蛋白尿的臨床檢驗分析

摘要：目的：探討蛋白尿的中尿蛋白定性檢查及定量檢測。方法：對30例蛋白尿患者的實驗室檢驗資料進行分析。結(jié)果：腎小球性蛋白 22例，混合性蛋白尿4例，腎小管性蛋白尿1例，生理性蛋白尿3例。結(jié)論：尿蛋白定性試驗反應(yīng)受尿液濃縮與稀釋的影響，尿液濃縮時，尿蛋白濃度增高，可使尿蛋白陽性1+變?yōu)?+，甚至3+～4+，尿液稀釋時，可使原來的強陽性變?yōu)槿蹶栃裕踔潦顷幮浴?/p>

關(guān)鍵詞：蛋白尿；定性檢測；定量檢測【中圖分類號】R446.12【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1672-8602（2014）02-0188-01

蛋白尿是腎臟疾病最常見的癥狀之一。尿中蛋白質(zhì)極微，尿常規(guī)定性檢查呈陰性。尿蛋白檢測可用于初步判斷腎臟功能，尿蛋白定性試驗為人群健康篩檢及疾病的初步提示，陽性者可進一步做定量檢測，一般以24小時尿蛋白總量較為準(zhǔn)確。

1臨床資料

選取2012年1月～2012年12月腎臟疾病患者30例，均為我院住院患者。其中男性10例，女性20例。腎小球性蛋白 22例，混合性蛋白尿4例，腎小管性蛋白尿1例，生理性蛋白尿3例。

2檢測方法

2.1尿蛋白質(zhì)定性測定

2.1.1加熱乙酸法：取試管1支，加清晰尿液至試管的2/3處。用夾子夾在試管的下端，將試管上端1/3處斜置在酒精燈火焰上加熱，沸騰即止。輕輕直立試管，在黑色背景下觀察煮沸部分有無混濁。滴加5%乙酸溶液3～4滴，再煮沸，立即觀察結(jié)果。注意操作的先后順序及加入乙酸的量[1]。 加熱時勿使底部尿液受熱，以便上下對照并防止尿液濺出。當(dāng)尿液中電解質(zhì)含量少時可在尿液上部滴加飽和NaCl溶液1～2滴，混勻后再進行操作。陳舊尿液、含有其他分泌物的尿液，均可導(dǎo)致假陽性。

2.1.2磺基水楊酸法：取小試管加尿液3～5ml。加200g/L磺基水楊酸乙醇溶液3～4滴，形成界面。待2～3min后觀察結(jié)果。結(jié)果判斷根據(jù)液面接觸處絮狀物沉淀的多少。本法較為敏感，對酮體、尿酸可形成假陽性，尿液中鹽分增多時可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)，但經(jīng)加熱混濁可消失。如尿呈堿性，應(yīng)先加5%醋酸使其酸化后再進行檢驗，否則會造成假陰性。

2.1.3干化學(xué)試帶法：將干化學(xué)試紙條完全浸入尿中3～5s。拿出試紙條放到容器邊緣，把干化學(xué)試紙條邊緣多余的尿液去掉。將干化學(xué)試紙條放到尿液自動化分析儀上，按【start】鍵即開始檢測。

2.2尿蛋白質(zhì)定量檢測：蛋白質(zhì)分子中的肽鍵在堿性條件下，與Cu2+產(chǎn)生紫紅絡(luò)合反應(yīng)，與縮二脲在堿性溶液中與Cu2+的反應(yīng)相似，故稱為雙脲反應(yīng)。產(chǎn)生顏色的強度在一定范圍內(nèi)與蛋白質(zhì)的含量成正比，尿液與同樣處理的蛋白標(biāo)準(zhǔn)液比較，經(jīng)計算即可求出血清總蛋白含量。先將尿液做蛋白定性測定。如為陰性，則報告<120 mg/24h。如為陽性，則取大約0.5ml液放入儀器標(biāo)本杯中。在儀器上先定義標(biāo)本編號，然后給出標(biāo)本所放的盤號。按下【start】鍵即開始檢測。

3討論

尿蛋白定性檢查只是篩選檢查，是較常見的一種方法，尿液標(biāo)本最好是晨尿，晨尿最濃，且可排除體位性蛋白尿。但是由于尿蛋白量受多種因素的影響，故應(yīng)正確評估。首先確定是否為真性蛋白尿。尿蛋白定量檢查，最常用的為24小時尿蛋白定量，小于1g，腎小球疾病的機會較少，正常24小時尿蛋白包括白蛋白（小于35mg/24h）及其他血漿蛋白，如球蛋白、結(jié)合珠蛋白、β2微球蛋白以及由腎小管上皮細(xì)胞分泌的Tamm-Horsfall蛋白（小于50 mg/24h）等。正常尿蛋白排泄量有隨年齡、體力活動和長時間站立而增加的傾向。尿蛋白定量主要用于腎臟疾病治療效果評價。應(yīng)同時作尿蛋白電泳、肌酐，評價尿蛋白來源和腎功能[2]。如用于病因?qū)W和腎單位狀態(tài)評價應(yīng)同時測定血清蛋白和蛋白電泳、免疫球蛋白和輕鏈定量、肌酐和肌酐清除率、抗核抗體（ANA）、抗DNA抗體、總補體溶血活性（CH50）和C3、C4補體。常見于功能性蛋白尿、體位性蛋白尿、腎盂腎炎、腎動脈硬化、尿路梗阻、尿路腫瘤及結(jié)石等。定量在1～3g之間，常見于原發(fā)性或繼發(fā)性腎小球疾病。定量大于3g者多見于原發(fā)或繼發(fā)的腎病綜合征。

測定選擇性蛋白尿的方法有很多種，如尿蛋白電泳、選擇性蛋白尿的θ角測定法、選擇性蛋白尿指數(shù)、輸入分子量不同的右旋糖酐的腎清除率測定法以及高效液相色譜分析法等。當(dāng)腎小球疾病較輕，濾過膜\"漏洞\"較小時，尿中以中分子的白蛋白為主，而大分子蛋白含量很少，稱為選擇性蛋白尿；當(dāng)腎小球病變明顯，濾過膜\"漏洞\"較大時，尿中不僅有大量的白蛋白，而且有大量的大分子蛋白如球蛋白，則稱為非選擇性蛋白尿。因此，蛋白尿的選擇性可反映腎小球濾過膜的通透性，在某種程度上與腎小球病變的嚴(yán)重程度有關(guān)。同時也可預(yù)測治療反應(yīng)與預(yù)后，選擇性高的蛋白尿其療效好，預(yù)后較好。

尿蛋白圓盤電泳測定（亦稱十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳，SDS-PAGE盤狀電泳），是目前分析尿蛋白成分的一種較為理想的方法。其原理是丙烯酰胺與交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合成大分子凝膠，用凝膠作為支持物進行電泳。電泳前可先使分離的尿蛋白與十二烷基硫酸鈉（SDS）反應(yīng)，形成帶負(fù)電荷的SDS-蛋白復(fù)合物，消除原尿蛋白分子中的電荷差異，使電泳時尿中各種蛋白質(zhì)成分均向正極移動，由于尿蛋白各種成分的分子量不同，在通過聚丙烯酰胺的分子篩作用后，將尿中各種蛋白按分子量大小的順序彼此分離，分子量大者泳動慢，分子量小者泳動快。故只要與已知分子量的蛋白一起電泳，便可判斷患者蛋白尿組分的性質(zhì)與分子量的范圍。尿蛋白電泳后可分為5型：①正常類型：無特殊臨床意義[3]。②低分子蛋白尿：提示腎小管及間質(zhì)病變或溢出性蛋白尿。③中分子蛋白尿：主要反映腎小球病變，見于急慢性腎小球腎炎及腎病綜合征、妊娠高血壓、糖尿病腎病等。④高分子蛋白尿，其臨床意義與中分子蛋白尿相同。⑤混合性蛋白尿，提示病變累及腎小球、腎小管及腎間質(zhì)，見于各種腎炎晚期、慢性腎功能不全及急性腎衰竭等。

參考文獻(xiàn)

[1]姜儻.尿液蛋白與腎臟病.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2002，25（5）：312-313.

[2]潘祥坡，王煥新，張風(fēng)美.尿液高pH值致尿蛋白假陽性4例分析.山東醫(yī)藥，2001，41（2）：32.

[3]張秀明，李健齋，魏明竟，等.現(xiàn)代臨床生化檢驗學(xué)[M]，北京：人民軍醫(yī)出版社，1998.