三七總皂苷對(duì)心肌缺血大鼠血清IL-6和AngⅡ的影響

姬艷蘇馮利民

（1.武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院，天津 300162；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，天津 300150）

三七總皂苷對(duì)心肌缺血大鼠血清IL-6和AngⅡ的影響

姬艷蘇1馮利民2

（1.武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院，天津 300162；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，天津 300150）

目的：研究三七總皂苷（Panax Notoginsenosides，PNS）對(duì)心肌缺血大鼠血清白細(xì)胞介素6（Interleukin6，IL-6）和血管緊張素Ⅱ（AngiotensinⅡ，AngⅡ）含量的影響。方法：采用結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支造成心肌缺血模型，將心肌缺血大鼠隨機(jī)分成模型組和PNS組，并設(shè)假手術(shù)組作為空白對(duì)照。PNS組給予PNS 120mg/kg，分別給藥3、7、14、28d后，檢測(cè)各組大鼠血清IL-6和AngⅡ含量。結(jié)果：在心肌缺血后3、7、14、28d，造模大鼠IL-6和AngⅡ含量均有不同程度的升高，在缺血早期IL-6迅速升高而在后期稍有下降，AngⅡ的含量隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高。PNS組給藥3d后IL-6較模型組即顯著下降，且持續(xù)到給藥28d；而給藥28d時(shí)AngⅡ才顯著低于模型組。結(jié)論：在急性心肌缺血期以炎癥反應(yīng)為主而在心肌缺血后期則以心肌纖維化為主。PNS可能在心肌缺血的每個(gè)階段均起到保護(hù)心肌的作用，即在心肌缺血早期起到抗炎作用，而在心肌缺血后期尤其是連續(xù)給藥14d后起到抗心肌纖維化作用。

心肌缺血 三七總皂苷 白細(xì)胞介素6 血管緊張素Ⅱ 實(shí)驗(yàn)研究

心肌缺血，是指心臟的血液灌注減少，心肌能量代謝不正常，不能支持心臟正常工作的一種病理狀態(tài)。本研究以結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支造成心肌供血不足，復(fù)制心肌缺血模型，以IL-6和AngⅡ作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，觀察三七總皂苷（PNS）對(duì)大鼠心肌缺血的影響。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雄性W istar大鼠400只，體重250～300g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物許可證編號(hào)：SCXK（京）2002-0003，分籠飼養(yǎng)，每籠5只，食水自由攝取。

1.2主要實(shí)驗(yàn)儀器MP-150多導(dǎo)生理記錄儀（BIOPAC systems Inc.，美國(guó)）；DU-530紫外分光光度計(jì)（DNA/ ProteinAnalyzer，BECKMAN，美國(guó)）；GC-911-γ-放射免疫計(jì)數(shù)器（中國(guó)科技大學(xué)實(shí)業(yè)總公司）；Allegra-64R Centrifuge低溫高速離心機(jī)（BECKMAN，美國(guó)）。

1.3 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑三七總皂苷（PNS），由浙江大學(xué)藥學(xué)院提供，批號(hào)：060427。IL-6檢測(cè)試劑盒，武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 心肌缺血模型制作方法大鼠用水合氯醛（300mg/kg）腹腔注射麻醉，將心電圖電極針埋于右上肢和左下肢皮下，記錄Ⅱ?qū)?lián)心電圖，參照文獻(xiàn)[1]的方法復(fù)制大鼠心肌缺血模型。于肺動(dòng)脈圓錐與左心耳間，離左冠狀動(dòng)脈前降支起始部3～4mm處繞前降支穿線，將心臟送回胸腔內(nèi)，止血鉗夾閉胸壁肌肉。穩(wěn)定5min后，結(jié)扎冠脈，觀察心電圖變化并記錄。心電圖顯示ST段明顯抬高的大鼠視為造模成功。假手術(shù)組的手術(shù)過(guò)程與上述相同，只穿線不結(jié)扎冠狀動(dòng)脈。

2.2 分組與給藥大鼠隨機(jī)分為模型組和PNS給藥3、7、14和28d組，以假手術(shù)組作為正常對(duì)照，每組12只。PNS以0.5%羧甲基纖維素鈉（CMC）水溶液配制，按照前期實(shí)驗(yàn)的結(jié)果制定PNS組給藥劑量為120mg/kg[2]，分別給藥3、7、14和28d。模型組和假手術(shù)組灌服等體積0.5%CMC水溶液，每日給藥1次。

2.3 指標(biāo)檢測(cè)末次給藥后，腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血，離心制備血清。按IL-6檢測(cè)試劑盒檢測(cè)血清IL-6含量，采用放免法測(cè)定血清AngⅡ的含量。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 PNS對(duì)心肌缺血大鼠血清IL-6的影響與假手術(shù)組比較，心肌缺血3、7、14和28d后，模型組大鼠血清的IL-6含量顯著升高（P＜0.05）。PNS給藥3、7、14和28d后，與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的模型組相比，大鼠血清IL-6含量均降低，其中3、7和28d組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01）。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血清IL-6含量比較（±s）pg/kg

表1 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血清IL-6含量比較（±s）pg/kg

注：與同時(shí)期假手術(shù)組比較，#P＜0.05；與同時(shí)期模型組比較，*P<0.05，**P＜0.01。

組別動(dòng)物數(shù)（只）給藥時(shí)間28d 14d假手術(shù)組12 120±22 119±34模型組12 161±40#162±36#PNS組12 147±30 116±51*3d 7d 159±38 149±30 213±68#204±56#127±45**156±52*

3.2 PNS對(duì)心肌缺血大鼠血清AngⅡ的影響結(jié)扎冠脈造成心肌缺血3、7、14和28d后，與假手術(shù)組相比，模型組大鼠血清AngⅡ含量顯著升高（P＜0.05）。PNS給藥3、7、14和28d后，與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的模型組相比，大鼠血清AngⅡ的含量均降低，給藥28d后明顯下降（P＜0.01）。見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血清AngⅡ含量比較（±s）pg/mL

表2 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血清AngⅡ含量比較（±s）pg/mL

注：與同時(shí)期假手術(shù)組比較，#P＜0.05；與同時(shí)期模型組比較，**P＜0.01。

假模P

4 討論

PNS是從藥用植物三七中分離出的皂苷成分，主要含三七皂苷、黃酮、多糖、蛋白、甾醇、無(wú)機(jī)物、揮發(fā)油和油脂等。研究顯示PNS能顯著改善左室收縮和舒張功能，降低血清酶的含量及心律失常發(fā)生率，并通過(guò)抗氧化和改善心肌細(xì)胞ATP的能量代謝而發(fā)揮對(duì)缺血心肌的保護(hù)作用[3-4]。

心肌缺血會(huì)造成炎癥反應(yīng)，在冠心病心肌缺血炎癥反應(yīng)初期，受TNF-α誘發(fā)，大量的IL-6被激活而發(fā)揮其介導(dǎo)炎癥和調(diào)節(jié)免疫的作用。如果心肌缺血較長(zhǎng)時(shí)間不能緩解，則會(huì)造成缺血部位的纖維化和心室重構(gòu)。AngⅡ作為腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的介質(zhì)之一，參與了心臟纖維化和/或結(jié)構(gòu)重構(gòu)的過(guò)程，具有多種調(diào)節(jié)機(jī)體功能的作用。因此本研究以IL-6和AngⅡ作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，探討PNS對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)的心肌缺血的治療作用。

結(jié)果表明，在心肌缺血后3、7、14、28d，IL-6和AngⅡ含量均有不同程度的升高。在缺血早期，IL-6迅速升高而在后期稍有下降，AngⅡ的含量隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高。提示在急性心肌缺血期以炎癥反應(yīng)為主，而在心肌缺血后期則以心肌纖維化為主。PNS在給藥3d后即可顯著降低IL-6，且持續(xù)到給藥28d；而直到連續(xù)給藥28d后才起到降低AngⅡ的作用。因此我們推測(cè)，PNS可能在心肌缺血的每個(gè)階段均起到保護(hù)心肌的作用，即在心肌缺血早期起到抗炎作用，而在心肌缺血后期尤其是連續(xù)給藥14d后起到抗心肌纖維化作用。本研究為PNS治療心肌缺血，制定給藥方案提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但關(guān)于PNS對(duì)心肌缺血不同發(fā)展階段的更深層次的防治機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

[1]Xiaoying Wang，Yi Wang，Min Jiang，et al.Differential Cardioprotective Effects of Salvianolic Acid and Tanshinone on Acute Myocardial Infarction Are Mediated by Unique Signaling Pathways.Journal of Ethnopharmacology，2011，135（3）：662

[2]劉杰，高秀梅，王怡，等.三七總皂苷對(duì)心肌缺血大鼠血流動(dòng)力學(xué)影響實(shí)驗(yàn)研究.天津中醫(yī)藥，2005，4（22）：158

[3]王本祥.現(xiàn)代中藥藥理與臨床.天津：天津科技翻譯出版公司，2004：79

[4]李娟莉，蘇式兵.三七總皂苷對(duì)大鼠急性心肌梗死的保護(hù)作用.中藥藥理與臨床，2013，29（1）：68

R541.405

A

1672-397X（2014）04-0072-02

姬艷蘇（1981-），女，碩士研究生，藥師，中藥藥理學(xué)專業(yè)。shasan_2001@163.com

2013-11-30

編輯：吳寧

國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目（81102534）