Su11248對(duì)人重組P450同工酶的體外抑制實(shí)驗(yàn)研究

摘要：目的 通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)探討SU-11248對(duì)CYP3A4、CYP2C9和CYP2D6酶活性的影響， 為其在臨床與其他藥物的聯(lián)合應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論指導(dǎo)。方法 采用BD公司的人重組P450酶抑制劑篩選試劑盒，測(cè)定Su11248對(duì)上述三種P450同工酶的體外活性抑制50%的藥物濃度（IC50）。結(jié)果 SU-11248對(duì)CYP3A4的IC50=11.85μM，對(duì)CYP2C9的IC50=7.74μM，對(duì)CYP2D6的IC50>50μM。結(jié)論 Su11248對(duì)CYP2C9酶活性有中等程度的抑制作用，對(duì)CYP3A4和CYP2D6酶活性無(wú)明顯抑制作用。

關(guān)鍵詞：Su11248；重組酶；細(xì)胞色素P450同工酶；藥物-藥物相互作用

Su11248是一種新型多靶向性的治療腫瘤的口服藥物，能選擇性地靶向某些蛋白的受體，臨床上主要用于治療晚期腎細(xì)胞癌、肺癌和腦膜瘤等，是目前腫瘤化療研究的熱點(diǎn)藥物之一[1～3]。本實(shí)驗(yàn)利用人重組CYP450酶，在體外水平上研究Su11258對(duì)CYP3A4、CYP2C9和CYP2D6活性的影響，為Su11248在臨床應(yīng)用中可能出現(xiàn)的藥物-藥物相互作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論指導(dǎo)。

1資料與方法

1.1一般資料 Su11248（購(gòu)自biocompound公司），用二甲亞砜（DMSO）溶解， -20℃避光保存?zhèn)溆谩Ｈ酥亟MCYP3A4、CYP2C9和CYP2D6酶抑制劑篩選試劑盒（購(gòu)自BD公司），-80℃避光保存?zhèn)溆谩ioTek檢測(cè)系統(tǒng)（SYNERCYTM4）。

1.2方法

1.2.1酶促反應(yīng)體系 反應(yīng)體系由NADPH 發(fā)生系統(tǒng)（NADP+、 Glucose-6-Phosphate、 Magnesium Chloride Hexahydrate）、KPO4（pH 7.4）、Tris （pH 7.5）、陽(yáng)性對(duì)照和底物組成。CYP3A4的底物為7-甲氧基-4-三氟甲基香豆素（7-Benzyloxy-4-trifluoromethylcoumarin ，BFC），CYP2C9的底物為3H-1，2-二氫-2-（4-甲基苯胺基）甲基-1-吡咯里嗪酮（3H-1，2-dihydro-2-（4-methyl-phenylamino） methyl-1-pyrrolizinone ，SFZ），CYP2D6的底物為3-[2-（N，N-二乙基-N-甲氨基）乙基]-7-甲氧基-4-甲基香豆素（3-[2-（N，N-diethyl-N-methylamino）ethyl]-7-methoxy-4-methylcoumarin，AMMC）右美沙芬。三種酶的陽(yáng)性化合物分別為酮康唑（CYP3A4）、磺胺苯吡唑（CYP2C9）和奎尼丁（CYP2D6）。Su11248的實(shí)驗(yàn)濃度最大值為50μM，按照3：1濃度稀釋得到8個(gè)濃度組，分別為50μM、16.67μM、5.56μM、1.85μM、0.62μM、0.21μM、0.07μM和0.02μM，每個(gè)濃度設(shè)置3復(fù)孔。

1.2.2 IC50值測(cè)定：按照BD公司的人重組P450酶抑制劑篩選試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。其中，CYP3A4和CYP2C9的檢測(cè)波長(zhǎng)為（400nm/528nm），CYP2D6 的檢測(cè)波長(zhǎng)為400nm/460nm。……