NF—kB、VEGF—C、VEGFR—3在乳腺癌中的表達(dá)及意義

李陽(yáng)等

【摘 要】目的：探討NF-kB、VEGF-C及VEGFR-3在乳腺癌中的表達(dá)及意義。方法：采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)NF-kB、VEGF-C和VEGFR-3在78例乳腺癌中的表達(dá)情況。結(jié)果：在78例乳腺癌中NF-kB陽(yáng)性表達(dá)率61.53%；VEGF-C陽(yáng)性表達(dá)率62.82%；VEGFR-3陽(yáng)性表達(dá)率70.51%。NF-kB、VEGF-C、VEGFR-3三者的表達(dá)均與乳腺癌的組織學(xué)分級(jí)，TNM分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（P<0.05），而與病人的年齡和腫瘤的大小無(wú)關(guān)（P>0.05）。結(jié)論：NF-kB和VEGF-C，VEGF-C和VEGFR-3均正相關(guān)（r值分別為0.264和0.259）。

【關(guān)鍵詞】乳腺癌； NF-kB； VEGF-C； VEGFR-3

【中圖分類號(hào)】R735.3+7 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1004-7484（2014）04-2070-02

乳腺癌是女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在女性常見(jiàn)腫瘤中位于首位[1]。乳腺癌的發(fā)生及發(fā)展嚴(yán)重危害了女性健康。乳腺癌早期特別容易發(fā)生淋巴道的轉(zhuǎn)移，而一旦發(fā)生了淋巴道轉(zhuǎn)移將對(duì)患者的預(yù)后產(chǎn)生不利影響。故本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)NF-kB、VEGF-C和VEGFR-3在乳腺癌中的表達(dá)情況，探討它們?cè)谌橄侔┑陌l(fā)生和惡性進(jìn)展中的作用，以及它們?nèi)咧g的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 材料

收集河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院病理科2012年1月至2013年5月期間手術(shù)切除的蠟塊存檔標(biāo)本78例，其中伴有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者40例。患者均為女性，年齡32-72歲，平均年齡52歲，術(shù)前均未接受任何輔助治療，病理診斷明確。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學(xué)染色

NF-kB、VEGF-C、VEGFR-3均為鼠抗人單克隆抗體，染色方法為免疫組化SP法，按試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，抗原修復(fù)均采用高壓鍋進(jìn)行熱修復(fù)，然后DAB顯色，復(fù)染，脫水，透明，封片。PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

1.2.2 結(jié)果判定

陽(yáng)性率：每張切片選取5個(gè)高倍視野，每個(gè)高倍視野下隨機(jī)計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，NF-kB以胞漿及胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性，見(jiàn)圖1；VEGF-C以胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性，見(jiàn)圖2。結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)[2]：著色細(xì)胞<10%為陰性，≥10%為陽(yáng)性。著色細(xì)胞為10%～25%為（+）；25%～50%為（++）；>50%者為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。

VEGFR-3表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞，見(jiàn)圖3，陽(yáng)性脈管數(shù)判斷標(biāo)準(zhǔn)及記數(shù)方法[3]：低倍鏡下找VEGFR-3陽(yáng)性脈管密集區(qū)， 100倍視野計(jì)數(shù)10個(gè)熱區(qū)中VEGFR-3（ + ）脈管數(shù)， 取平均值。腫瘤區(qū)內(nèi)單個(gè)或成叢的內(nèi)皮細(xì)胞， 不管是否成腔均視為脈管并計(jì)數(shù)。計(jì)算出陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞所占的百分比。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)資料經(jīng)SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，采用χ2檢驗(yàn)，四格表進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，相關(guān)關(guān)系采用Spearman檢驗(yàn)方法，以P<0.05判為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 NF-kB、VEGF-C和VEGFR-3在乳腺癌中的表達(dá)及與臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系

在78例乳腺癌中，NF-kB陽(yáng)性表達(dá)率為61.53%；VEGF-C陽(yáng)性表達(dá)率為62.82%；VEGFR-3陽(yáng)性表達(dá)率為70.51%。NF-kB、VEGF-C和VEGFR-3均與乳腺癌的組織學(xué)分級(jí)，TNM分期以及有無(wú)淋巴及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（P<0.05），；三者的表達(dá)與病人的年齡和腫瘤的大小無(wú)關(guān)（P>0.05），差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

2.2 NF-kB、VEGF-C和VEGFR-3在乳腺癌中表達(dá)的相關(guān)性

在78例乳腺癌中NF-kB與VEGF-C的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.264）；VEGF-C和VEGFR-3的表達(dá)也呈正相關(guān)（r=0.259）。

3 討論

NF-kB是核轉(zhuǎn)錄因子家族的成員之一，該家族成員須相互之間形成同源或異源二聚體才具有生物學(xué)活性。在靜息狀態(tài)下，NF-kB同源或異源二聚體與其抑制物IkB結(jié)合存在于胞質(zhì)中，此時(shí)不具有生物學(xué)活性，當(dāng)受到外源性刺激時(shí)，NF-kB從胞漿移位至胞核中才能發(fā)揮其作用[4]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在乳腺癌中NF-kB蛋白的表達(dá)與其組織學(xué)分級(jí)、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況均明顯相關(guān)，與病人的年齡及腫瘤的大小無(wú)關(guān)。這與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致。

VEGF-C是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子家族的新成員，VEGFR-3是其受體，主要位于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞。VEGF-C可以與VEGFR-3特異性結(jié)合，發(fā)揮調(diào)節(jié)淋巴管生理功能的作用。本實(shí)驗(yàn)研究表明，VEGF-C隨乳腺癌的TNM分期，組織學(xué)分級(jí)的增高而表達(dá)增高；實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)VEGF-C在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率分別為77.50%和47.36%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與VEGF-C關(guān)系密切的VEGFR-3在乳腺癌中的表達(dá)也表現(xiàn)出類似現(xiàn)象。這些結(jié)果提示VEGF-C與VEGFR-3結(jié)合可以促進(jìn)淋巴管的增生，并參與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過(guò)程。

有研究認(rèn)為[5]，在乳腺癌中NF-kB的異常活化可能上調(diào)VEGF-C的表達(dá)，然后VEGF-C與其受體VEGFR-3結(jié)合，促進(jìn)腫瘤周圍淋巴管的新生以及淋巴管的轉(zhuǎn)移。本實(shí)驗(yàn)分析了NF-kB、VEGF-C和VEGFR-3三者之間的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)NF-kB和VEGF-C，VEGF-C和VEGFR-3之間均呈正相關(guān)，進(jìn)一步證實(shí)了它們?nèi)邔?duì)乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展起著重要的調(diào)節(jié)作用。盡管VEGF-C/VEGFR-3系統(tǒng)的作用機(jī)制尚未完全闡明，但這些研究結(jié)果提示，如應(yīng)用相應(yīng)的抑制劑阻斷VEGF-C與VEGFR-3的結(jié)合，則有可能抑制腫瘤的淋巴道轉(zhuǎn)移，從而改善腫瘤患者的預(yù)后。

參考文獻(xiàn)

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[5] Saharinen P， Petrova TV. Molecular regulation of lymphangiogenesis[J]. Annals of the New York Academy of Sciences， 2004， 1014（1）： 76-87.

通訊作者：

張素華（1954-），女，漢族，教授，碩士生導(dǎo)師，e-mail： suhua68zhang@hotmail.com。