異嗜性抗體在甲狀腺功能檢測中的影響分析

【摘要】目的：對異嗜性抗體在甲狀腺功能檢測中的影響作用進行分析，并探討排除和減少干擾的方法。方法：選取2013年1-12月間我院行促甲狀腺激素檢測并發病激素水平有不適當增高病例180例，取患者空腹靜脈血離心處理獲得血清，血清樣本行聚乙二醇（PEG）沉淀法及標記抗體的固相放射免疫分析法（IRMA法）測定促甲狀腺激素（TSH）水平，診斷出異嗜性抗體增多癥6例，納入研究組，其余174例納入對照組。結果：研究組RIA法測定TSH水平顯著低于IRMA法血清中和前檢測結果，同時也顯著低于對照組RIA法測定結果，數據間比較具有統計學差異（Plt;0.01）;IRMA法血清中和后TSH水平顯著低于血清中和前，同時顯著低于對照組血清中和后檢測結果，數據間比較具有統計學差異（Plt;0.01）。兩組間RIA法測定FT3與FT4的結果比較無統計學差異，且血清中和前、后的FT3或FT4水平組內比較無統計學差異（Pgt;0.05）。結論：對于IRMA法檢測TSH水平有不適當增高病例，應提高警惕，患者可能存在異嗜性抗體干擾，應進一步行RIA法測定，如結果有顯著下降，說明異嗜性抗體的存在風險更高，一般可采用FEG法進行最終診斷與確定。

【關鍵詞】異嗜性抗體;甲狀腺功能指標;固相放射免疫分析法;檢測價值

【中圖分類號】R4 " "【文獻標識碼】B " "【文章編號】1671-8801（2014）011- 0119-02

異嗜性抗體為免疫測定中一類嚴重影響檢測結果的干擾因素，主要因其與受檢物質具有相似活性但化學結構不同引起[1]。在檢驗過程中，如忽略異嗜性抗體作用，對于檢驗結果的準確性與特異性具有極大影響，甚至增大了臨床用藥的風險[2]。有報道顯示，飼養寵物兔的受檢人群內，約有30%-40%比例能檢測出異嗜性抗體存在，而當中約有0.05%-0.5%的免疫測定受到異嗜性抗體干擾[3]。在甲狀腺功能檢測中，異嗜性抗體的干擾易影響檢測結果，使測定的激素水平與實際情況不符，影響臨床的診治與預后?，F對異嗜性抗體在甲狀腺功能檢測中的影響作用進行分析，并探討排除和減少干擾的方法，希望為提高臨床診斷甲狀腺水平的準確性提出建議。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2013年1-12月間我院行促甲狀腺激素檢測并發病激素水平有不適當增高病例180例，包括男性102例，女性78例，平均年齡（43.8±12.6）歲，平均病程（9.5±5.2）個月。

1.2方法

1.2.1試劑與儀器

游離T3、T4、TSH試劑盒為美國診斷試劑公司產品;血清甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）及血清甲狀腺微粒體抗體（TMAb）放免試劑盒為上海生物制品研究所產品;人血清TSH放免試劑盒為北京東免東雅生物技術研究所產品。離心機為德國賀利氏公司產品，型號Megafuge2R型;自動蛋白分析儀為美國貝克曼公司產品，型號Array360;放射免疫計數器為西安利亞公司產品，型號Cap-r16。

1.2.2檢測方法

對臨床患者均抽取空腹靜脈血進行離心處理，留取血清部分，置于-20℃下保存待測。采用標記抗原的固相放射免疫分析法（RIA法）對各患者血清樣本測定游離三碘甲腺原氨酸（FT3）和游離四碘甲腺原氨酸（FT4）水平，采用標記抗體的固相放射免疫分析法（IRMA法）進行促甲狀腺激素（TSH）水平的測定。根據測定結果，選取TSH不適當增高病例重復實施FT3與FT4水平檢測，以排除隨機誤差樣本。剩余血清樣本應用RIA法進行TSH水平的測定，如TSH水平有顯著下降，則采用速率散射比濁法檢測，以排除風濕因子的干擾。剩余樣本納入本組研究樣本。

取究樣本血清0.5 mL置入試管，加入牛、羊、鼠、豬的非免疫動物混合血清50μL，孵育至聚乙二醇（PEG）沉淀出現，應用IRMA法再次進行TSH水平的檢測。評價檢測結果，如TSH≥5 UIU/mL，且與患者臨床表現及RIA測定結果一致，則診斷為異嗜性抗體增多癥[4]。

1.2.3分組方法

根據檢測結果，將診斷為異嗜性抗體增多癥的6例病例納入研究組，包括男性4例，女性2例，平均年齡（43.6±11.8）歲，平均病程（9.2±4.8）個月;其余174例病例納入對照組，包括男性98例，女性76例，平均年齡（44.1±12.3）歲，平均病程（9.6±5.3）個月。兩組病例在年齡、性別及病程方面比較差異無統計學意義（Pgt;0.05），具有可比性。

1.3統計學處理

數據處理軟件為SAS12.0，組間數據比較采用t檢驗，當Plt;0.05時表示數據間差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 TSH水平測定結果比較

如表1所示，研究組RIA法測定TSH水平顯著低于IRMA法血清中和前檢測結果，同時也顯著低于對照組RIA法測定結果，數據間比較具有統計學差異（Plt;0.01）;IRMA法血清中和后TSH水平顯著低于血清中和前，同時顯著低于對照組血清中和后檢測結果，數據間比較具有統計學差異（Plt;0.01）。

2.2 FT3與FT4測定結果比較

如表2所示，兩組間RIA法測定FT3與FT4的結果比較無統計學差異，且血清中和前、后的FT3或FT4水平組內比較無統計學差異（Pgt;0.05）。

3 討論

FT3、FT4和TSH為臨床甲狀腺功能檢測的三項常見指標，對甲亢、甲減等甲狀腺功能異常的診斷具有重要的應用價值[5]。行甲狀腺功能檢測時，如存在抗體的干擾，很可能影響檢測數據，造成診斷結果的偏差或不真實，影響治療與預后。在甲狀腺功能檢測中可能起到干擾作用的抗體有多種，包括甲狀腺激素自身抗體、類風濕因子和異嗜性抗體。異嗜性抗體的產生機制目前尚不明確，是一種經由抗原刺激而產生的足夠滴度的特異性免疫球蛋白。已知異嗜性抗體具有較低的親和力，與多種不同種屬的免疫球蛋白均可發生弱交叉反應，以此來干擾TSH的免疫學檢測[6]。

異嗜性抗體的來源很多，比如接觸飼養寵物、進食污染食品、滅菌不完全的鮮奶、接種動物血清、接受免疫療法等。異嗜性抗體對甲狀腺功能檢測結果的影響作用主要通過對雙位點免疫分析的干擾而產生。IRMA法為雙位點夾心免疫分析法，由于異嗜性抗體具有與多種種屬動物免疫球蛋白弱結合的特征，因而此法可利用異嗜性抗體與標記抗體及包被抗體的結合，使TSH的檢測結果呈現假性增高，進而鑒別異嗜性抗體增多癥。對異嗜性抗體增多的血清樣本采用PEG沉淀法觀察抗原抗體復合物，有利于清除或減少異嗜性抗體在試驗過程中起到的干擾作用，從而提高診斷數據的準確性。本組研究結果表明，異嗜性抗體血清樣本采用RIA法檢測TSH水平有明顯異常，采用IRMA法血清中和后的檢測結果有明顯異常，證實FEG法具有一定排除干擾的作用。

由本組研究可見，對于IRMA法檢測TSH水平有不適當增高病例，應提高警惕，患者可能存在異嗜性抗體干擾，應進一步行RIA法測定，如結果有顯著下降，說明異嗜性抗體的存在風險更高，一般可采用FEG法進行最終診斷與確定。

參考文獻：

[1] 韋維，戴盛明. 異嗜性抗體在免疫測定中干擾的研究進展[J]. 國際檢驗醫學雜志，2010，31（10）：1123-1124.

[2] 劉曉民，王晶，徐巖松，等. 甲狀腺素自身抗體對甲狀腺素測定干擾作用的研究[J]. 中華內科雜志，2011，40（11）：771-772.

[3] 李金萬，李鈺，戴圣明. 內源性干擾對免疫分析的影響[J]. 國際醫學檢驗雜志，2010，10（10）：1167-1169.

[4] 蔣利君，黎宇，戴盛明. 異嗜性抗體對免疫測定干擾的研究進展[J]. 分子診斷與治療雜志，2010，2（1）：68-70.，

[5] 王焰，黃曉雪，馬莉，等. 異嗜性抗體對化學發光檢測結果的影響[J]. 貴陽醫學院學報，2013，38（1）：94-96.

[6] 馬榮. 低PH孵放法滅活生物制品中異嗜性小鼠白血病毒的方法學研究[D]. 中國中醫科學院博士學位論文，2013：78-88.