梅毒螺旋體抗體測定及臨床意義

摘要：目的：探討人體血清中梅毒螺旋體抗體檢測及臨床意義。方法：收集臨床上100例梅毒患者用酶聯免疫法進行血清標本檢測。結果：用酶聯免疫法檢測梅毒螺旋體抗體具有靈敏度高、特異性好。結論：酶聯免疫法檢測人血清中梅毒螺旋體抗體。適用于血液的篩查及臨床梅毒螺旋體抗感染的輔助診斷。

關鍵詞：梅毒；酶聯免疫法；臨床意義

Abstract： Objective： To study the detection of human serum Treponema pallidum antibody and its clinical significance. Methods： 100 clinical cases of syphilis patients with enzyme linked immunosorbent assay for serum samples. Results： the detection of Treponema pallidum antibody has the advantages of high sensitivity， good specificity by enzyme linked immunosorbent assay. Conclusion： the detection of human body antibody enzyme linked immunosorbent assay in the serum of syphilis. Auxiliary diagnostic screening for blood and clinical anti infection of Treponema pallidum.

Key words： Syphilis； ELISA； Clinical significance

【中圖分類號】R446.11 【文獻標識碼】B 【文章編號】1672-8602（2014）01-0201-01

梅毒是由梅毒螺旋體引起的慢性、系統性性傳播疾病。可分為后天性梅毒和先天性梅毒。前者主要通過性接觸感染，后者從母體通過胎盤傳給胎兒，偶然可經輸血感染。其主要通過性途徑傳播，在我國的傳播出現上升趨勢。當今實驗室診斷梅毒常用酶聯免疫法。酶聯免疫法（ELISA）是將抗原（或抗體）吸附在聚苯乙烯反應板上后，加入酶標抗體（或酶標抗原）與相應抗原（或抗體）特異結合，使酶也結合到載體上，洗去游離酶標抗體（或酶標抗原），加入底物顯色，根據顏色有無和深淺進行定性或定量分析。現結合臨床報告分析如下。

1臨床資料

1.1一般資料：收集臨床上本組100例感染梅毒患者，其中男性64例，女性36例。

1.2方法

1.2.1檢驗原理：采用雙抗原夾心法酶聯免疫吸附試驗原理。用已知的梅毒螺旋體抗體的基因重組抗原，配以酶標記抗原及TMB顯色劑等其他試劑，檢測人血清中的梅毒螺旋體抗體。

1.2.2檢驗試劑：重組抗原ELISA（雙抗原夾心）試劑盒。陰、陽性對照試劑，酶標試劑，濃縮洗滌液，顯色劑A、B液，終止液。

1.2.3檢驗方法：（1）配液：將濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋。（2）編號：將待測血清編號后，相應加入微孔板中，每板應設陰性對照3孔，陽性對照2孔和空白對照1孔。（3）加樣：分別在相應孔中加入待測血清和陰、陽性對照100μl。（4）溫育：用封板膜封板后，置37±1℃溫育60±2分鐘。（5）洗板：小心揭掉封板膜，洗板5遍，最后一次扣干。（6）加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。（7）溫育：用封板膜封板后，置37±1℃溫育30±1分鐘。（8）洗板：小心揭掉封板膜，洗板5遍，最后一次扣干。（9）顯色：每孔加入顯色劑A、B液各50μl，輕輕振蕩混勻，37±1℃避光顯色30±1分鐘。（10）測定：每孔加終止液50μl，輕輕振蕩混勻，10分鐘內測定結果。設定酶標儀波長于450nm處，用空白孔調零點后測定各孔值。

2結果

參考值：臨界值=陰性對照孔均值±0.18。（1）陰性對照孔值≤0.10，陽性對照孔值≥0.80。否則實驗無效。（2）若有1孔陰性對照值大于0.1應舍棄，若兩孔或兩孔以上陰性對照值大于0.1，應重復實驗。（3）陰性判定：測定的值<臨界值為陰性。（4）陽性判定：測定的值>臨界值為陽性。

3討論

梅毒螺旋體（TP）屬于密螺旋體屬蒼白螺旋體的蒼白亞種，是引起人類梅毒的病原體。梅毒是性傳播疾病，是一種嚴重危害人類健康的傳播疾病。檢測梅毒螺旋體抗體的臨床意義：梅毒螺旋體有很強的侵襲力，但未發現內毒素和外毒素，其致病主要通過莢膜樣物質、外膜蛋白、透明質酸酶等物質的作用。有毒株尚能以宿主細胞的纖維粘連蛋白覆蓋于其表面，以保護菌體勿受宿主吞噬細胞的攻擊。梅毒中出現的組織破壞和病灶，主要是該螺旋體感染患者后的免疫損傷所致。梅毒螺旋體引起梅毒。人是梅毒的唯一傳染源。臨床上可表現為一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潛伏梅毒和先天梅毒（胎傳梅毒）等。①一期梅毒。感染后三周左右局部出現無痛性硬下疳。多見外生殖器，主要癥狀為外陰部出現暗紅色丘疹，其后丘疹表面糜爛，形成潰瘍。一般硬下疳不經治療4～8周后，癥狀消失，但并不意味著梅毒已經痊愈，而是經過一段時間后進入二期梅毒。②二期梅毒。發生于硬下疳出現后2～8周。此時梅毒螺旋體通過血液擴撒到盡乎全身，出現全身性梅毒疹。主要發生在皮膚黏膜上，也可伴發皮膚附件損害。初次出現梅毒疹經過一段時間后會自行消退，但隱伏一定時間后重新又出現新的皮疹。一、二期傳染性強，但破壞性較小。③三期梅毒。又稱為晚期梅毒。多是早期梅毒未經治療或治療不徹底發展而成的。發生于感染2年后，也可長達10～15年。病變可波及全身組織和器官，嚴重者可危及生命。三期也常出現進展和消退交替進行。病損部位螺旋體少但是破壞性大。

為更好的治療和預防梅毒。采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）將梅毒基因重組抗原包被在微孔測定板上，結合ELISA雙抗原夾心法，使重組抗原ELISA雙抗原夾心法具有敏感性高、特異性好等優點，是一種集篩查和確診為一體的檢測梅毒的好方法，是目前梅毒診斷和治療監測的主要指標之一。

參考文獻

[1]王蘭蘭. 臨床免疫學與檢驗.第4版.北京：人民衛生出版社，2011，103-106.

[2]楊文林，楊健，劉丹瑩，等.早期梅毒治療前后血清學分析[J].臨床皮膚科雜志，1998，27（5）：314.