多效唑處理對麥冬有效成分的影響

占妮 陶詩順

摘要[目的]研究多效唑處理對麥冬有效成分的影響。[方法]以四川綿陽涪麥冬為材料，在9月上旬至11月上旬進行多效唑處理，測定麥冬塊根中總黃酮、總皂苷、多糖和水溶性浸出物等含量，分析多效唑處理對麥冬有效成分的影響。[結果]多效唑處理麥冬塊根的總黃酮和總皂苷含量不同程度的低于對照（不進行多效唑處理），部分多效唑處理與對照差異極其明顯。大部分多效唑處理麥冬塊根的多糖和水溶性浸出物的含量也較對照有明顯降低。不同時期和不同用量多效唑處理的影響程度存在一定的差異。[結論]多效唑處理對麥冬塊根的幾種主要成分有明顯影響。

關鍵詞多效唑；麥冬（RADIX OPHIOPOGONIS）；總黃酮；總皂苷；多糖；水溶性浸出物

中圖分類號S567文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）01-00052-02

作者簡介占妮（1988-），女，湖北武漢人，碩士研究生，研究方向：藥用植物藥物分析，Email：zhanni19880703@126.com。*通訊作者，教授，Email：741874685@qq.com。

收稿日期20131203 麥冬（RADIX OPHIOPOGONIS）為百合科（Liliaceae）植物麥冬[Ophiopogon japonicus （Thunb.） Ker-Gawl.]的干燥塊根，具有養(yǎng)陰生津和潤肺清心的功效，主治肺燥干咳、虛勞咳嗽、津傷口渴、心煩失眠、內熱消渴和腸燥便秘等癥[1]。麥冬主要有效成分為皂苷、多糖、黃酮和水溶性浸出物等[7]。四川綿陽涪江流域是涪麥冬重要產地。為了提高麥冬產量，藥農普遍施用多效唑。多效唑（MET）可以有效地控制麥冬縱向生長、促進橫向生長，提高其塊根產量的作用。筆者已通過試驗研究證實了施用多效唑對麥冬具有明顯增產效果（另文報道）。但多效唑在提高麥冬產量的同時，是否會引起麥冬有效成分的變化和影響其藥用價值，這也是一個十分重要的問題。因此，筆者研究多效唑處理對麥冬塊根主要有效成分的影響，以期為麥冬的進一步開發(fā)利用提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對象。直立型麥冬，采摘于三臺縣涪麥冬主產區(qū)，經鑒定為麥冬[Ophiopogon japonicus （Thunb.） Ker-Gawl.]。

1.1.2 主要儀器。U-3900紫外-可見分光光度計，購自日立公司；電子分析天平，購自梅特勒-托利多公司。

1.1.3 主要試劑。無水葡萄糖，購自中國上海曹楊第二試劑廠；蒽酮，購自中國醫(yī)藥集團上海化學試劑公司；硫酸，購自新科電化學試劑廠；旋轉蒸發(fā)儀，購自上海榮生儀器公司；15%多效唑可濕性粉劑和橙皮苷對照品，購自中國藥品生物制品檢定所；魯斯可皂苷元對照品、麥冬多糖及其他試劑均為分析純，實驗室配置。

1.2方法

1.2.1 試驗設計。試驗在西南科技大學校內科研地進行。于2012年3月20日在同一地塊選擇長勢一致的麥冬植株，挖出洗凈，剪去地下部分，再選擇大小一致的單個分枝作為扦插苗。按與大面積生產相同的方法整地、施底肥和扦插。試驗小區(qū)長145 cm，寬60 cm，每小區(qū)扦4行，每行10穴，行距20 cm，每穴3株，行頭設保護行2行，小區(qū)間隔40 cm，折每平方米栽植35穴，共105株。

設8種多效唑處理：包括①不施多效唑（以CK表示）；②9月上旬處理1次，③10月上旬處理1次，④11月上旬處理1次，⑤9月上旬處理1次+10月上旬處理1次，⑥9月上旬處理1次+11月上旬處理1次，⑦10月上旬處理1次+11月上旬處理1次，⑧9月上旬處理1次+10月上旬處理1次+11月上旬處理1次。每次處理多效唑用量均為1.5 g/m2，以濃度0.1%的藥液均勻噴施于植株上，未施用多效唑的小區(qū)均用與多效唑處理小區(qū)用水量相等的清水噴霧。試驗小區(qū)隨機排列，重復3次。次年4月進行采摘塊根，70 ℃烘干后粉碎，過2號篩，保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 線性關系的考察。麥冬總黃酮的標準曲線參照余伯陽等的方法[8]建立，提取液及測定參照謝明華等的方法進行[7]。

1.2.3 麥冬多糖的含量測定[5]。參照文獻的方法進行測定。

1.2.4 麥冬總皂苷的含量測定。用《中國藥典》2010年版麥冬鑒定方法測定[2]。

1.2.5 水溶性浸出物的含量測定。用冷浸法測定[2]。

2結果與分析

2.1麥冬總黃酮的含量測定

2.1.1 橙皮苷線性關系的考察。以對照品濃度為橫坐標（x），吸光度為縱坐標（y）進行線性回歸，計算得線性回歸方程為y=0.038 3x+0.002 2，R2=0.999 8。試驗結果表明，在5～25 μg/ml范圍內，橙皮苷濃度與吸光度的線性關系良好，符合Beer定律。

2.1.2 樣品中總黃酮含量測定。根據橙皮苷標準曲線的回歸方程，計算麥冬塊根中總黃酮的含量。結果表明，8個處理中，麥冬塊根中總黃酮的含量大小順序依次是①>③>⑥>④>⑧>②>⑤>⑦；含量分別為2.467、2.135、1.621、1.580、1.498、1.445、1.254和1.129 mg/g。在7個多效唑處理中，除處理②與對照組較為接近外，其余均極顯著低于對照組（P<0.01）。

2.2麥冬多糖的含量測定

2.2.1 葡萄糖線性關系的考察。以對照品濃度為橫坐標（x），吸光度為縱坐標（y）進行線性回歸，計算得線性回歸方程為y=25.919 0x+0.584 5（R=0.998 9）。試驗結果表明，在2.56～25.60 mg/L范圍內，葡萄糖濃度與吸光度呈良好的線性關系。

2.2.2 精密度試驗。從同一樣品中取出相同量溶液6份，測定麥冬多糖的含量，結果為（24.89±0.18）%。

2.2.3 回收率試驗。精密稱取已知麥冬多糖含量的樣品（A）4份，加入葡萄糖對照品溶液，加水溶解并定容至100 ml。取溶液適量，按標準曲線方法操作，于626 nm波長處測定吸收值。代入工作曲線方程，計算出平均回收率為104.31%，RSD為7.14%，表明該方法準確可靠，可用于麥冬中多糖的含量測定（表1）。

2.2.4 多糖的含量測定。精密稱取麥冬多糖精制品20.0 mg，加水溶解并定容至100 ml作為供試品。取溶液適量，按標準曲線方法操作，于626 nm波長處測定吸收值。代入工作曲線方程計算供試品中麥冬多糖的含量。結果表明，麥冬塊根多糖含量以處理③的最高（29.5%），對照組次之（24.7%），處理②（24.5%）與對照組甚為接近；其余處理的含量大小依次為⑦>⑧>⑥>⑤>④，多糖含量依次為22.8%、22.1%、17.1%、15.2%和11.7%。

2.3麥冬總皂苷的測定

2.3.1 總皂苷的線性關系考察。精密量取對照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0和6.0 ml分別置具塞試管中，于水浴中揮干溶劑，精密加入高氯酸10 ml，搖勻，置溫水中保溫10 min，取出，冰水冷卻10 min，以相應試劑為空白，在397 nm處測定吸光度，計算得線性回歸方程為Y=0.001 X+0.008，R=0.999 1。

2.3.2 精密度試驗。取同一份供試品A（即剛提取的皂苷粗品）溶液，按線性關系考察的方法操作，重復測定6次，測得RSD為0.29%，表明精密度良好。

2.3.3 回收率試驗。精密稱取已知總皂苷含量的麥冬藥材1.000 g，各6份，分別精密加入一定量的魯斯可皂苷元對照品，按“2.3.1”下方法操作測定，計算得平均回收率為99.40%，RSD為2.10%，表明該方法準確可靠，可用于麥冬中總皂苷的含量測定。

2.3.4 皂苷的含量測定。精密量取供試品溶液2.0 ml置10 ml具塞試管中，照麥冬在《中國藥典》的含量方法，自“于水浴中揮干溶劑”起，測定吸光度，代入標準曲線并計算供試品的總皂苷含量。結果表明，麥冬塊根中總皂苷的含量以處理①最高，其余各處理組的含量大小依次為③>⑤>②>⑦>⑧>⑥>④；8個處理中皂苷含量大小依次為0.459%、0.433%、0.412%、0.403%、0.398%、0.397%、0.343%和0.331%。

2.4水溶性浸出物的測定 根據《中國藥典》的冷浸法算出麥冬水溶性浸出物的含量。除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量（%）。水溶性浸出物的含量以處理⑧為最高，處理⑤次之，其余處理大小依次是①>②>④>③>⑥>⑦；8個處理中水溶性浸出物的含量大小依次為0.829%、0.813%、0.752%、0.739%、0.716%、0.704%、0.689%和0.687%。

3結論與討論

中草藥有效成分受其生長地域、生態(tài)環(huán)境、品種、植物生長調節(jié)物質等因素的影響而表現出一定的差異。試驗結果表明，與對照（不施用多效唑）相比，多效唑處理對麥冬塊根幾種有效成分含量有較為明顯的影響。總起來看，多效唑處理麥冬塊根的黃酮和總皂苷含量不同程度的低于對照，部分多效唑處理與對照差異明顯。大部分多效唑處理麥冬塊根的多糖和水溶性浸出物的含量也較對照有明顯降低。不同時期和不同用量多效唑處理間麥冬塊根主要成分也存在一定的差異，但其規(guī)律性不甚明顯。因此，可以初步認為，多效唑處理對麥冬塊根品種可能會產生不利的影響，這在麥冬生產上是一個不容忽視的問題。

參考文獻

[1] 尤潔.麥冬的藥理作用與臨床應用進展[J].菏澤醫(yī)學專科學校學報，2011（1）：71-73.

[2] 國家藥典委員會.中國藥典：一部（中華人民共和國藥典中藥（2010年版））[S].北京：中國人民出版社， 2010：144.

[3] 林穎，吳毓敏，吳雯，等.天然產物中糖含量測定方法正確性的研究[J].天然產物研究與開發(fā)，1996，8（3）：5.

[4] 湯軍，黃琦，徐志瑛，等.麥冬多糖的提取分離與初步分析[J].浙江中醫(yī)學院學報，1999，23（1）：59.

[5] 唐麗琴，李矗，劉圣，等.蒽酮-硫酸比色法測定麥冬多糖的含量[J].安徽醫(yī)藥，2003，7（1）：39-40.

[6] 郭孝武. 一種提取中草藥化學成分的方法-超聲提取法[J].天然產物研究與開發(fā)， 1998，11（3）： 37-40.

[7] 謝明華，蔡鑫君，陳稀煩.超聲提取麥冬總黃酮的工藝研究[J].海峽藥學，2008（11）：15-17.

[8] 余伯陽，徐國鈞，金蓉鸞，等.麥冬中總黃酮的含量測定[J].中藥通報，1987，12（4）：200-201.安徽農業(yè)科學，Journal of Anhui Agri. Sci.2014，42（1）：54-56，58