腫瘤靶向治療的新型細(xì)胞載體分析

羅 闊 綜述，陳曉品 審校（重慶醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院，重慶 400016）

靶向治療不僅可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞，還能夠用作靶向性病毒載體，因此具有十分廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域。現(xiàn)階段腫瘤靶向治療多利用具備高殺傷力、低免疫原性的病毒，例如SPG500、ONYX015以及CV706等源自腺病毒的低免疫原性病毒，或MTH－68／H、PV701等源自新城疫病毒的低免疫原性病毒等［1－5］。

1 傳統(tǒng)給藥方法與靶向治療方法

1．1 傳統(tǒng)給藥方法 對(duì)于傳統(tǒng)的病毒通常采用瘤體注射或者靜脈注射的給藥方式。瘤體注射給藥是指直接將病毒注射于患者的腫瘤部位，可以高效地使病毒到達(dá)腫瘤細(xì)胞所處位置。靜脈注射給藥是指將病毒注射入患者的靜脈中，主要適用于已出現(xiàn)腫瘤全身彌漫轉(zhuǎn)移的患者。瘤體注射以及靜脈注射方法均存在較多的缺陷。首先，瘤體注射往往會(huì)給患者造成一定的損傷，無法應(yīng)用于風(fēng)險(xiǎn)較高、操作較為復(fù)雜、腫瘤性質(zhì)為惡性或者發(fā)生了全身轉(zhuǎn)移的手術(shù)患者。其次，靜脈注射使病毒直接進(jìn)入了人體的血液循環(huán)，易導(dǎo)致病毒非特異性黏附于血細(xì)胞以及血管內(nèi)壁，或者受到抗體的中和作用而喪失侵染作用。此外，靜脈注射還由于病毒的高度損耗而使僅少量病毒可到達(dá)腫瘤組織，因此臨床療效有限。

1．2 靶向治療方法 由于傳統(tǒng)的給藥方法難以達(dá)到理想的臨床治療效果，細(xì)胞載體靶向治療方法便應(yīng)運(yùn)而生［6－8］。細(xì)胞載體靶向給藥是指將病毒包備于擁有腫瘤識(shí)別能力的細(xì)胞中，然后通過靜脈注射的方式使上述具有趨向性的細(xì)胞高效地到達(dá)腫瘤組織。當(dāng)前已經(jīng)得到應(yīng)用的靶向細(xì)胞包括具有腫瘤細(xì)胞特性、淋巴細(xì)胞特性的細(xì)胞等。然而，除淋巴細(xì)胞具備較強(qiáng)的趨向能力外，其他細(xì)胞都難以使病毒順利到達(dá)腫瘤組織。上述細(xì)胞的識(shí)別類型也較為單一，某些具備腫瘤特性的細(xì)胞還可能在患者體內(nèi)形成新的腫瘤組織。此外，上述細(xì)胞難以在體外進(jìn)行培養(yǎng)以及擴(kuò)增，在進(jìn)入人體后也難以逃避免疫系統(tǒng)的識(shí)別［9－10］。因此，有必要尋找一種新的具備廣譜識(shí)別能力、安全性高、穿透力強(qiáng)的新型細(xì)胞載體。細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞可以成功地掩護(hù)病毒逃避免疫監(jiān)視、具有較強(qiáng)的血管穿透力，進(jìn)而使得病毒可以高效到達(dá)腫瘤組織，因此作為細(xì)胞載體的應(yīng)用前景十分廣闊。

2 細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞的特性及應(yīng)用

2．1 細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞的特性 細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞作為一種新型細(xì)胞載體，是在體外經(jīng)過各種不同的細(xì)胞因子刺激誘導(dǎo)生成的異質(zhì)細(xì)胞［11］。細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞具備以下特性。（1）容易培養(yǎng)：細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞是從患者的外周血中分離、純化的單個(gè)核細(xì)胞，經(jīng)CD3單克隆抗體、白細(xì)胞介素－1α等的共同刺激而得到的，因此具備較強(qiáng)的體外擴(kuò)增能力。（2）高度安全：細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞是從患者自身外周血中獲得的，所以不會(huì)引發(fā)免疫排斥反應(yīng)；細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞不屬于腫瘤細(xì)胞，所以不會(huì)在患者體內(nèi)形成腫瘤組織，因此具備更高的安全性。（3）廣譜識(shí)別能力：細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞可以對(duì)腫瘤趨化因子進(jìn)行有效識(shí)別，進(jìn)而可以更加高效地穿透血管到達(dá)腫瘤組織，并通過結(jié)合腫瘤表面的配體而發(fā)揮腫瘤殺傷效應(yīng)。（4）掩護(hù)功能：由于細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞來源于人體的T淋巴細(xì)胞，所以沒有抗原遞呈功能，因此可以攜帶病毒順利逃避免疫系統(tǒng)的監(jiān)視而抵達(dá)腫瘤部位。（5）高效的穿透力：受趨化因子的作用，淋巴細(xì)胞可以通過改變形態(tài)而穿透血管上皮，并到達(dá)腫瘤組織。此外，細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞在釋放病毒之前便可以對(duì)腫瘤起到一定的殺傷作用，更有利于其攜帶的病毒抵達(dá)腫瘤組織的內(nèi)部，降低了侵染等造成的病毒損失。

2．2 適宜細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞載體的病毒 適宜細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞載體的病毒主要包括增殖型以及非增殖型兩類［12－15］。增殖型病毒能夠借助自身的增殖功能，使腫瘤細(xì)胞分裂、降解，或者通過抗瘤基因的作用，使腫瘤細(xì)胞逐漸死亡。傳統(tǒng)的給藥方法由于無法將病毒直接導(dǎo)入細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞中，因此需對(duì)病毒進(jìn)行適當(dāng)?shù)母脑臁Ｍǔ＿m宜細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞載體的病毒應(yīng)當(dāng)具備以下三方面特征。（1）限制性：具備選擇性感染腫瘤細(xì)胞的能力，具備足夠的安全性，在患者出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)時(shí)，先通過二次防范手段進(jìn)行控制；（2）感染性：可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞的高度侵染；（3）可調(diào)控性：載體細(xì)胞可以對(duì)病毒的增殖起到調(diào)控作用。

3 靶向治療的作用機(jī)制及效果

細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞及其所攜帶的病毒均能對(duì)腫瘤細(xì)胞發(fā)揮殺傷作用［16－17］。（1）直接殺傷功能：細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞在接觸到效應(yīng)細(xì)胞或者受淋巴因子刺激后，可釋放胞質(zhì)顆粒，進(jìn)而發(fā)揮對(duì)腫瘤細(xì)胞的直接殺傷作用。（2）促進(jìn)腫瘤凋亡：細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞可以表達(dá)Fasl蛋白，進(jìn)而發(fā)揮促進(jìn)腫瘤細(xì)胞逐漸凋亡的作用［18］。（3）調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答系統(tǒng)：細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞一方面能夠通過分泌白細(xì)胞介素、干擾素等直接殺傷腫瘤，還能夠通過調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答系統(tǒng)，發(fā)揮針對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。將病毒裝載于載體細(xì)胞中，有效彌補(bǔ)了傳統(tǒng)給藥方式的不足之處，并且通過對(duì)二者進(jìn)行結(jié)合，大大提高細(xì)胞的增殖能力，進(jìn)而可以長久地發(fā)揮對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。除此之外，患者自身的免疫系統(tǒng)在細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞以及病毒的共同刺激作用下，也能夠發(fā)揮較為長久的抗腫瘤作用。首先，細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞可以產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子，從而直接刺激免疫細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞，抑制腫瘤的發(fā)展。其次，病毒在溶瘤過程中產(chǎn)生的物質(zhì)可刺激患者體內(nèi)的細(xì)胞因子、粒細(xì)胞等大量釋放，并且可以發(fā)揮疫苗反應(yīng)，從而達(dá)到機(jī)體全身抗瘤的目的［19－20］。（4）插入片段的協(xié)同作用：通過在病毒的基因組中插入白細(xì)胞介素－12等相關(guān)的活化因子，能夠進(jìn)一步提高細(xì)胞的抗瘤功能，進(jìn)而達(dá)到更好的抗瘤效果。

總而言之，隨著研究的不斷深入，細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞的抗腫瘤效果將不斷提高，其他的病毒細(xì)胞載體也在不斷被發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用；靶向治療的細(xì)胞載體也將能夠更加安全、高效地發(fā)揮運(yùn)載病毒的功能，具有更加理想的抗瘤效果。

［1］ 王樹斌，袁飛，武云．納米載體在腫瘤靶向治療中的應(yīng)用［J］．中國組織工程研究與臨床康復(fù)，2009，13（29）：5739－5742．

［2］ 劉杏娥，孫曉東，吳金民．MAGE－3DNA疫苗的構(gòu)建及其免疫效果的觀察［J］．生物工程學(xué)報(bào)，2004，20（2）：165－169．

［3］ 楊文宇，黃宗海．腫瘤基因治療陽離子載體應(yīng)用中的問題與策略［J］．腫瘤防治雜志，2004，11（2）：191－194．

［4］ 戴維德．LDL受體在光動(dòng)力學(xué)治療腫瘤過程中對(duì)靶細(xì)胞吸收光敏劑的影響［J］．中國激光醫(yī)學(xué)雜志，2004，13（1）：67．

［5］ 肖樟生．由腫瘤特異性啟動(dòng)子mTERT promotor驅(qū)動(dòng)的m4－1BBL基因治療小鼠肝細(xì)胞肝癌的實(shí)驗(yàn)研究［D］．蘇州：蘇州大學(xué)，2009．

［6］ 倪芳，魯茁壯，王立生．靶向性腺病毒載體的研究進(jìn)展［J］．軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊，2006，30（2）：188－191．

［7］ 宋現(xiàn)讓，遲偉玲，魏玲，等．慢病毒shRNA表達(dá)載體介導(dǎo)人腫瘤細(xì)胞基因穩(wěn)定沉默的影響因素［J］．中國生物工程雜志，2007，27（2）：19－23．

［8］ 曹利民，潘宇紅．受體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移治療腫瘤的研究現(xiàn)狀［J］．南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，23（1）：109－111．

［9］ 劉海峰，房殿春．腫瘤靶向治療［J］．第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，25（16）：1491－1493．

［10］張明明，邱峰．基因治療載體的研究進(jìn)展［J］．科技資訊，2011，8（17）：225．

［11］葛葵葵．NK細(xì)胞活化受體CD226的表達(dá)及功能研究［D］．合肥：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)，2009．

［12］張婷，趙迎澤，羅進(jìn)勇，等．HBX基因逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建及在LO2細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)定表達(dá)［J］．南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，5（7）：1526－1529．

［13］李躍萍，宋麗萍，邱曙東．慢病毒載體在腫瘤基因治療中的應(yīng)用［J］．現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2006，14（12）：1614－1617．

［14］賈玉．Herceptin－NKG2D配體融合蛋白的抗腫瘤研究［D］．杭州：浙江理工大學(xué)，2010．

［15］范黎．殼聚糖智能靶向抗腫瘤藥物運(yùn)載系統(tǒng)研究［D］．西安：第四軍醫(yī)大學(xué)，2010．

［16］林鳳秋．基因治療及其在遺傳性血液病中的應(yīng)用［J］．國際輸血及血液學(xué)雜志，2010，8（4）：371－373．

［17］陳娟，余英豪．淋巴瘤基因治療相關(guān)技術(shù)的研究進(jìn)展［J］．實(shí)用癌癥雜志，2010，4（1）：88－90．

［18］丁凡，邵增務(wù)．骨肉瘤基因治療研究進(jìn)展［J］．中國矯形外科雜志，2008，16（17）：1326－1328．

［19］陸曉．陽離子聚合物PC偶聯(lián)小分子藥物協(xié)同基因的抗腫瘤活性研究［D］．杭州：浙江大學(xué)，2011．

［20］曾憲成，陳偉，張彤．人類白細(xì)胞抗原－G RNA干擾載體的構(gòu)建及效應(yīng)檢測［J］．中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志，2012，9（7）：712－717．