流感病毒的變異及其研究現(xiàn)狀

謝懷根

摘要

2013年3月，我國首次出現(xiàn)了人感染H7N9 的禽流感疫情，給我國衛(wèi)生、動物疫病防治與經(jīng)濟健康發(fā)展帶來了嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。基于近年來禽流感等流感病毒造成的嚴(yán)重危害，從流感病毒的病原學(xué)、分類命名、致病性、變異特性、培養(yǎng)特性、臨床診斷、疫苗和藥物防治研究進展等方面進行了綜述，以期為流感病毒的深入研究和防治提供參考。

關(guān)鍵詞流感病毒；病原學(xué)；變異性；臨床診斷；疫苗研究

中圖分類號S852.65+9.6文獻標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2014）28-09790-04

Variation of Influenza Virus and Its Research Status

XIE Huaigen（Nantong Center for Disease Control and Prevention， Nantong， Jiangsu 226007）

AbstractIn March 2013， China's first human infection with the H7N9 avian flu epidemic has brought serious challenges to China's health， animal disease prevention and healthy development of economy. Based on serious harm caused by avian flu， research advances were summarized from 7 aspects of etiology， classification and nomenclature， pathogenicity， variation characteristics， training features， clinical diagnosis， vaccine and drug prevention， so as to provide reference for diagnosis and control of influenza virus.

Key wordsInfluenza virus； Etiology； Variability； Clinical diagnosis； Vaccine research

流行性感冒病毒（Influenza virus）是一種RNA病毒，隸屬正粘病毒科（Orthomyxoviridae），人類和動物感染后引起流行性感冒。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，每年全世界發(fā)生流感病例為6～12億，其中約有300～500萬例為重癥流感患者，有25～50萬例因流感而死亡[1]，并造成數(shù)以萬計的動物死亡及巨額的經(jīng)濟損失。

我國于2013年3月首次發(fā)現(xiàn)人感染H7N9禽流感病例。據(jù)統(tǒng)計，截至2013年12月30日，上海、安徽、江蘇、浙江、北京、河南、山東、江西、湖南、福建、河北、廣東等12省（市）及香港共報告確診病例147例，其中46例為死亡病例。2013年5月，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所陳化蘭研究員和她的科研團隊發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致我國人感染的新型H7N9流感病毒與同一時期存在于活禽市場上的H7N9禽流感病毒高度同源，并首次在國際上從病原學(xué)角度揭示了新型H7N9流感病毒的來源。2013年7月，陳化蘭等研究發(fā)現(xiàn)H7N9病毒對禽類無致病力，但該病毒侵入人體后發(fā)生突變，對哺乳動物的致病力與水平傳播能力明顯增強，從而揭示了H7N9病毒存在較大的大流行風(fēng)險[2-3]。全世界流感疫情的連續(xù)發(fā)生不但造成了人類死亡數(shù)量的不斷攀升，而且給我國衛(wèi)生、動物疫病防治與經(jīng)濟健康發(fā)展帶來了嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。基于近年來禽流感等流感病毒造成的嚴(yán)重危害，筆者從流感病毒的病原學(xué)、分類命名、致病性、變異特性、培養(yǎng)特性、臨床診斷、疫苗和藥物防治研究進展等方面進行了綜述，以期為流感病毒的深入研究和防治提供參考。

1病原學(xué)

流感病毒是分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA病毒，主要分為甲（A）、乙（B）、丙（C）3種類型。根據(jù)表面抗原血凝素（Hemagglutinin，縮寫為HA）和神經(jīng)氨酸酶（Neuraminidase，縮寫為NA） 可對A型流感病毒進一步劃分，HA有16個亞型， NA有9個亞型， HA和NA排列可以組合成多達144個病毒亞型。根據(jù)最新研究報道， Suxiang Tong等從蝙幅體內(nèi)分離并鑒定出1種新型流感病毒，HA和NA與目前存在的亞型差異顯著，被劃分為H17和N10亞型[4]。但是，針對關(guān)于H17和N10的確切分類還存在一定爭議，還需進一步研究證實[5]。B型、C型流感病毒則不再劃分亞型。其中，甲型流感病毒抗原性易發(fā)生變異，病毒粒子呈球形，也可呈絲狀，直徑大約在80～120 nm，有囊膜。2009年，日本科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)甲型H1N1流感病毒呈細(xì)長型，這種病毒更容易附著在人體黏膜組織，變異也更為容易，該型病毒更是曾多次引起世界性流感大流行，造成了巨大的危害。例如，在1918～1919年的流感病毒大流行中，全世界死亡人數(shù)共計有2 000萬～5 000萬[6]。通常流感病毒的易感性受宿主限制，幾乎所有亞型的A型流感病毒都可以感染鳥類，但感染人類的主要是H1、H3亞型，也有感染豬、馬的報道。B型流感病毒基因結(jié)構(gòu)型雖與A型相似，但僅感染人類和海豹。C型流感病毒僅散發(fā)存在，可感染人類和豬[7]。

甲型、乙型、丙型流感病毒分別于1933年、1940年、1949年分離獲得。甲型、乙型、丙型流感病毒不僅在核蛋白和基質(zhì)蛋白的抗原性上存在較大差異，在基因組、致病性及宿主范圍方面也有較大差異。甲型、乙型流感病毒的RNA由8個節(jié)段組成，而丙型流感病毒由7個節(jié)段組成，其中第1、2、3個節(jié)段編碼的是RNA多聚集酶，第4、5、6、7、8個節(jié)段分別編碼血凝素、核蛋白、神經(jīng)氨酸酶、基質(zhì)蛋白、具有拼接RNA功能的非結(jié)構(gòu)蛋白。丙型流感病毒缺少第6個節(jié)段，但其第4節(jié)段編碼的血凝素可以同時具備神經(jīng)氨酸酶的功能。

2致病性

流感病毒的傳染源范圍較廣，包括感染或發(fā)病的人類或畜禽，攜毒的野生鳥類和遷徙性的水禽都可引起該病毒的傳播。流感病毒可以通過直接接觸帶毒者或與其分泌物、排泄物、污染的飼料、水等間接接觸而傳播[8]。通常情況下，由于不同物種自身具有的受體不同，流感病毒很少感染其他物種。但是，有時流感病毒能通過基因突變或重組改變生物學(xué)特性，從而造成跨種傳播。傳播途徑主要有經(jīng)消化道、呼吸道傳播，也可通過氣源性媒介傳播，也存在垂直傳播的可能[9]。

流感病毒一般只引起表面感染，不引起病毒血癥。感染流感病毒主要表現(xiàn)呼吸道癥狀，呼吸道粘膜上皮細(xì)胞為流感病毒侵襲的主要侵襲靶標(biāo)，但也有感染腸粘膜引起胃腸型流感的病例。病毒侵入機體內(nèi)后依靠血凝素吸附于宿主細(xì)胞表面，經(jīng)過吞飲作用方式進入胞漿，進入胞漿之后病毒包膜與細(xì)胞膜融合釋放出包含的ss-RNA，ss-RNA的8個節(jié)段在胞漿內(nèi)編碼RNA多聚酶、血凝素、核蛋白、神經(jīng)氨酸酶、基質(zhì)蛋白、膜蛋白、非結(jié)構(gòu)蛋白等單元構(gòu)件，其中血凝素、神經(jīng)氨酸酶、基質(zhì)蛋白、膜蛋白等編碼蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或高爾基體上組裝M蛋白和包膜，在細(xì)胞核內(nèi)病毒的遺傳物質(zhì)不斷復(fù)制并與核蛋白、RNA多聚酶等組建病毒核心，最終病毒核心與膜上的M蛋白和包膜結(jié)合，經(jīng)過出芽釋放到細(xì)胞之外，復(fù)制周期大約8 h。流感病毒感染將導(dǎo)致宿主細(xì)胞變性、壞死乃至脫落，造成粘膜充血、水腫和分泌物增加，從而產(chǎn)生鼻塞、流涕、咽喉疼痛、干咳以及其他上呼吸道感染癥狀，當(dāng)病毒蔓延至下呼吸道，則可能引起毛細(xì)支氣管炎和間質(zhì)性肺炎。病毒的存活時間因外界的環(huán)境條件不同而有差異，在水中能保持很強的感染持續(xù)能力。例如，在17 ℃的水中病毒的感染性能持續(xù)約100 d左右，而在-50 ℃以下病毒可以長期保存。

3變異特性

大流感和季節(jié)性流感暴發(fā)的基礎(chǔ)是流感病毒的不斷變異。抗原性變異、敏感性變異（溫度、對非特異性抑制物等）和宿主范圍等方面的變異都是流感病毒變異主要方式，但流感變異最主要的是抗原性變異。抗原性變異的顯著特點是表面抗原HA和NA易發(fā)生變異。針對舊毒株的免疫應(yīng)答對新毒株的效果可能會減弱甚至完全無效的原因是流感病毒通過抗原不斷進化以逃避宿主的免疫反應(yīng)。因為中和抗體的靶點是HA，其突變對免疫逃逸最為關(guān)鍵，而其他病毒抗原變異所引起的效應(yīng)則沒有HA顯著，但在一定的免疫選擇壓力下也可能會導(dǎo)致免疫逃逸[10]。

甲型流感病毒表面抗原血凝素（HA）是鑲嵌在病毒脂雙層膜上的1個主要表面糖蛋白，以三聚體形式存在，由約566個氨基酸構(gòu)成。表面抗原血凝素（HA）蛋白在感染初期與宿主細(xì)胞表面的特異性受體相結(jié)合，它是流感病毒能否入侵宿主的關(guān)鍵蛋白之一，同時還介導(dǎo)被胞吞的病毒外膜與宿主細(xì)胞核內(nèi)體膜的融合。另外，表面抗原血凝素（HA）蛋白還可刺激宿主機體產(chǎn)生中和抗體，進而產(chǎn)生免疫應(yīng)答保護作用。因此，流感病毒能逃脫宿主免疫監(jiān)視而導(dǎo)致流感的季節(jié)性流行是表面抗原血凝素（HA）蛋白的高度易變性所造成的。

Munster等將H5高致病性禽流感HA的MBCS插入低致病性的H6N1禽流感病毒中，造成了體外表達的HA前體在沒有胰蛋白酶的條件下也能被裂解以及H6N1病毒對雞的高致病性[11]。但是，Bogs等將高致病性H5N1禽流感病毒的HA多堿性氨基酸序列取代低致病性H5N1禽流感病毒的單個堿性氨基酸裂解位點卻發(fā)現(xiàn)這個改變雖然增加了病毒的感染能力但并不影響病毒對雞的致病性。據(jù)此推測，多堿性氨基酸序列HA裂解位點的獲取只是H5N1禽流感病毒從低致病性到高致病性演變過程中的必要步驟之一，其高致病性還取決于HA 裂解位點以外氨基酸的改變和其他病毒蛋白[12]。

流感病毒的神經(jīng)氨酸酶（Neuraminidase，NA）是鑲嵌在流感病毒脂雙層膜上的另一個糖蛋白，由病毒基因組第6個節(jié)段RNA編碼的470個左右氨基酸構(gòu)成并以四聚體形式存在。NA蛋白依靠氨基酸殘基7～35疏水區(qū)域鑲嵌在脂膜上，氨基酸殘基36～73構(gòu)成了NA蛋白的頸部，而其余的氨基酸殘基形成了NA蛋白的頭部[5]。酶活性中心和抗原決定區(qū)域都位于NA蛋白的頭部頂端，與活性中心相關(guān)的11個氨基酸在9種NA亞型中都是保守的（Arg118、Glu119、ASP151、Arg152、Trp178、Ile222、Arg224、Glu276、Arg292、Arg371和Tyr406）。NA蛋白不需經(jīng)過翻譯后的加工，其主要功能是清除糖蛋白或糖脂鏈上的唾液酸殘基，催化裂解末端唾液酸和半乳糖之間的連接鍵以幫助子代病毒顆粒脫離被感染的宿主細(xì)胞。NA也是流感病毒易發(fā)生變異的兩個主要表面抗原之一[13]。NA基因不同位點的突變與流感病毒的致病性密切相關(guān)，而且NA的活性高低還與病毒感染后繼發(fā)肺炎發(fā)生的頻率及嚴(yán)重程度有關(guān)。能抑制流感病毒NA的抗體或藥物就應(yīng)該能抑制流感病毒的復(fù)制。抗流感新藥達菲（Tamifiu）正是根據(jù)這個原理以及唾液酸結(jié)合于NA活性中心的X-光晶體結(jié)構(gòu)設(shè)計合成出來的。

針對流感病毒的變異性，一些研究者認(rèn)為流感病毒的變異是由于人群中傳播的流感病毒面臨較大的免疫壓力，促使病毒核酸不斷發(fā)生突變。而另一些科學(xué)研究者認(rèn)為，流感病毒的變異是由于人甲型流感病毒和禽流感病毒同時感染豬后發(fā)生基因重組導(dǎo)致病毒的變異。進一步研究表明，1957年流行的亞洲流感病毒基因的8個節(jié)段中有5個節(jié)段來自H1N1人流感病毒，而其余3個是來自鴨流感病毒，該研究發(fā)現(xiàn)證實了基因重組導(dǎo)致病毒變異的可能性。流感病毒的高度變異性極大地增加了對流行性感冒的防治難度，準(zhǔn)確預(yù)測即將流行的病毒亞型變得很困難，因此有針對性地進行疫苗接種變得很難實施。

4培養(yǎng)特性

流感病毒可在雞胚羊膜腔和尿囊腔中增殖。增殖的病毒游離于羊水或尿囊液中，檢測可用紅細(xì)胞凝集試驗法。雖然流感病毒也可在組織培養(yǎng)細(xì)胞（人羊膜、猴腎、狗腎、雞胚等細(xì)胞）中增殖，但不引起明顯的CPE。使用MDCK（狗腎）細(xì)胞分離流感病毒的試驗方法，是常規(guī)流感檢測及病毒研究的關(guān)鍵技術(shù)，由于不同的MDCK細(xì)胞株均有各自的生長特點，流感病毒對其侵襲力及在該細(xì)胞上的繁殖條件均有所差異。

余鈞池等[14]研究發(fā)現(xiàn)流感病毒在MDCK細(xì)胞中最佳培養(yǎng)條件是直接接種流感病毒于病毒生長液，置于35.5 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)96 h。其中，病毒生長液中無胎牛血清、胰酶終濃度為2.5 μg/ml。含有流感病毒的細(xì)胞傳代次數(shù)應(yīng)控制在4代以內(nèi)。收獲流感病毒前，將細(xì)胞反復(fù)凍融1～2次，可提高病毒的HA滴度，收獲的病毒應(yīng)放置于-80 ℃冷凍保存。

流感病毒在小鼠中連續(xù)傳代可提高毒力，作用于小鼠肺部可發(fā)生廣泛的實質(zhì)性病變或死亡。流感病毒不耐熱，抵抗力較弱，在56 ℃條件下作用30 min即可殺滅病毒。在0～4 ℃能存活數(shù)周，因此，冬、春季是流感的常發(fā)季節(jié)。

5實驗室診斷

實驗室診斷的常用方法是分離病毒及血清學(xué)試驗。其中，分離病毒最好從活體采集鼻粘膜拭子樣品，另外發(fā)熱期比退熱后更容易在鼻腔和咽部分泌物中分離出病毒。也可從死亡或急性期剖殺的豬肺組織中分離病毒，培養(yǎng)時將肺組織磨碎，懸浮在鹽水中。將病料接種10齡雞胚，在35 ℃孵化72 h后收集尿囊液，測定其凝集雞紅細(xì)胞的能力。血清學(xué)試驗豬流感血清學(xué)診斷需采雙份血清樣品，1份在急性發(fā)病期采集，另1份在此后的3～4周采集，如果抗體水平升高則為判定為流感病毒陽性，在診斷時用血凝抑制（HI）檢測抗體是最常用的方法。上述2種方法具有準(zhǔn)確、敏感、可重復(fù)操作的優(yōu)點，但耗時較長，不能滿足疾病快速方便檢測的需要。申偉霞等通過比對GenBank網(wǎng)站上H3、H9亞型禽流感病毒HA 基因序列，設(shè)計了分別針對H3 AIV 和H9 AIV 的特異性探針，建立了H3、H9亞型禽流感病毒雙重?zé)晒舛縋CR方法具有較高的臨床應(yīng)用價值。

另外，檢測該病毒和病毒抗原或特異性抗體的方法還有酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、肺組織直接免疫熒光技術(shù)、細(xì)支氣管肺泡沖洗物免疫熒光顯微鏡技術(shù)、鼻腔上皮細(xì)胞間接免疫熒光技術(shù)、固定組織的免疫組化檢測技術(shù)。

6疫苗與藥物的防治研究進展

6.1疫苗研究

目前流感預(yù)防最為常用的措施是流感疫苗接種，目前被廣泛使用的疫苗主要有2種：減毒活疫苗和三價滅活疫苗。每年減毒活疫苗和三價滅活疫苗都被用于預(yù)防預(yù)期發(fā)生的優(yōu)勢流感病毒株，疫苗的接種可以有效減少接種者感染流感的機會或者減輕流感癥狀，這2種疫苗都含有選定的H1N1、H3N2和B型這3種滅活或者致弱的流感病毒[15-17]。減毒疫苗含有已致弱的病毒，噴鼻接種是其主要的接種方式[18]。減毒疫苗是用一種冷適應(yīng)的病毒骨架和當(dāng)年選定疫苗毒株的HA、NA重組制成的疫苗，重組的毒株對溫度比較敏感，可在鼻咽中有效復(fù)制，但在呼吸道和肺中等稍高溫度處受限，該機制不但可以有效誘導(dǎo)免疫保護，而且不會對機體造成傷害。臨床研究表明，匹配的減毒活疫苗可達到80%以上的保護率[19]。

三價滅活疫苗的生產(chǎn)通過雞胚培養(yǎng)，但由于流感病毒在雞胚中傳代得率不高，所以通過反向遺傳學(xué)系統(tǒng)將所選毒株的HA和NA與在雞胚中高產(chǎn)的PR/8/34毒株重組可明顯提高得率，加速疫苗生產(chǎn)過程[20-21]。另外，通過利用細(xì)胞培養(yǎng)法生產(chǎn)疫苗方便了對野生病毒的操作，避免了病毒在適應(yīng)雞胚過程中易產(chǎn)生HA突變的問題，加快了對突發(fā)大流感疫苗的制備速度，且在密閉系統(tǒng)中發(fā)酵的過程更容易控制[15]。在改善全病毒滅活疫苗的措施中佐劑的有效添加也可起到良好的輔助作用，目前包括憐脂質(zhì)和水包油乳劑等佐劑的季節(jié)性流感疫苗已經(jīng)在歐洲批準(zhǔn)上市[22-23]。減毒疫苗與三價滅活疫苗相比免疫力更強，持續(xù)時間也更久，但具有潛在的回復(fù)毒力而致病的風(fēng)險，對免疫系統(tǒng)較弱的群體不推薦使用[19]。

據(jù)報道，現(xiàn)已進入臨床試驗階段的疫苗種類還包括DNA疫苗（DNA-based vaccines）、通用疫苗（Universal vaccines）、重組蛋白疫苗（Recombinant proteins）、病毒樣顆粒（Viruslike particles）、病毒載體（Viral vectors）。這些疫苗在動物試驗中產(chǎn)生了良好的免疫效果，一些已經(jīng)應(yīng)用到臨床中[24-26]。

流感病毒流行毒株變異頻率高，當(dāng)年應(yīng)用的疫苗需要根據(jù)上一個流行季節(jié)的優(yōu)勢毒株作出調(diào)整、更換每年生產(chǎn)的疫苗，但傳統(tǒng)減毒活疫苗和三價滅活疫苗的大規(guī)模研發(fā)和生產(chǎn)制造周期至少需要6個月時間，因此疫苗研發(fā)存在一定的滯后性。特別是在大流感急速暴發(fā)時，其滯后性缺陷更加顯現(xiàn)， 因此，迫切需要研制出新型疫苗以便為流感病毒的預(yù)防提供有力的保障，希望不久的將來可以有更多的新型疫苗研制成功并得到廣泛應(yīng)用。

安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)2014年

6.2抗病毒藥物的研究

6.2.1

化學(xué)藥物抗流感病毒的研究。

疫苗的研發(fā)和制備相對滯后，并且現(xiàn)有的疫苗只能用于流感的預(yù)防，沒有治療效果，因此抗流感病毒化學(xué)合成藥物的研制成為科學(xué)研究的重難點。Mark von Itzstein等在1989年設(shè)計并合成了4-guanidino-4-deoxy-Neu5Ac2en（稱為Zanamivir），它與神經(jīng)氨酸酶（NA）的親和力是疫苗接種的104倍，并且能夠競爭性抑制所有A型和B型流感病毒。 Zanamivir抗流感病毒的機制是僅選擇性地抑制流感病毒的神經(jīng)氨酸酶（NA），而其高度選擇性的抑制可有效避免潛在的副作用的發(fā)生，如對機體內(nèi)正常神經(jīng)氨酸酶（NA）功能的抑制[27]。1999年，作為第一個流感病毒神經(jīng)氨酸酶抑制劑（NA）被美國食品藥物監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)上市銷售，主要用于A型和B型流感病毒的治療。

在臨床治療過程中發(fā)現(xiàn)，Zanamivir是一個兩性分子，極性大，雖然在體內(nèi)的代謝很快，但其口服生物利用度卻很低，僅達到2%～3%，通過吸入器吸入方式給藥雖然可以提高利用度，但是具有呼吸系統(tǒng)疾病或者老幼患者使用十分不便。另一方面，雖然針對Zanamivir的耐藥毒株較少，但是其給藥方式的缺陷極大限制了其大規(guī)模使用。

1997年，Kim等通過對Zanamivir分子的改造，合成可以口服的藥物Oseltamivir，其口服生物利用度可以達到80%，極大改善了Zanamivir口服利用度不高的問題。體外活性試驗表明，Oseltamivir對A型、B型流感病毒神經(jīng)氨酸酶（NA）的半數(shù)抑制濃度都能達到納摩爾級水平。1999年9月，Oseltamivir phosphate 以商品名 Tamiflu （中文名為達菲）在瑞士上市銷售，主要用于治療A型和B型流感。片劑的達菲是第一個口服活性高的流感病毒神經(jīng)氨酸酶（NA）抑制劑。

雖然FDA批準(zhǔn)上市的Oseltaniivir和Zanamivir 2種流感病毒神經(jīng)氨酸酶抑制劑， 隨著大流感的廣泛傳播和每年季節(jié)性流感的暴發(fā)發(fā)揮了重要社會價值，但隨著給藥的增多，也出現(xiàn)了越來越多的耐藥毒株。耐藥毒株表現(xiàn)主要是神經(jīng)氨酸酶（NA）的酶活位點與抑制劑的親和力降低，常見耐藥突變有2種類型：1種是NA骨架位點氨基酸突變，如E119V、H274Y、N294S 和 D198N[28]；另1種是NA和唾液酸直接結(jié)合的位點氨基酸突變，如R292K和R152K。

在2009年發(fā)生的甲型H1N1大流感期間由 BioCryst Pharmaceuticals 公司開發(fā)用于治療流感的新型藥物Peramivir被批準(zhǔn)用于對特定病例的緊急治療。 Peramivir是目前唯一通過注射給藥的抗流感病毒NA藥物[29]。另外，新型抗流感病毒神經(jīng)氨酸酶（NA）藥物L(fēng)aninamivir于2010年在日本被批準(zhǔn)上市銷售，可以用于治療A型和B型流感。

張國防等[30]通過表達純化獲得了流感病毒H5N1的PAN 蛋白，通過高通量藥物篩選體系，從372 種化合物中篩選出3 種對PAN 蛋白有抑制作用的化合物，其IC50值分別是56、35.5和83.3 μmol/L。

另外，科研人員對MS-257的設(shè)計以及針對NA流感病毒神經(jīng)費酸酶150-洞的抑制劑設(shè)計，都已取得了突破，相信通過科研人員的不懈努力，肯定能為流感病毒的治療提供新的治療藥物。

6.2.2

中藥制劑抗流感病毒的研究。

中藥為天然藥物，含有生物堿、黃酮、多糖等多種有效生物活性物質(zhì)。針對一些單味中草藥抑制或殺滅病毒的作用研究發(fā)現(xiàn)，單味中草藥可以在病毒繁殖的吸附、穿入、復(fù)制、成熟過程中的某一單元發(fā)揮阻斷作用，進而達到病毒殺滅的目的。目前針對中草藥在抗流感病毒作用機理研究方面，其成分闡明清楚的有2類：一類是多酚類物質(zhì)，它們可以抑制流感病毒蛋白質(zhì)和RNA合成，同時也可抑制流感病毒的吸附作用；另一類是黃酮類物質(zhì)，它們可以抑制流感病毒唾液酸酶的活性和膜融合作用。主要的代表藥物包括大青葉、黃連、黃芩、魚腥草、板藍(lán)根、連翹、金銀花等。另外，研究表明許多中藥不但能夠直接抑制病毒的繁殖，而且能在間接抑制病毒繁殖的過程中發(fā)揮作用[31]。越來越多的中藥方劑在防治流感方面顯示出很好的治療效果。但是針對某個有效的、能夠廣泛應(yīng)用于臨床的理想方劑作用機理方面的研究還處于空白，其主要原因可能有以下方面：一方面是缺乏中藥的基礎(chǔ)研究，另一方面是針對如何認(rèn)識、解決中藥治療疾病與西藥評價體系一致性的問題還存在爭論。中藥是否需要與西藥用相同的評價體系，如何建立完善中藥有效成分方劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等都是迫切需要考慮和解決的問題。

流感病毒的抗原變異仍然是目前研究較多的重要課題。目前， 應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)對此研究提供了良好手段， 對流感病毒抗原變異的機理也有了一定的了解，但這還很不夠，還有許多問題有待深入研究。

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