探討乳腺癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定性及其與臨床病理的關(guān)系

馬麗 田笠

【摘要】探討乳腺癌的微衛(wèi)星不穩(wěn)定性及其與乳腺癌臨床病理的關(guān)系，尋找更有效的判斷乳腺癌預(yù)后的分子標(biāo)志，為乳腺癌的發(fā)生及預(yù)后判斷提供理論依據(jù)。乳腺癌中普遍存在著MSI，并且MSI更多發(fā)生在有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HER2表達(dá)及臨床晚期的病例中，提示預(yù)后較差的乳腺癌病例中MSI的發(fā)生率更高，MSl可能是判斷乳腺癌臨床分期的一個(gè)分子標(biāo)志，有助于對(duì)乳腺癌的預(yù)后評(píng)估。

【關(guān)鍵詞】乳腺癌 微衛(wèi)星不穩(wěn)定 預(yù)后

【中圖分類號(hào)】G64 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-3089（2014）12-0233-01

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一。其發(fā)生是一種多基因參與，多種遺傳學(xué)改變累積的結(jié)果。而細(xì)胞的基因組不穩(wěn)定是導(dǎo)致乳腺癌發(fā)生的重要遺傳學(xué)改變。目前研究認(rèn)為，人類腫瘤的基因組不穩(wěn)定性分為兩種不同的類型：一種是微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability，MSI），另一種是雜合性缺失（Loss of heterozygosity，LOH）。微衛(wèi)星（microsatellite，MS）是廣泛分布于原核和真核生物基因組中小于10個(gè)核苷酸的簡(jiǎn)單重復(fù)序列，約占人類基因的10%，核心序列為1～6 bp[2]。MS在人群中表現(xiàn)為高度多態(tài)性主要是由于重復(fù)序列中堿基的數(shù)目不同，正常個(gè)體體細(xì)胞在生長(zhǎng)發(fā)育過程中MS長(zhǎng)度（或重復(fù)序列的重復(fù)次數(shù)）是保持不變的。MSI是指由于復(fù)制錯(cuò)誤引起的簡(jiǎn)單重復(fù)序列的增加或丟失。MSI是細(xì)胞核內(nèi)基因組不穩(wěn)定的一個(gè)重要標(biāo)志，腫瘤組織與相對(duì)應(yīng)的非腫瘤組織相比，其結(jié)構(gòu)性等位基因的大小發(fā)生改變，即MS重復(fù)單元的增加和丟失。在擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析中，表現(xiàn)為腫瘤組織DNA出現(xiàn)而非腫瘤組織中不出現(xiàn)的異常的條帶，或腫瘤組織的一個(gè)等位基因與非腫瘤組織相應(yīng)等位基因相同，而另一等位基因的位置發(fā)生改變。1993年，Altonen等[1]首次發(fā)現(xiàn)在HNPCC細(xì)胞中D2S123位點(diǎn)存在高頻率的MSI，以后相繼在肺癌、胃癌、白血病等其它腫瘤細(xì)胞內(nèi)也發(fā)現(xiàn)了MSl的存在。隨著對(duì)MSI的深入研究，現(xiàn)在普遍認(rèn)為MSI的發(fā)生與DNA錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)功能缺陷有關(guān)。有研究顯示人類錯(cuò)配修復(fù)（mismatch repair。MMR）系統(tǒng)中任何一個(gè)基因的突變都可使DNA復(fù)制精確性下降，導(dǎo)致整個(gè)基因組的不穩(wěn)定，而最易觀察到的不穩(wěn)定性表型即為MSI。另外有文獻(xiàn)報(bào)道通過對(duì)MSI的腫瘤細(xì)胞系進(jìn)行體外錯(cuò)配修復(fù)活性檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)這些腫瘤細(xì)胞系均表現(xiàn)有DNA鏈特異性錯(cuò)配修復(fù)功能的缺陷，因此推斷MSI可能是由于MMR缺陷所致，而MSI可作為一個(gè)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞突變表型的敏感指標(biāo)[3]。而在乳腺癌中是否存在MSI，不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果很不一致。Pehomaki等[4]檢測(cè)了84例乳腺癌，結(jié)果沒有發(fā)現(xiàn)二核苷酸的MS位點(diǎn)存在MSI。而Luqmani等[5]發(fā)現(xiàn)在發(fā)病年齡較早的乳腺癌患者中MSI的發(fā)生率很高。

我們的實(shí)驗(yàn)有18例正常乳腺病例均未見MSI，39例乳腺良性腫物病例有5例發(fā)生了MSI，MSI的發(fā)生率為12.82%，而在78例乳腺癌病例中則有35例發(fā)生了MSI，MSI的總發(fā)生率為44.87%，3組病例MSI的發(fā)生率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000），提示乳腺癌中更容易發(fā)生MSI。考慮產(chǎn)生MSI的原因可能是外源性化學(xué)或物理的損傷，使DNA復(fù)制過程中滑動(dòng)或修復(fù)時(shí)滑動(dòng)鏈與互補(bǔ)鏈發(fā)生堿基錯(cuò)配。導(dǎo)致一個(gè)或幾個(gè)重復(fù)單位的插入或缺失，即復(fù)制錯(cuò)誤引起簡(jiǎn)單重復(fù)序列的改變而產(chǎn)生了MSI。而機(jī)體中的MMR基因也可能是因?yàn)榄h(huán)境因素所致突變，使整個(gè)MMR系統(tǒng)功能缺陷，無法修復(fù)DNA復(fù)制過程出現(xiàn)的錯(cuò)誤，而使已經(jīng)發(fā)生的MSI得以保存在細(xì)胞DNA中。如果MSI發(fā)生于控制細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的基因（如BAX和TGFl3），使得這些基因的突變，細(xì)胞增生失去控制而惡性變，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。Seitz S等[6]用CAL51和MT-3兩個(gè)乳腺癌細(xì)胞株來檢測(cè)MSI，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞株中均普遍存在著MSI。本實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)在腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、creb-B2基因表達(dá)及臨床分期較晚的乳腺癌病例中MSI的發(fā)生更多。可能是因?yàn)殡S著細(xì)胞群體持續(xù)擴(kuò)增，已保存在細(xì)胞DNA中的MSI為下一輪致突變事件提供克隆性的靶細(xì)胞群體，使MSI在新擴(kuò)增的細(xì)胞內(nèi)再一次發(fā)生，最終有可能導(dǎo)致細(xì)胞基因組穩(wěn)定性嚴(yán)重受損，細(xì)胞增生及分化異常而出現(xiàn)細(xì)胞惡變，甚至發(fā)生惡性細(xì)胞的增殖和侵襲。Paulson等[7]報(bào)道乳腺癌中MSI與存活率下降及預(yù)后不良有關(guān)，具有MSl的病例較MSS病例的腫瘤體積更大，受累的腋窩淋巴結(jié)數(shù)更多，組織學(xué)分期更晚。實(shí)驗(yàn)中所選用的兩個(gè)2號(hào)染色體上的位點(diǎn)D2S443和D2S2739 MSI的發(fā)生率分別為23.08%和29.49%，MSI的發(fā)生率均較高。同時(shí)MMR基因中的hMSH2也定位在2號(hào)染色體上，因此懷疑乳腺癌中MSI的發(fā)生可能與hMSH2基因有關(guān)，但兩者是否有關(guān)還有待進(jìn)一步研究。另外有研究顯示，乳腺癌中MSI的發(fā)生與MMR系統(tǒng)無關(guān)，可能存在著別的機(jī)制促使乳腺癌中MSI的發(fā)生。Wild PJ等[8]的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)乳腺癌MSI的病例表達(dá)hMSH2和hMLHl正常，而p53基因的外顯子5～9均有突變，從而得出乳腺癌MSI的發(fā)生與錯(cuò)配修復(fù)途徑失活并不一致的結(jié)論，p53基因突變是導(dǎo)致乳腺癌MSI發(fā)生的機(jī)制之一。可見乳腺癌廣泛存在著MSI，但其發(fā)生機(jī)制還有待更多的實(shí)驗(yàn)來進(jìn)行研究。

綜上所述，MSI在乳腺癌中普遍存在，且與乳腺癌臨床預(yù)后較差的因素（腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、creb-B2基因表達(dá)及臨床分期晚）有關(guān)。提示MSI可能是判斷乳腺癌臨床分期的一個(gè)分子標(biāo)志，亦可能成為判斷預(yù)后的一個(gè)分子標(biāo)志，可對(duì)推測(cè)預(yù)后提供有益的幫助。