高效液相色譜法測(cè)定啤酒中的乙基麥芽酚

【摘 要】 應(yīng)用高效液相色譜法測(cè)定啤酒中的乙基麥芽酚。樣品用水稀釋后，以水和甲醇為流動(dòng)相梯度洗脫，經(jīng)C18色譜柱分離，用VWD檢測(cè)器檢測(cè)。乙基麥芽酚的質(zhì)量濃度在（2.0～50）μg/mL范圍內(nèi)與其峰面積呈線性關(guān)系，測(cè)定下線（10S/N）在1.0～3.0之間。方法對(duì)乙基麥芽酚的回收率為95.8%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）小于6%。

【關(guān)鍵詞】 高效液相色譜法 梯度洗脫 乙基麥芽酚

根據(jù)產(chǎn)品類型、質(zhì)量要求、酵母性能、接種量、發(fā)酵溫度、季節(jié)等決定，啤酒發(fā)酵期一般12～24天。通常，夏季普通啤酒發(fā)酵周期較短，優(yōu)質(zhì)啤酒發(fā)酵周期較長，淡季發(fā)酵周期適當(dāng)延長。有些啤酒廠家為了縮短發(fā)酵周期，降低成本，保持啤酒特有的呈香呈味物質(zhì)，就加入了乙基麥芽酚。雖然乙基麥芽酚是食品添加劑，國家在GB 2760-2011《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定可以使用。但GB 7718-2011《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品標(biāo)簽通則》中同時(shí)規(guī)定，在配料表中必須標(biāo)示食品添加劑具體名稱。可啤酒廠家在配料表中并未標(biāo)注。目前測(cè)定啤酒中的乙基麥芽酚還沒有測(cè)定方法。為了保護(hù)消費(fèi)者的利益，保護(hù)企業(yè)之間競爭的公平性，本方法研究了啤酒中的乙基麥芽酚的測(cè)定。本工作中針對(duì)啤酒組分和乙基麥芽酚的性質(zhì)，采用梯度洗脫，高效液相色譜——多波長紫外檢測(cè)器測(cè)定，方法的重復(fù)性好，靈敏度高，回收率高，各項(xiàng)指標(biāo)均能滿足檢測(cè)工作的需要。

1 試驗(yàn)部分

1.1儀器與試劑

Agilent1200高效液相色譜儀，配多波長紫外檢測(cè)器；C18色譜柱。

乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取按其純度折算為100%質(zhì)量乙基麥芽酚0.02g，于100mL容量瓶中，加水，稀釋至刻度，配成濃度為200mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，備用。使用時(shí)稀釋成10mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。

甲醇：色譜純，其余試劑均為分析純，水為去離子水。

1.2色譜條件

ZORBAX Extend-C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相：A為水，B為甲醇；洗脫梯度：B初始為80%，保持2min，4minB為70%，5minB為65%，6minB為60%，8minB為50%，10minB為30%；流量為0.6mL/min，進(jìn)樣量為10μL，檢測(cè)波長為276nm。

1.3試驗(yàn)方法

將啤酒樣品搖勻，超聲波脫氣30min，取5mL樣品，稀釋到10mL，做為試樣溶液。

2 結(jié)果與討論

2.1洗脫梯度的選擇

由于啤酒基體的復(fù)雜性，為了利于色譜峰的分離，流動(dòng)相甲醇的體積分?jǐn)?shù)緩慢降低，由最初的80%在6min內(nèi)降低到50%，然后由第8min時(shí)50%降低到第10min時(shí)30%。采用梯度洗脫時(shí)，相鄰兩次的進(jìn)樣之間需要平衡一段時(shí)間，因此在最初80%時(shí)保持2min。

2.2檢測(cè)波長的選擇

試驗(yàn)在190nm～900nm波長范圍內(nèi)對(duì)乙基麥芽酚進(jìn)行掃描，保證了檢測(cè)的可靠性和準(zhǔn)確性，乙基麥芽酚的檢測(cè)波長是276nm。

2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢測(cè)下線

按色譜條件對(duì)2.0mg/L，10.0mg/L，20mg/L，30mg/L，50mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明：在（2.0～50）mg/L范圍內(nèi)乙基麥芽酚的質(zhì)量濃度與其峰面積呈線性關(guān)系，線性回歸方程為y=2278.22+269838x，相關(guān)系數(shù)為0.9993。

2.4方法的回收率及精密度

按色譜條件對(duì)乙基麥芽酚加標(biāo)20mg/L的啤酒樣品進(jìn)行分析，回收率和精密度結(jié)果分別為：95.8%，5.95%。