一氧化氮與白內障病理相關性的實驗分析

摘要：目的：研究分析一氧化氮與白內障病理的相關性。方法：老年性白內障（觀察1組）患者17例，糖尿病性白內障（觀察2組）患者23例，正常對照組32例，制作成晶體狀勻漿上清，檢測一氧化氮合成酶（NOS）與一氧化氮（NO）。結果：對照組患者晶狀體中含有NO與NOS，觀察1組患者的NO與NOS含量高于對照組（t=8.57，P=0.01），觀察2組高于觀察1組（t=15.76，P=0.0001）。結論：正常晶狀體中含有NO與NOS，濃度不同的NO與NOS有保持晶體狀透明性的生理效果以與誘導白內障病理的功能。

關鍵詞：一氧化氮；白內障；病理；實驗分析

【中圖分類號】

R365 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763（2014）07-0256-01

白內障是目前世界上存在的主要致盲性眼病，其形成機制是各種不同因素相互作用的結果^[1]。一氧化氮（NO）是最近幾年來醫學專家們發現的小分子內源性介質，同時也是一個帶自由基化學性質的氣體，它和眼球復雜的病理關系受到了廣大醫學者的重視，很多學者認為一氧化氮參與了視網膜、青光眼以及葡萄膜炎疾病的病理過程。本文主要研究分析一氧化氮與白內障病理的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料：

選取我院2011年3月-2013年3月期間收治的40例白內障患者，老年性白內障（觀察1組）患者17例，男10例，女7例，平均年齡（72.8±6.9）歲。糖尿病性白內障（觀察2組）患者23例，男11例，女12例，平均年齡（60.3±5.7）歲。正常對照組32例，男17例，女15例，平均年齡（30.6±11.67）歲。選取高度近視透明晶狀體摘除3例6眼，非正常死亡自愿捐獻患者3例6眼，將標本置于-80℃的冰箱中保存。

1.2 儀器與試劑：

用上海第三分析儀器廠生產的721可見光分光光度計，用江蘇金壇市醫療儀器廠生產的HH-W三用恒溫箱，用安亭科學儀器廠生產的型號為DDL-5額低溫冷凍離心沉淀器。用南京建成生物制品工程研究所生產的一氧化氮試劑盒進行實驗。

1.3 方法：

①制備晶狀體勻漿，選取晶狀體制作形成晶狀體組織勻漿，在冰浴條件下保持（3000～4000）r/min，離心10min左右，選取上清液，檢測NOS與NO。②用硝酸還原酶化學比色法檢測，具體檢測流程與計算方法按照試劑盒上面的說明實施。

1.4 統計學處理： 本研究所得數據用SPSS17.0統計包統計分析，計量資料用t檢驗，用X±s表示，以P<0.05為結果有統計學意義。

2 結果

從下表1可知：對照組患者晶狀體中含有NO與NOS，觀察1組患者的NO與NOS含量高于對照組（t=8.57，P=0.01），觀察2組高于觀察1組（t=15.76，P=0.0001））。

3 討論

3.1 一氧化氮的形成與作用：

一氧化氮廣泛存在于機體內的各種組織中，其是一種氣體信息分子，有自由基化學性質。它主要在NOS的催化影響下借助O2、尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸黃遞酶以及L-精氨酸形成。NOS作為NO生物合成關鍵酶，目前已經克隆出3種NOS基因，有兩種亞型，又可稱作結構型NOS，即cNOS，NOSⅠ存在于部分上皮及神經元中，NOSⅢ多在內皮細胞中出現，NOSⅠ與NOSⅢ主要依賴CaM，Ca²⁺激活，當激活以后會生產少量一氧化氮，但是NOSⅡ不會依賴CaM，Ca²⁺，其主要在免疫刺激或者炎癥條件下在多種不同細胞中表達出來，待其活化以后會長時間保持活性，生成很多NO。當NO被血紅蛋白或者氧自由基滅活后，會形成亞硝酸鹽或者硝酸鹽，其是一種重要的氣體信息分子與神經傳遞介質，通過鳥甘酸環化酶激活后，導致cAMP水平提高^[2]。機體內部的一氧化氮生成量較少或者過量都會產生一定程度的毒性作用，在病理條件下，外界各種刺激因素都有可能激活NOS形成大量NO，其作為較強的自由基，促使細胞內Ca²⁺濃度增加，破壞原有的細胞呼吸鏈，損壞DNA有一定的細胞毒性，促使細胞凋亡。同時釋放大量NO還可能形成大量的過氧亞硝基陰離子，其細胞毒性更強，故可以說機體內有大量NO是引起疾病的主要因素之一。

3.2 一氧化氮與白內障：

促使白內障形成的不可缺少因素之一即自由基氧化損傷晶狀體，其原理為晶狀體內部的谷氨酸氧化還原后的巰基與自由基相結合，促使其亞硝酸化進一步形成二硫鍵，很多白內障晶狀體核的未溶化部分二硫鍵變多，。一氧化氮會促使細胞核酸亞硝酰化，從而破壞DNA螺旋結構，損傷細胞。閻洪祿，劉紅霞等人^[3]物做實驗發現：H2O2是一種氧化損傷因素會導致Ca²⁺細胞內流，NO過量生成，以及NOS活性提高，它是早期白內障形成的病理過程之一。本次研究表明：對照組患者晶狀體中含有NO與NOS，觀察1組患者的NO與NOS含量高于對照組（t=8.57，P=0.01），觀察2組高于觀察1組（t=15.76，P=0.0001）。這與郭斌^[3]果相符。同時也說明了一氧化氮和白內障的形成存在密切聯系，由此推理大量的一氧化氮通過化學反應對晶狀體細胞產生強度氧化損傷，導致白內障的形成。同時也提示正常晶狀體中含有NO與NOS，濃度不同的NO與NOS有保持晶體狀透明性的生理效果以與誘導白內障病理的功能。

參考文獻

[1] 鄭茜.一氧化氮與白內障的研究進展[J].遼寧醫學院學報，2008，1（02）：56-57.

[2] 張婧，陳垠衫.白內障動物模型的建立及評價參數的研究進展[J].沈陽藥科大學學報，2008，4（08）：138-139.

[3] 閻洪祿，劉紅霞.一氧化氮及其合酶在白內障形成過程中的作用[J].中華眼科雜志，2004，6（08）：256-259.

[4] 郭斌.靜態壓力對大鼠視網膜微血管內皮細胞內皮素-1和NO表達的影響[J].眼科研究，2010，3（02）：155-159.