(xué)（諸光峰為在職研究生，現(xiàn)在溫州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院麻醉科工作）；溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院麻醉科（上官王寧）；溫州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院麻醉科（張高嬌）

上官王寧，E-mail：sgwning@163.com