β—catenin和E—cadherin在胸腺腫瘤中的表達(dá)及意義

陳旭 徐林浩 張?zhí)鞆?qiáng)

【摘 要】目的：研究β-catenin和E-cadherin在胸腺腫瘤中的表達(dá)及意義。方法：采用免疫組化pv6000法對(duì)87例胸腺瘤中β-catenin和E-cadherin的表達(dá)，分析其在胸腺腫瘤中的意義。結(jié)果：β-catenin在胸腺瘤A 型、AB型、B1型、B2型 、B3型 、C型中的表達(dá)分別為33.3%、25%、29.4%、23.5%、33.3%、37.5%，之間的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。E-cadherin在胸腺瘤中A 型、AB型、B1型、B2型 、B3型 、C型中的表達(dá)分別44.4%、37.5%、41.2%、47.1%、58.3%、31.25%，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說明兩者與胸腺瘤WHO分性無關(guān)。兩者的表達(dá)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)（P<0.05）及胸腺瘤Masaoka分析有關(guān)。相關(guān)性分析顯示兩者之間具有正相關(guān)（r=0.403，p<0.05）。結(jié)論：β-catenin及E-caherin與胸腺腫瘤的侵襲性轉(zhuǎn)移有關(guān)，且兩者在胸腺瘤的侵襲過程中可能有協(xié)同作用，臨床上檢測E-caherin及β-catenin可能區(qū)別胸腺腫瘤的侵襲性。

【關(guān)鍵詞】β-catenin；E-cadherin；胸腺腫瘤；免疫組化學(xué)

【中圖分類號(hào)】R737.71 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004-7484（2014）04-2047-02

Signifucance of β-cateninand E-cadherin in Thymic Epithelial Tumor

Chen xu ，，Xu Lin-haoΔ Zhang Tian-Qiang

（Department of Thoracic Surgery，Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College，Qingdao 266003，China）

【ABSTRACT】Objective：To investigate the expression and significance of E-cadherin and β-catenin in thymic epithelial tumor.Methods：We immunohistochemically investigated the signifucance of β-cateninand E-cadherin in Thymic Epithelial Tumor in 87 patitents.Results： β - catenin expression in thymoma in type A， AB， B1， B2， B3， C were 33.3%， 25%， 29.4%， 25%， 33.3%， 37.5%， the difference between have no statistical significance （P > 0.05）. E - cadherin thymoma in type A， AB， B1， B2， B3， C type of expression， respectively， 44.4%， 37.5%， 41.2%， 47.1%， 58.3%， 47.1%， no statistically significant difference （P > 0.05）， and both have nothing to do with thymoma WHO separability. The expression of both associated with distant metastasis （P < 0.05） and thymoma Masaoka analysis. Correlation analysis showed that has a positive correlation （p < 0.05） between .Conclusion：β - catenin and E - caherin associated with thymic tumor invasive， and both in the process of invasive thymoma may have synergy， clinical detection of E - caherin and beta - catenin may Identify the thymic tumor invasive.

【Key words】β-catenin，E-cadherin，Thymic carcinoma；Immunohistochemistry

胸腺腫瘤是縱膈腫瘤中最常見的類型，占前縱膈腫瘤的50%，目前其發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移的機(jī)制尚不清楚。β-catenin是Wnt通路中重要的調(diào)節(jié)因子，其在細(xì)胞中的異常積聚，可以存進(jìn)腫瘤的發(fā)生及轉(zhuǎn)移 [1]。E-cadherin是鈣粘素家族中的一員，介導(dǎo)細(xì)胞間粘附作用重要的細(xì)胞因子，其低表達(dá)和不表達(dá)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[2]。本研究采用免疫組織化學(xué)方法檢測β-catenin蛋白及E-cadherin蛋白在胸腺腫瘤中的表達(dá)，分析其在胸腺腫瘤中的表達(dá)及意義。

1 材料及方法

1.1 材料

收集青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院胸外科2003-2010年間手術(shù)切除的胸腺腫瘤石蠟標(biāo)本87例，其中男性48例，女性39例，年齡20-82歲。按WHO（2004）標(biāo)準(zhǔn)分型[3]：A型9例，AB型16例，B1型17例，B2型17例，B3型12例，C型16例。按臨床Masaoka分型[4]：I型50例，II型 26，III-IV型11例。

1.2 試劑與方法

采用免疫組織化學(xué)pv6000法，鼠抗人β-catenin單克隆抗體、鼠抗人E-cadherin單克隆抗體和6000通用免疫組織化學(xué)試劑盒及DAB染色液均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。根據(jù)免疫組化PV6000法嚴(yán)格操作實(shí)驗(yàn)步驟。磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗作陰性對(duì)照。

1.2.2結(jié)果判定

高倍鏡下觀察細(xì)胞著色情況及著色部位。β-catenin主要定位于細(xì)胞膜，細(xì)胞中及細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒為異常表達(dá)，E-cadherin正常表達(dá)于細(xì)胞膜。隨機(jī)選擇10個(gè)高倍視野（×400），每個(gè)視野隨機(jī)計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞。陽性細(xì)胞數(shù)≥25%為陽性，不表達(dá)或陽性細(xì)胞數(shù)<25%為陰性[5]

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，β-catenin及E-cadherin的表達(dá)與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系采用X2 ，兩者之間的關(guān)系采用相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 β-catenin及E-cadherin在胸腺腫瘤中的表達(dá)

β-catenin陽性表達(dá)產(chǎn)物主要表達(dá)于胸腺瘤的細(xì)胞膜上，少數(shù)表達(dá)于細(xì)胞漿和細(xì)胞核，呈棕黃色顆粒。在胸腺瘤A 型、AB型、B1型、B2型 、B3型 、C型中的表達(dá)分別為33.3%、25%、29.4%、23.5%、33.3%、37.5%，之間的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=1.074，P>0.05）。E-cadherin在胸腺瘤中A 型、AB型、B1型、B2型 、B3型 、C型中的表達(dá)分別44.4%、37.5%、41.2%、47.1%、58.3%、31.25%，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=2.394，P>0.05）。

2.2 β-catenin及E-cadherin的相關(guān)性研究

E-cadherin及β-cadherin的Spearman相關(guān)性分析顯示E-cadherin陽性標(biāo)本37例中β-catenin有19例陽性，E-cadherin陰性標(biāo)本50例中，β-catenin7例陽性，兩者之間正相關(guān)（r=0.403，P<0.05）。

2.3 β-cadherin及E-cadherin與臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系

β-catenin及E-cadherin陽性表達(dá)與患者的年齡、性別及有無合并肌無力無關(guān)（P>0.05），與Masaoka分型和腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)（P<0.05），見表2.4.

3討論。

腫瘤的發(fā)生被證明是多種因素共同作用的結(jié)果，腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是影響患者生命及術(shù)后生存的重要因素。目前Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）是目前腫瘤研究的熱點(diǎn)。多種研究表明在乳腺癌，結(jié)腸癌，胰腺癌等腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中伴有Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路改變和腫瘤細(xì)胞EMT現(xiàn)象。胸腺瘤是生物學(xué)行為十分復(fù)雜的腫瘤，單純從臨床及組織學(xué)檢查難以辨別其良惡性，目前認(rèn)為30-40%的胸腺瘤是具有侵襲性的。

β連接素（β-catenin）是細(xì)胞內(nèi)廣泛存在的包漿蛋白，其基因定位于3q21.3.目前認(rèn)為，β-catenin是一種多功能蛋白，在Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路中發(fā)揮核心作用，參與腫瘤的形成，又能與E-cadherin結(jié)合，參與上皮內(nèi)轉(zhuǎn)化的過程。在正常細(xì)胞中，β-catenin與axin、APC等蛋白形成復(fù)合物，存進(jìn)β-catenin的降解，所以，在正常細(xì)胞中β-catenin的含量極少[6]。當(dāng)Wnt信號(hào)傳導(dǎo)異常，β-catenin降解被抑制，使β-catenin在細(xì)胞中異常積聚，存進(jìn)腫瘤的發(fā)生。β-catenin中含有與E-cadherin蛋白相結(jié)合的區(qū)域，形成E-cadherin/catenin復(fù)合體，該復(fù)合體能E-cadheerin發(fā)揮作用的重要條件，維持細(xì)胞間的粘附，β-catenin在細(xì)胞中的異常表達(dá)，可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞發(fā)生EMT現(xiàn)象 [7]。研究表明，在肝癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌等多種腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中，伴有β-catenin在腫瘤細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中的異常積聚[8]。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，β-catenin在胸腺瘤組織學(xué)分型表達(dá)中無差異，且與胸腺瘤組織Masaoka分期和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)，可以認(rèn)為，β-catenin與胸腺瘤的侵襲及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。

上皮性鈣粘蛋白（E-cadherin）是鈣粘附蛋白超家族的重要一員，其低表達(dá)或不表達(dá)被認(rèn)為EMT過程的標(biāo)志。EMT即上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化是指上皮細(xì)胞失去正常的粘附功能，獲得侵襲及轉(zhuǎn)移能力的過程。多種研究表示，E-cadherin是一種重要的細(xì)胞轉(zhuǎn)移抑制基因[9]，乳腺癌中，E-cadherin的表達(dá)在有轉(zhuǎn)移的腫瘤與無轉(zhuǎn)移的腫瘤中的表達(dá)具有顯著性差異性 [10-11]。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在WHO組織學(xué)分型中，E-cadherin表達(dá)無差異性，與Masaoka分期具有關(guān)，說明E-cadherin與組織學(xué)分型無關(guān)，而與胸腺瘤的侵襲性相關(guān)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)，這與 Yang[12]、Yoshino等[13]研究發(fā)現(xiàn)結(jié)果相似。可以認(rèn)為E-cadherin在胸腺瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移過程中具有重要意義。Spearman相關(guān)性分析顯示在胸腺瘤中，E-cadherin與β-catenin的表達(dá)正相關(guān)（r=，P<0.05），認(rèn)為β-catenin蛋白的表達(dá)異常可以引起E-cadherin的低表達(dá)或不表達(dá)，從而促進(jìn)腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移。

綜上所述，在胸腺瘤的侵襲過程中可能存在Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路的異常及EMT現(xiàn)象，其可能為胸腺瘤的研究提供新的思路。并能為判斷胸腺瘤的侵襲性提供新的思路。

參考文獻(xiàn)

[1] Niehrs C.Function and biological roles of the Dickkopf family of Wnt modulators[J].Oncogene，2006，25（57）：7469-7481

[2] Wheelock MJ ，Johason KR.Cadherin as medlators of cellular phenotype[J].Annu Rev Cell Dev Biol，2003，19：207-235

[3] 孟宇宏，張建中.肺、胸膜、胸腺及心臟腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：168-169

[4] Yamakawa Y，Masaoka A，Hashimoto T，et al.A tentative tumor-node-metasis classification of thymoma[j].Cancer，1991，68：1984-1987.

[5] Gabbert HE，Mueller W，Schneiders A，Meier S，et al.Prognostic value of E-cadherin expression in 413 gastric carcinomas.Int J Cancer 69：184-189，1996

[6] Macheda M，Stacker SA.Importantance of Wnt signaling in the tumor stroma micronment [J].Curr Cancer Drug Target .2008（6）：454

[7] Gilles C，Polette M，Mestdagt，et al.Transactivation of vimention by β-catenin in hunman breast cancer cells[J]. Cancer Res，2003，63（10），2658-2664.

[8] 張宇龍，張杰英，趙晶，等.進(jìn)展期胃癌E-cadgerin及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)癌細(xì)胞中再表達(dá)β-catenin與NF-KB表達(dá)的臨床意義[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，29（5），647-651

[9] Kowalski PJ，Rubin MA，Kleer CG.E-cadherin expression in primary carcinomas of the breast and its distant metases[J].Breast Cancer Res 2003 ：5：R217-22.

[10] Berxq V，Roy F.The E-cadherin/catenin complex：an important gatekeeper in breast cancer tumorigenesis and malignant progression Breast Cancer[J].Res ，2001，3（5）：289-293

[11] Debies MT，Welch DR.Genetic basis of hunman breast cancer metastasis[J].Mammary Gland Biol Ncoplasia，2001，6（4）：441-451

[12] Woo-ick Yang，Kyung-Moo，Yang，Soon-Won Hong ，et al.E-cadherin expression in thymomas[J].Yonsei medical Journal，1998，39（1），37-44

[13] Yoshino I，Kase S，Yano Y，et al.Expression status of E-cadherin and alpha-，beta-，and gamma-catenins in thymoma[J].Ann yhorac surg .2002，73（3）：933-937

Δ通訊作者：

徐林浩，碩士研究生導(dǎo)師