不同溫度下標本隨放置時間延長尿液紅細胞白細胞計數結果的變化分析

榮美桃，王潤琴，李美英

(陽泉煤業集團總醫院，山西陽泉 045000)

分析前質量控制是實驗室全面質量管理的重要環節，而標本存放是分析前質控的重要影響因素。應用新鮮尿檢查尿液中各種有形成分是臨床檢驗工作中除血液外數量最多的檢查內容。為了保證尿液檢驗結果的準確性，必須規范操作流程并充分考慮及排除上機檢測前相關標本的影響因素，其中包括尿液保存溫度及放置時間［1］。陽泉煤業集團總醫院檢驗科采用UF-1000i尿流式細胞分析儀分別對置于6℃、25℃下保存0.5、1、2、3、4 h的68 例新鮮清潔中段晨尿檢測 RBC及WBC計數，并將0.5 h所得RBC、WBC計數結果分別與其他時間段所測數值作比較，進行偏差分析，從而探討不同溫度下隨著標本放置時間的延長尿液中紅細胞及白細胞計數結果的變化。

1 材料與方法

1.1 標本

隨機收集本院門診及住院患者申請做尿液常規分析的新鮮清潔中段晨尿68例，每例分成兩份分別保存于6℃、25℃下。

1.2 儀器與試劑

Sysmex公司UF-1000i全自動尿流式細胞分析儀及配套試劑。應用的檢測原理是半導體激光流式細胞/核酸熒光染色技術，對各種有形成分的細胞膜、細胞核、細胞質進行特異性的核酸熒光染色;具有獨立的雙檢測通道(沉渣通道、細菌通道)，可排除標本采集過程中無法克服的雜菌對其他各有形成分檢測的干擾［2］。

1.3 方法

1.3.1 儀器準備 嚴格按照使用說明書保養與維護儀器，校準基礎上進行室內質量控制。

1.3.2 儀器檢測 用一次性帶刻度錐形螺口離心尿管收集尿液12 mL，于UF-1000i全自動尿流式細胞分析儀上分別將尿液標本保存于6℃、25℃下，按放置時間0.5、1、2、3、4 h的順序自動檢測。

1.3.3 記錄并計算均值 應用2003版Excel軟件整理不同溫度下不同放置時間68例標本RBC、WBC計數結果并分別計算均值。

1.4 統計學方法

計量資料采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。均值進行偏差分析:偏差(%)=(其他時間均值 －0.5 h均值)×100/0.5 h均值。

2 結果

2.1 不同溫度、不同放置時間尿RBC、WBC計數比較

依照不同溫度、不同放置時間對68例標本所得RBC、WBC計數結果分別計算均值，見表1。

表1 不同放置時間在不同溫度下尿液RBC、WBC計數比較 個/μL

6℃、25℃下隨著標本放置時間的延長尿液中紅細胞及白細胞會有不同程度的破壞，細胞數逐漸減少，見表1。

2.2 1、2、3、4 h與0.5 h作偏差分析結果比較

根據表1分別將6 ℃、25 ℃下保存1、2、3、4 h所得RBC、WBC計數結果與0.5 h之值比較，作偏差分析并將計數資料進行t檢驗。

與0.5 h比較，6 ℃、25 ℃下尿液放置1、2 h的 RBC計數偏差均小于6%、WBC計數均小于15%，差異無統計學意義(P＞0.05);6℃下保存3 h的RBC計數偏差小于6%、WBC計數小于15%，差異無統計學意義(P＞0.05);25℃下保存3 h的 RBC計數偏差大于6%、WBC計數大于15%，差異有統計學意義(P＜0.05);6℃、25℃下保存4 h的RBC、WBC計數偏差均較高，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 不同溫度下其他時間段RBC、WBC計數與0.5 h偏差比較

3 討論

在腎臟及泌尿系統疾病的診斷中，作為實驗室診斷的尿液常規分析仍舊占有重要地位。這種被稱為“體外腎活檢”的檢查方法不僅被臨床應用于了解腎臟及泌尿系統各部位的病理變化，有時對泌尿系統相關疾病的定位、鑒別及預后判斷等還具有直接的診斷意義［3］，其檢驗結果的準確性直接影響到疾病的診斷與治療。

為了保證尿液檢驗結果的可靠性，必須堅持質量管理。我國對尿液分析整體化規則的確立及細化研究提出了要求［4］，規范尿液操作流程、尿液檢查標準化可以起到一定促進作用。現在各大、小醫院檢驗科大都參加全國或各省市臨床檢驗中心組織的室間質量評價，實驗室都建立了比較完整的質量控制。在方法標準化、儀器高度自動化及室內質量控制的保障下，很好地控制著自吸取標本至獲得測定結果并對結果進行分析的整個測定過程，標本檢測的準確度和精密度都大大提高，單純的標本檢測的準確問題越來越少。目前發生的問題多與被檢標本的不合格有關，也就是說分析前質量控制不夠理想。

尿液分析領域中，正確采集尿液是保證待檢標本合格的重要前提，合理保存和規范化處理，是保證待檢標本完整的主要措施。不合格不完整的尿液標本其檢測結果并不能反映患者的實際狀態。因此，必須詳細規定獲取合格的完整的待檢尿液標本的各個環節，提高對尿液標本分析前的質量控制，從而提供比較真實的檢測數據。

在臨床工作中發現，尿液中紅細胞及白細胞離體后，尿液滲透壓、pH值和溶質成分隨著放置時間的延長會有不同程度的變化，可發生細胞數逐漸減少［1］。目前我國多數醫院普遍是住院患者清晨6:00留取晨尿，8:00送至檢驗科，加上儀器檢測前的準備工作，從標本留取到上機檢測結束往往需要3～4 h甚至更長，直接影響檢測質量。故本資料應用UF-1000i全自動尿流式細胞分析儀分析6 ℃、25 ℃下保存0.5、1、2、3、4 h的尿液中紅細胞及白細胞計數的變化。結果表明，與0.5 h比較，6℃、25℃下保存放置1、2 h的 RBC 計數偏差均小于6%、WBC計數均小于15%，差異無統計學意義(P＞0.05);6℃下保存3 h的RBC計數偏差小于6%、WBC計數小于15%，差異無統計學意義(P ＞0.05);但25℃下保存3 h的RBC計數大于6%、WBC計數大于15%，差異有統計學意義(P＜0.05);6℃、25℃下保存4 h的RBC、WBC計數偏差均較高，差異有統計學意義(P＜0.05)。參照美國CLIA88規定的最大允許偏差為RBC計數6%、WBC計數15%，建議室溫25℃下尿液紅細胞及白細胞計數最好在2 h內完成，標本存放于6℃下也不應該超過3 h。

由此說明，使用UF-1000i檢測尿液中紅細胞及白細胞數，尿液必須新鮮，且在采集后盡量減少運送環節，縮短儲存時間，于2 h內完成檢測。對不能及時檢驗的標本，必須進行適當方式保存，降低因放置時間延長引起的變化。冷藏保存尿液標本是最簡便的方法［1］。因尿酸鹽和磷酸鹽沉淀可影響計數，不推薦對2 h內可完成檢測的尿標本進行冷藏。

首次晨尿因在膀胱中停留時間較長，標本濃縮、偏酸，有形成分保持比較完整，細胞等有形產物檢出率較高，最適于尿液常規檢查，但需立即送檢［1］。許多待檢尿液尤其是病房患者留取的首次晨尿因各種原因未能及時送檢，放置時間延長后致其檢測結果發生改變，從而失去了其臨床參考價值。有文獻報道，病房患者使用第2次晨尿、門診或急診患者使用隨機尿標本［4］。第2次晨尿是指收集首次晨尿后2～4 h內的尿液標本，要求患者在前晚起到尿收集標本止，只飲200 mL水，以提高細胞計數靈敏度;而隨機尿比較新鮮，對有形成分的形態干擾最少，均適于尿常規檢查［1］。

［1］ 熊立凡，劉成玉.臨床檢驗基礎［M］.4版.北京:人民衛生出版社，2008.

［2］ 葉應撫，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.3版.南京:東南大學出版社，2006.

［3］ 叢玉隆.現代尿液分析技術與臨床［M］.北京:人民軍醫出版社，2007.

［4］ 叢玉隆，馬駿龍.尿液有形成分鏡檢與自動化檢測方法學利弊和互補分析［J］.中國檢驗醫學雜志，2009，32(6):609-611.