廣東特色柑橘品種貢柑的研究進展

郭雁君 吉前華 蔣惠 郭麗英 周希琴 胡亞平

摘要 “貢柑”是我國特定歷史文化條件下產生的我國特有的一個柑橘地方農家優良品種，并在近年來成功產業化發展的一個寬皮柑橘的新產品。綜述了我國貢柑有關遺傳和資源、栽培和病蟲害、采后生理和商品化處理等方面的研究進展。

關鍵詞 廣東；貢柑；地方品種；研究進展

中圖分類號 S666.1 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2014）16-04993-03

貢柑是我國特定歷史文化條件下產生的我國特有的一個柑橘地方農家優良品種。在歷史上，因為其品質特別優良，被封建王朝列為貢品，并在民間發展成為著名土特產。近年來，廣東省利用貢柑地方品種進行產業化開發，取得巨大的商業性成功。廣東省肇慶市德慶縣貢柑被譽為“中華柑王”稱號，德慶縣也獲得“中國貢柑之鄉”稱號，并獲得國家的“原產地域產品認證”，廣東省肇慶市四會貢柑也獲批“原產地注冊證明商標”。貢柑的科學和技術研究也逐漸豐富，取得了很好的進展。

1 遺傳與資源研究

貢柑果形靚麗，果色金黃，皮薄核少，肉脆化渣，高糖低酸，集橙類外形美和橘肉質細嫩、易剝皮的雙重優點。據清光緒《四會縣志》記載貢柑原產四會，乃橙和橘的自然雜交種，但其親本已無從考究。貢柑作為一個地方農家品種，沒有經過現代育種上嚴格的選育種程序，經歷長久的栽培歷史，貢柑在不同的栽培群體之間發生遺傳的分化，表現較大的遺傳多樣性。柳建良等通過調查貢柑后代種質資源的性狀表現，采用大樣本進行多重分析，對德慶貢柑資源群系主要數量性狀的遺傳變異性進行了研究，結果表明，主要數量性狀表現較大差異的遺傳變異性，其中葉寬、樹幅、果實縱經、果形指數、單果重、可食率遺傳變異系數較高，而種子數、TSS和酸含量的遺傳變異系數較低[1-2]。有高糖高酸皮厚和高糖低酸皮薄的類型。吉前華等利用隨機擴增多態性DNA技術（RAPD）研究了貢柑和部分柑橘屬植物之間的親緣關系，在遺傳系數0.7上先與興津溫州蜜柑聚為一類，之后共同與四會的一些地方柑橘品種共聚為一大類；明確了貢柑是屬于寬皮柑橘區（Sinocitrus Tseng）的柑亞區（Macroacrumen ）的沙柑種（C.nobilis）中的一種，即C.nobilis Lour.Gonggan，同處于這一種內的還有蕉柑（C.nobilis Jiaogan）和溫州蜜柑（C.nobilis Wenzhoumigan）[3]。

吉前華等評價不同產地和不同果園貢柑果實的商品特性，指出貢柑果實的外觀品質在自然群體中出現了廣泛的變異，其中果形指數和單果重變異大；發現了無核到多核的不同貢柑植株，開發了“合成—合理滿意度（Synthetic reasonablenss and satisfaction index，簡稱SRSI）來定量地評價貢柑的綜合品質，并作為貢柑品質育種的一個重要參考指標[4]。同工酶是基因分子水平的表現型，同工酶譜的變化可以揭示基因位點和等位基因的多樣化，而單基因控制的過氧化物酶是最常用的同工酶。吉前華等還研究了貢柑葉片和種子過氧化物酶（POD）和過氧化氫酶（CAT）譜，發現貢柑POD同工酶譜多態性水平較高，酶譜比較豐富，貢柑自然群體存在POD譜型、譜帶數和譜帶強弱的差異，顯示出遺傳多樣性，發現的無核貢柑單株的無核性狀與總酶譜帶數沒有顯著的相關性，但Rf值為0.250和0.374的酶帶的有無與種子數存在相關關系[5]。

郭雁君等建立的貢柑的SSR（Simple sequence repeats）標記技術能有效地區分柑橘屬、種、品種、品系乃至用于芽變品種的鑒別中。聚類分析結果表明，肇慶地方柑橘品種親緣關系較近，結合其歷史背景研究，應該是通過自然雜交導致部分遺傳物質的交流，或者通過芽變導致形成遺傳背景相似的不同品種（系）[6]。葉綠體基因組為母性遺傳，在雜種起源的生物型來源的研究中是非常行之有效的，貢柑及相關柑橘品種（系）的葉綠體trnL基因的變異研究[7]為柑橘屬的親緣關系分析和貢柑的起源提供了分子依據，確定貢柑可能是以行柑為母體的雜交種。貢柑的SCoT標記技術[8]也給出了貢柑是沙柑種的分子證據，同時證明地理因素對柑橘的親緣關系研究有很大的影響，特別是一些地方品種。貢柑與行柑的親緣關系也在貢柑與行柑的SCoT特征條帶的序列分析中得到進一步的證實。

在貢柑新品種培育方面，由馬培恰等通過芽變選種育出1個無核貢柑品系，平均單果種子數3粒以下，果形圓形，與有核貢柑相比，其成熟胚囊結構完整，但花粉育性較低，授粉后21 d胚體敗育，35 d胚乳退化，胚胎敗育是導致無核貢柑無核的主要原因，但自交親和性等方面有待進一步的研究[9-10]。吉前華等也通過芽變途徑選育到1個無核的貢柑株系，經過3年的高接觀察，無核性狀穩定，果形扁圓，皮較有核貢柑品種更薄；通過RAPD、SSR等分子標記技術證實，與有核貢柑之間存在序列差異，屬遺傳變異，而非環境變異[11]。從果形等方面比對，應該與馬培恰等[9]培育的無核品種不同，有待于進一步比對研究。鄒韻霞等在附加1～4 mg/L GA3和40 mmol/L KNO3、30 mmol/L NH4Cl（或30 mmol/L NH4NO3）的MT培養基上誘導貢柑珠心胚子葉產生胚性愈傷組織，并產生正常的體胚，在含1 mg/L GA3、0.5 mg/L NAA、0.25 mg/L IBA和3%蔗糖的固體培養基上，雙子葉體胚的成苗率達60%以上[12]；同時用14 d苗齡的江西紅橘實生苗為砧木、珠心苗為接穗進行微嫁接試驗，嫁接苗成活率達95%以上[13]；利用獲得的胚性愈傷組織，用0.3%纖維素酶和0.4%果膠酶處理14 h，得到具有90.5%活性的原生質體，在含0.45 mg/L蔗糖、0.15 mg/L葡萄糖的MT培養基上，4 d后觀察到第一次細胞分裂，40 d后形成0.5～1.0 mm大小的細胞團，原生質體培養形成的細胞團，仍需有GA3的作用才能促進原胚的形成，發育成正常的體胚，并具有胚性愈傷組織分化為體胚所具有的特征[14]。用貢柑的體胚包裹海藻酸鈉制備人工種子，并做萌發試驗，試驗表明，3%海藻酸鈉用于貢柑體胚人工種皮，其包裹厚度合適，對體胚無不良影響，存活率和萌發率與不經包裹的相似；在海藻酸鈉中混入MT成分，這樣制得的人工種子在濕潤的濾紙上亦有32%能進行萌發[15]。這些研究為貢柑的提純復壯、抗性育種和應用貯存奠定了基礎。

2 栽培技術研究

貢柑原產地四會，位于廣東省中部偏西，屬珠江三角洲范圍，北回歸線橫穿該地，年均氣溫20～23 ℃，平均無霜期360 d，平均降水量1 450～1 800 mm，年平均相對濕度83%，土壤多為山地黃壤和赤紅壤。溫度是貢柑栽培的限制因素，關系到植株能否生存以及產量和品質。貢柑生長的最適宜溫度尚未測定，但從它原產地的地理范圍看，生長最適宜溫度較高，在年平均氣溫20～23 ℃、冬季氣溫極少為-2～-1 ℃以下的地區，最能發揮其豐產優質性。高溫地區，果實的糖酸比高，味較甜，汁液較多，果肉柔軟，果皮較薄；低溫地區則反之[11]。貢柑原產于雨量充沛的夏濕區，周年需水量較大，一般年降水量在1 500 mm左右為適宜，而果實發育后期為10～12月，屬降雨量較少的干旱季節，需要及時補充水分，與廣東省另一主栽品種砂糖橘相比，貢柑果實品質對10～12月的降雨量更加敏感[16]。

在砧穗組合方面，紅檸檬、酸橘、江西紅橘和小葉大花枳均表現與貢柑的親和力強，不同品種間無明顯差異，各砧木貢柑嫁接苗均能較早形成樹冠，枳砧貢柑植株長勢緩慢，樹冠矮化，枳砧和紅檸檬砧貢柑早結豐產性好，盛果期各砧木間產量差異不大；品質方面，枳、酸橘和江西紅橘砧貢柑的果實可溶性固形物、總糖、總酸含量較高，品質較好[17]。以江西紅橘為基砧，以暗柳甜橙，紅江橙、蕉柑、椪柑為中間砧的貢柑，接穗與中間砧之間的親和性無明顯差異，均表現較強的親和力，嫁接6年后產量與對照差異不大；除椪柑外，其他中間砧能明顯提高貢柑果實的品質，主要表現在可溶性固形物、總糖和總酸含量方面，為貢柑的高接換種提供了依據[18]。與沙糖橘相比，貢柑的光合性能高[19]。

礦質營養生理研究是提高柑橘產量和品質的理論基礎，礦質營養影響果實形成和葉片發育生理，并直接地影響果樹的生產力和品質。由于立地條件和栽培措施的不同，采自不同園區的貢柑葉片的各種礦質元素含量顯示較大的差異，變異系數在0.204～0.489[20]；與品質的相關分析結果，貢柑葉片氮含量與果實可溶性固形物含量呈顯著正相關，葉片鎂的含量對品質影響較大，極顯著影響果實的風味和果汁含量等，顯著影響貢柑品質的合成—合理滿意度指標，顯示鎂含量對提高貢柑品質有正向作用[20]。新建園貢柑葉片礦質元素含量在不同梢次分布不均衡，主要表現為當年生春梢老葉中磷、鉀、鈣、鐵、錳、銅、鋅含量普遍高于當年生秋梢新葉中的，而氮、鎂、硼含量則是當年生秋梢新葉中的大于當年生春梢老葉中的。土壤與葉片中礦質元素含量存在一定的相關性，且表現出礦質元素在樹體內的運輸特征。指導貢柑的高產優質栽培，則應充分考慮新建果園的土壤養分整體狀況，在建立營養診斷和配方施肥措施中，要求土壤和葉片診斷相結合，充分考慮貢柑果樹不同礦質元素在樹體中運輸、分配和再分配的規律，真實地反映樹體營養狀況，達到科學指導合理施肥和平衡施肥的效果[21]。

貢柑容易成花，但若營養跟不上，則會導致花芽分化不良，不完全花比例大，常會在現蕾和開花過程中大量脫落。貢柑果實出現二次生理落果，第一次謝花后，脫落的是授粉受精不良的果，特點是帶果柄脫落，第二次生理落果是貢柑的保果重點。目前生產上常用的措施有肥水調控、疏梢控梢、藥物保果等。噴施GA3和保果素，結合第二次生理落果前的環割措施能有效地提高貢柑的坐果率，期間葉片中氮、鉀營養提高，說明保果措施加強了樹體的代謝活動，而這種保果措施沒有對貢柑果實品質造成實質性的影響[22]。8～9月期間，向貢柑樹體噴施2次0.2% KH2PO4+0.1%H3BO3，可促進向陽果實11月上旬成熟上市；采后立即噴施DA6，結合肥水管理，可顯著減輕遲采收果實的冷害，使其在1月份上市，形成果實錯峰成熟和采收[23]。使用GA3 5～10 mg/L加2，4D 10 mg/L和保鮮藥物處理，結合簡易避雨措施，也可以達到貢柑果實留樹保鮮、延期采收的效果[24]。

3 病蟲害及防控技術研究

貢柑是炭疽病易感品種，曾在廣東省德慶縣大爆發，對生產造成極大的影響[25]。經鑒定，德慶貢柑炭疽病的病原為柑橘炭疽病菌（Colletotrichnm gloeosporioides Penz），屬半知菌類真菌。葉片發病有急性和慢性之分。高溫及連續陰雨，易發急性型，從發病到葉片脫落僅需3～5 d。王震等通過對分離獲得的炭疽病單孢菌株的核糖體DNA（rDNA）內轉錄間區（ITS）序列分析、ITS區特異性引物PCR檢測和系統發育比較等方面的研究，指出炭疽病菌株為盤長孢狀刺盤孢（Colletotrichum gloeosporioides），而非尖刺盤孢（C.acutaum）[26]。彭埃天等比較不同殺菌劑對貢柑炭疽病菌生物活性的影響，篩選到10種新殺菌劑[250 g/L施保克乳油，50%施保功可濕性粉劑，250 g/L勢克乳油，250 g/L凱潤乳油，250 g/L必撲爾乳油，300 g/L愛苗乳油，10%世高水分散粒劑、62%霜炭清（B）可濕性粉劑，75 g/L歐寶乳油和250 g/L富力庫水乳劑]均對貢柑炭疽病菌表現出優異的抑制作用，并且通過田間試驗，制定出一套貢柑炭疽病的防控措施[25，27]。

陽廷密等通過人工噴霧接種自田間經人工分離純化的黑腐病菌孢子懸浮液，初步鑒定出貢柑較其他廣西栽種的柑橘品種高感黑腐病，不同的農藥對貢柑黑腐病菌絲生長和孢子萌發均有一定的活性[28-29]。田間試驗表明，耐雨水沖刷的殺菌劑和劑型防效較好。而對田間貢柑黑腐病病原的分離、純化和rDNA-ITS序列分析結果表明，該病病原菌為柑橘鏈格孢菌（Alternaria citri Ellis et Everhart），并指出該病的發生規律與報道的“貢柑急性炭疽病”相似[30-31]。許多農作物的病蟲害防治都有效地利用了抗病品種，而短期內培育貢柑的抗病品種非常困難，因此貢柑的病蟲害防治研究，仍將是今后貢柑研究的一個重要方向。

4 采后生理及商品化處理研究

貢柑作為一種優質的鮮食水果，注意適時采收和果實的貯藏加工技術對其商品化生產有重要意義。不同采收時期，貢柑的果肉色澤與果皮色澤變化一致，呈極顯著正相關；隨果實成熟度增加，可溶性固形物、糖分等營養成分的含量持續升高，而總酸含量減少[32]。不同采收期的果實可溶性糖紅外光譜表現差異，采收遲的果實呈現果糖的紅外光譜特征，成熟度高的果實水分活性高[33]。采后6～12 d，果實可溶性固形物、可滴定酸含量和酸性轉化酶活性增加，果實的風味品質同期呈現變淡和出現異味等非正向變化，蔗糖等可溶性糖含量變化呈現“S”型變化模式。2，4D處理后可顯著增加好蒂率和好果率，阻止果實異味的產生，但不能改變果實風味品質變淡和延緩可溶性糖含量下降的趨勢[34]；經0 ℃、相對濕度90%冷激處理3 d后，再進行常溫貯藏，效果比常溫貯藏好，且不會出現冷害[35]；采收前，對樹上果實噴施腐植酸鈣，對采后常溫貯藏條件的果實品質和貯藏性能有促進作用，顯著增加好果率和好蒂率，各營養成分的變化波幅小，有利于果實品質的保持[36]。采收前對貢柑樹冠噴施20 mg/L GA3+0.5%CaCl2的保鮮效果好，能顯著降低貯藏期果實的腐爛率，果皮細胞膜透性及膜脂過氧化作用產生的丙二醛的積累，延緩果實蔗糖、有機酸及維生素C的降解，Ca2+有促進GA3的保鮮作用[37]。在貢柑成熟期間，有乙烯釋放高峰出現，活性炭處理可推遲采后乙烯釋放高峰，且峰高也很低，果實內含物變化平穩，特別是可滴定酸含量保持較好，使貢柑較長時間保持原有新鮮度和口感，好果率也明顯提高[38]。

貢柑以鮮食為主，采摘后加工以增加商品價值的研究及市場開發，仍屬拓展階段。劉功良等探討了果膠酶解法制備貢柑果汁的最佳酶解反應條件組合：酶添加量0.06%，酶解時間2.5 h，酶解溫度45e，酶解pH 4.0，最高出汁率可達70%[39]。李妍等應用保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌制得一種貢柑果汁：胡蘿卜果汁（7∶3）+脫脂乳量30%+葡萄糖量2%的混合發酵飲料，并探討了適宜的發酵條件[40]。劉功良等將貢柑的果汁經0.6%β環糊精處理，接種0.06%酵母，添加90 mg/L二氧化硫，在初始pH 4.5、發酵溫度為33 ℃、發酵周期為7 d的條件下，得到淺黃色貢柑果酒[41]。張天義等對貢柑蒸餾酒中揮發性成分進行研究，共鑒定出47種物質，初步確認十三醇、順-9-十六烯醇、順-9-十八烯醇、乙酸-4-萜烯醇酯、乙-甲氧基-1.3-二氧戊環是貢柑蒸餾酒的特有風味物質[42]。

參考文獻

[1] 柳建良.德慶貢柑資源群系主要數量性狀遺傳變異性研究[J].安徽農業科學，2007（20）：6096-6097，6099.

[2] 柳建良，張晚風，姚金明，等.德慶貢柑的植物學性狀與品質評價[J].廣東農業科學，2007（2）：35-36.

[3] 吉前華，曾繼吾，郭雁君.柑橘地方優良品種‘貢柑起源的初步研究[J].中國農學通報，2011（19）：222-227.

[4] 吉前華，郭雁君，梁廣堅，等.德慶不同產地貢柑果實品質差異的初步分析[J].中國南方果樹，2007（4）：1-5.

[5] 吉前華，郭雁君，梁廣堅，等.德慶貢柑果實品質相關的同工酶分析[J].四川農業大學學報，2007（4）：425-429.

[6] 郭雁君，曾繼吾，胡亞平，等.基于SSR標記的肇慶地區柑橘品種分類地位研究[J].中國農學通報，2014，30（4）：137-143.

[7] GUO Y J，JI Q H，ZHOU X Q，et al.Genetic background research of Citrus nobilis Lour.‘Gonggan based on the chloroplast trnL gene[J].Genetics and Molecular Research，2013，12（3）：3079-3087.

[8] GUO Y J，JI Q H，HU Y P，et al.Identify the local Citrus breeds with SCoT technique combining with clone sequencing[J].Genetics and Molecular Research（印刷中）.

[9] 馬培恰，吳文，唐小浪，等.無子少子貢柑新株系選育初報[J].廣東農業科學，2009（12）：70-71.

[10] 王平，唐小浪，吳文，等.‘無核貢柑的無核機理[J].熱帶作物學報，2009（7）：965-969.

[11] 吉前華，郭雁君.中國貢柑[M].北京：科學出版社，2011.

[12] 鄒韻霞，許麗萍，李寶健.貢柑體胚發生和成苗的研究[J].中山大學學報論叢，1989（4）：110-117.

[13] 郭惠珊，鄒韻霞，許麗萍.貢柑珠心胚培養與微型嫁接研究[J].中山大學學報論叢，1989（4）：118-122.

[14] 鄒韻霞，李寶健.貢柑原生質體再生植株的研究[J].中山大學學報論叢，1989（4）：106-109.

[15] 黃學林，傅家瑞，孫景欣.海藻酸鈉作為苜蓿種胚和貢柑體胚包裹膠囊的特性[J].中山大學學報論叢，1989（4）：99-105.

[16] 吳文，馬培恰，唐小浪，等.降雨量和環境水分影響貢柑果實品質的研究[J].中國南方果樹，2009（6）：32-34.

[17] 吳文，馬培恰，李健強，等.貢柑砧木比較試驗研究[J].廣東農業科學，2008（11）：29-31.

[18] 吳文，馬培恰，唐小浪，等.不同中間砧對貢柑生長及果實品質的影響研究[J].廣東農業科學，2007（11）：37-39.

[19] 黃永敬，唐小浪，馬培恰，等.幾個柑橘品種葉片光合特性比較研究[J].中國農學通報，2008（12）：132-135.

[20] 吉前華，郭雁君，姚金明，等.貢柑葉片的礦質營養及其對果實品質影響的研究[J].西南農業學報，2010（3）：786-790.

[21] 郭雁君，吉前華，蔣惠，等.地方柑橘良種（貢柑）新建果園土壤和樹體養分分布特征[J].中國園藝文摘，2014，30（4）：7-11.

42卷16期 郭雁君等 廣東特色柑橘品種貢柑的研究進展[22] 馬培恰，吳文，唐小浪，等.不同保果處理對貢柑坐果及葉片營養的影響研究[J].廣東農業科學，2005（6）：38-40.

[23] 梁廣堅，邵玲，鐘鏡波.柑橘錯峰成熟技術及果實錯峰上市效益初探[J].廣東農業科學，2012（22）：45-47.

[24] 吳文，馬培恰，唐小浪，等.貢柑果實延期采收技術研究[J].廣東農業科學，2011（16）：26-28.

[25] 彭埃天，陳玉托，宋曉兵，等.德慶貢柑炭疽病的發生與防治初探[J].廣東農業科學，2008（2）：58-60.

[26] 王震，楊媚，楊迎青，等.廣東省柑橘炭疽病病原菌的形態與分子鑒定[J].菌物學報，2010（4）：488-493.

[27] 凌金鋒，彭埃天，宋曉兵，等.17種殺菌劑對貢柑炭疽病菌的生物活性測定研究[J].廣東農業科學，2010（1）：72-76.

[28] 陽廷密，張素英，王明召，等.廣西柑橘主栽品種對黑腐病抗性的初步鑒定[J].中國南方果樹，2012（6）：46-47.

[29] 陽廷密，唐明麗，張素英，等.8種農藥對貢柑黑腐病菌絲生長和孢子萌發的影響[J].南方園藝，2012，23（3）：19-20.

[30] 覃旭，鄧明學，陽廷密，等.貢柑黑腐病病原菌的分子鑒定[J].中國南方果樹，2012（2）：10-13.

[31] 鄧明學，覃旭，陽庭密，等.貢柑黑腐病發生規律研究[J].中國南方果樹，2012（4）：8-13，17.

[32] 馬培恰，吳文，王平，等.貢柑采收期果肉顏色變化與果實成熟度的關系研究[J].廣東農業科學，2010（10）：63-64.

[33] 柳建良，黃桂穎，舒永培，等.貢柑不同采收期果實可溶性糖紅外光譜學研究[J].西北農業學報，2009（1）：234-237.

[34] 柳建良，陳璐，許沛朋，等.貢柑果實采后可溶性糖代謝和風味品質變化的關系[J].西北農業學報，2011（2）：165-169.

[35] 謝誼芬.貢柑果實冷激處理的生理效應研究[D].長沙：湖南農業大學，2005.

[36] 柳建良，丘苑新，郭建華，等.不同鈣源采前處理對貢柑采后果實品質和貯藏性能的影響[J].廣東農業科學，2008（2）：71-73.

[37] 馬培恰，吳文，唐小浪，等.采前噴布水楊酸（SA）和赤霉素（GA3）對采后貢柑果實生理及貯藏效果的影響[J].果樹學報，2009（6）：891-894.

[38] 柳建良，丘苑新，何國芝，等.乙烯利和活性炭處理對德慶貢柑采后生理和貯藏性能的影響[J].安徽農業科學，2008（12）：4854-4856.

[39] 劉功良，陶嫦立，白衛東，等.果膠酶用于制取德慶貢柑果汁的優化工藝研究[J].安徽農業科學，2011（13）：7699-7700，7702.

[40] 李妍，葉翠香.貢柑乳酸菌發酸飲料工藝研究[J].食品工業科技，2008，129（1）：209-210.

[41] 劉功良，白衛東，趙文紅，等.貢柑果酒釀造工藝的研究[J].中國釀造，2012（8）：158-161.

[42] 張天義，曾新安，陳宏遠.貢柑果酒蒸餾過程中高級醇含量變化研究[J].釀酒科技，2012（10）：52-56.安徽農業科學，Journal of Anhui Agri. Sci.2014，42（16）：5050-5051，5053

責任編輯 劉月娟 責任校對 李巖