補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)急性心肌缺血模型大鼠的保護(hù)作用

摘要：目的 研究補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)急性心肌缺血模型大鼠的保護(hù)作用并探討其機(jī)制。方法 將大鼠分為空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照組（復(fù)方丹參滴丸0.135g/kg），補(bǔ)陽(yáng)還五湯高、中、低劑量組（44g生藥/kg、22g生藥/kg、11g生藥/kg）。連續(xù)灌胃給藥7d，末次給藥1h后灌胃給予垂體后葉素（25u/kg）以造成大鼠急性心肌缺血模型，觀察大鼠各時(shí)間點(diǎn)心電圖變化，生化法檢測(cè)血清肌酸激酶（CK）和乳酸脫氫酶LDH的活性。結(jié)果 補(bǔ)陽(yáng)還五湯高、中劑量組大鼠心電圖ST段抬高減少，血清LDH、CK的活性較模型組顯著降低（P<0.01）。結(jié)論 補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)大鼠急性血心肌缺血具有保護(hù)作用。其機(jī)制為抑制模型大鼠心電圖的改變并調(diào)節(jié)酶活性，改善冠脈循環(huán)，保護(hù)缺血心肌。

關(guān)鍵詞：補(bǔ)陽(yáng)還五湯；心肌缺血；垂體后葉素；心電圖；血清肌酸激酶；乳酸脫氫酶

心血管疾病主要由心肌需氧與供氧失衡所致，如冠心病就是一種常見(jiàn)的心血管疾病。所以尋找到價(jià)廉并且安全可靠的藥物，應(yīng)用于臨床來(lái)防治心肌缺血將具有很大的價(jià)值和深遠(yuǎn)的意義[1]。據(jù)報(bào)道，氣虛血瘀痰阻是缺血性冠心病的主要病因，而補(bǔ)陽(yáng)還五湯則是益氣活血的代表方，補(bǔ)陽(yáng)還五湯是通過(guò)補(bǔ)氣化瘀來(lái)治療冠心病和中風(fēng)，有研究表明，補(bǔ)陽(yáng)還五湯能通過(guò)抗氧化途徑來(lái)改善大鼠的心肌缺血病機(jī)[2，3]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)補(bǔ)陽(yáng)還五湯的抗心肌缺血作用進(jìn)行研究，并探討其作用機(jī)制，為尋找到安全可靠地藥物提取參考，并為臨床用藥提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1試驗(yàn)藥物及試劑 垂體后葉素注射液（南京新百藥業(yè)有限公司，批號(hào)：130801）；復(fù)方丹參滴丸（天津天士力制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z10950111）；黃芪、當(dāng)歸、川芎、赤芍、地龍、桃仁、紅花等藥材購(gòu)自北京同仁堂長(zhǎng)沙藥店，按《醫(yī)林改錯(cuò)》原方比例：生黃芪120g，地龍、桃仁、紅花、川芎各3g，當(dāng)歸尾6g，赤芍4.5g。將上述藥材先用清水煎煮2次，并合并2次煎煮液，減壓、濃縮至2g/mL（相當(dāng)于生藥量），-4℃冰箱保存，備用。

肌酸激酶（CK）試劑盒（批號(hào)130122），乳酸脫氫酶（批號(hào)130122）試劑盒，從南京建成生物研究所購(gòu)買。

1.2試驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)Wistar大鼠，體重（180g±20）g，雌雄各50%，48只，購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。

1.3儀器 BL-420E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（成都泰盟科技）；CENI1 RIFUE 80-2B型低速離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；XD-7100心電圖儀（上海醫(yī)療電子儀器廠）；7150型自動(dòng)生化分析儀（日本日立有限公司產(chǎn)品）。

1.4方法

1.4.1急性心肌缺血模型的建立及分組、給藥 取大鼠48只，隨機(jī)分為6組，每組8只，分別為空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照組（復(fù)方丹參滴丸0.135g/kg），補(bǔ)陽(yáng)還五湯高劑量組（44g生藥/kg）、補(bǔ)陽(yáng)還五湯中劑量組（22g生藥/kg）、補(bǔ)陽(yáng)還五湯低劑量組（11g生藥/kg）。空白組與模型組灌服同體積0.9%生理鹽水。所有分組灌胃1次/d，連續(xù)7d，除空白對(duì)照組外，其他組分在末次給藥后1h，均灌胃給予垂體后葉素（25u/kg），建立急性心肌缺血模型。

1.4.2指標(biāo)檢測(cè)

1.4.2.1心電圖的測(cè)定 給予垂體后葉素后，用3% 戊巴比妥鈉（1ml/kg）麻醉正常對(duì)照組大鼠，仰臥位固定，接BL-420E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，即刻測(cè)定0、0.5、1、2、3和5h若干時(shí)間點(diǎn)心電圖。

1.4.2.2血清LDH、CK活性測(cè)定 腹主動(dòng)脈取血，收集血液，靜置30min后，3500r，離心20min，取血清，按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理。以P<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著。

2 結(jié)果

見(jiàn)表1、圖1。

圖1 補(bǔ)陽(yáng)還五湯提取物對(duì)大鼠心電圖ST段的影響

由表1和圖1可見(jiàn)，急性心肌缺血模型造模成功后ST段明顯抬高，補(bǔ)陽(yáng)還五湯高、中劑量組能使心肌缺血模型大鼠的心電圖ST段抬高值降低，與模型組比有顯著性差異，表明補(bǔ)陽(yáng)還五湯提對(duì)急性心肌缺血模型大鼠的心電圖有改善作用。

3 討論

酶學(xué)法是估計(jì)心肌缺血損傷程度和范圍的一個(gè)重要方法。在正常心肌細(xì)胞中LDH和CK含量都較高，當(dāng)心肌缺血受損時(shí)，血清肌酸激酶（CK）和乳酸脫氫酶（LDH）會(huì)釋放進(jìn)入血中，加重對(duì)心肌的損傷，CK和LDH是診斷早期心肌受損比較好的指標(biāo)[4]。當(dāng)心肌受損時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶被釋放出來(lái)，擴(kuò)散進(jìn)入血漿，這時(shí)測(cè)定相關(guān)血清酶的活性，能反映缺血心肌的病變。血清中CK的活性是心肌細(xì)胞損傷程度的敏感指標(biāo)之一，它與心肌壞死程度是正相關(guān)的關(guān)系。CK在心肌中廣泛存在，當(dāng)心肌細(xì)胞受損時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的CK會(huì)減少釋放，血清中的CK含量會(huì)增加，這個(gè)過(guò)程反映了心肌損傷的情況。

在用垂體后葉素給大鼠造成心肌缺血模型后，模型組大鼠血清中的LDH、CK活性明顯升高，這說(shuō)明大鼠心肌受到了損傷，心肌細(xì)胞內(nèi)酶的釋放增加，大鼠造模成功。陽(yáng)性藥復(fù)方丹參滴丸組、補(bǔ)陽(yáng)還五湯高、中劑量組都能抑制LDH、CK的升高，而且補(bǔ)陽(yáng)還五湯高劑量組和陽(yáng)性藥組均能抑制ST段抬高，對(duì)心肌缺血具有保護(hù)作用。

補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療大鼠急性心肌缺血的作用機(jī)制可能是與補(bǔ)陽(yáng)還五湯提取物減小冠脈阻力，增加冠脈流量，提高血液供應(yīng)有關(guān)。

參考文獻(xiàn)：

[1]雷燕.碩士論文《\"瓜蔞-薤白\"藥對(duì)大鼠抗急性心肌缺血的保護(hù)作用的研究》[D].湖北中醫(yī)藥大學(xué)，2013.

[2]馮其茂，董耀榮，楊祖福.益氣活血方對(duì)急性心肌梗死后左室重構(gòu)的干預(yù)[J].中國(guó)康復(fù)理論與實(shí)踐，2006，12（6）：475-477.

[3]許篤聰，羅演錚，劉憲俊，等.補(bǔ)氣活血化痰方治療動(dòng)脈粥樣硬化的實(shí)驗(yàn)研究[J].福建中醫(yī)藥，2003，34（5）：46-48.

[4]吳兆蘇，姚崇華，趙冬，等.我國(guó)多省市心血管病趨勢(shì)及決定因素的人群監(jiān)測(cè)（中國(guó)MONICA方案）發(fā)病率和死亡率監(jiān)測(cè)結(jié)果[J].中華心血管病雜志，1997，25（1）：6-11.

編輯/哈濤