主要經濟林樹木鮮葉清除自由基活性比較研究

包錦芳

摘要該研究用二苯基苦基肼自由基試驗法對牯牛降30種主要經濟林樹木鮮葉提取物的清除DPPH·活性進行了研究，發現供試的樹木鮮葉提取物都有一定的清除自由基活性，其中板栗和楊梅等葉子的甲醇提取物清除自由基能力較強，它們對DPPH·的半數清除濃度分別為0.36和0.39 mg/ml。研究還發現不同植物樣品的自由基清除能力與樣品的濃度都呈明顯的正相關，樣品濃度越高其自由基清除率越高；不同類經濟林樹種鮮葉的自由基清除能力沒有明顯的規律，其中木本干果類、木本水果類、木本油料類、木本香料類等都分別有些高活性和低活性的樹種。比較甲醇和乙酸乙酯提取物的清除自由基活性可知，板栗葉中主要活性成分為極性較大的物質，結合相關報道可初步推斷可能以鞣質為主；楊梅葉中同時存在極性較大和較小物質，可能以黃酮類物質為主，但具體化合物組成尚需進一步研究。

關鍵詞經濟林；清除自由基；1，1二苯基2苦基肼自由基

中圖分類號S759.3文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）21-07067-03

Radical Scavenging Activity Comparison of Extracts from Leaves of Economic Trees—A Case Study of Guniujiang Nature Reserve

BAO Jinfang（Management Committee of Scenic Spots for Guniujiang， Shitai， Anhui 245113）

Abstract A DPPH· assay was employed to test radical scavenging activity of extracts from leaves of economic trees in Guniujiang. The results showed that all extrats tested had radical scavenging activity， and extracts from Castanea mollissima and Myrica rubra had strong free radical scavenging activity. Their IC50 against DPPH radicals were 0.36 and 0.39 mg/ml. Tests showed that the free radical scavenging activities of different plants extracts were different and had positive relationship with their concentration. The scavenging activity differences between the tested economic trees exhibited no obvious rule. Comparison of methanol and ethylacetate extracts from Castanea mollissima revealed that its active constituent was polar compounds which could be deduced as tannins. The active constituents of Myrica rubra were flavones. The specific compounds still need futher research.

Key words Economic tree； Scavenging free radical； 1，1Diphenyl2picrylhydrazyl （DPPH·）

自由基是指含未配對電子的基團、原子或分子。自由基清除劑是指能與自由基反應并使之還原成非自由基化合物的物質。自由基清除劑常常也是抗氧化劑，由于自由基清除劑具有廣泛的生理活性，因而其有關研究受到世界各國的重視[1-12]。目前在發達國家，自由基清除劑篩選模型已成為藥物開發的常規篩選模型之一。篩選對象已從歐美常見藥用植物轉移到亞非傳統藥用植物；由陸生生物轉向海洋生物；由常見生物轉向稀有生物。目前已發現了大量的自由基清除劑，有些已開發成藥品、保健品和化妝品等。已發現的天然自由基清除劑主要包括酶和非酶兩大類，酶類如超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）等；非酶類如還原性谷胱甘肽、血漿銅藍蛋白、鐵傳遞蛋白等；其他類如尿酸、膽紅素、輔酶Q-10、硒等；外源性小分子化合物類如抗壞血酸、生育酚、胡蘿卜素、多酚類化合物、黃酮及類黃酮、甙類、生物堿及含氮雜環類、苯丙素類、萜類等[13-27]。其中大部分小分子自由基清除劑都是用DPPH·等法篩選出來。另外還有大量有關蔬菜、藥材等粗提物對DPPH有機自由基清除活性的一般比較研究。由于小分子化合物的產生常常涉及到多步生化反應，涉及多個酶系，它們一般受多基因控制，目前還難以用分子生物學的手段進行構建和生產，因此從天然植物中篩選仍必不可少。

該研究以經濟林樹種為研究對象，分析樹木鮮葉提取物的清除DPPH自由基活性，以期為經濟林樹種的選擇及應用提供一定的參考資料。

1材料與方法

1.1供試材料

1.1.1植物樣品。供試樣品為2012年6月采自安徽石臺牯牛降30種主要經濟林樹木鮮葉。樣品為成熟的新葉。

1.1.2化學藥品。1，1二苯基2苦基肼自由基（DPPH·）從Sigma公司購買；水為膜過濾純凈水；溶劑甲醇為國產分析純。

1.1.3主要儀器。Spectra Max M2全波長掃描酶標儀（美國Molecular Device公司）；KH5200數控超聲波清洗器（昆山禾創超聲儀器公司）；AE200梅特勒電子天平（上海分析儀器廠）。

1.2試驗方法

（3）不同樹種的自由基清除能力相差很大，但不同類經濟林樹種鮮葉的自由基清除能力沒有明顯的規律，其中木本干果類、木本水果類、木本油料類、木本香料類等都分別有些高活性和低活性的樹種。

（4）比較甲醇和乙酸乙酯提取物的清除自由基活性可知，板栗葉中主要活性成分為極性較大的物質，結合相關報道可初步推斷可能以鞣質為主；楊梅葉中同時存在極性較大和較小的物質，可能以黃酮類物質為主，但具體化合物組成尚需進一步研究。

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