細胞周期調控相關蛋白CDK4、CDK6在子宮內膜樣腺癌中的表達與臨床意義

【摘要】目的探討細胞周期調控相關蛋白CDK4、CDK6在子宮內膜樣腺癌中的表達、相互關系與臨床意義。方法應用免疫組織化學，檢測50例子宮內膜樣腺癌及50例不典型增生子宮內膜及50例子宮內膜增生和40例正常子宮內膜中的CDK4、CDK6蛋白的表達情況。結果CDK4與CDK6的陽性表達在正常子宮內膜、子宮內膜增生、非典型增生子宮內膜和子宮內膜樣腺癌中依次增加，組間差異具有統計學意義（P<0.05），與子宮內膜樣腺癌的分化程度，Dukes分期及淋巴結轉移呈正相關關系（P<0.05）。結論CDK4與CDK6蛋白的高表達可能在子宮內膜樣腺癌的發生、發展、浸潤及轉移中起一定作用，對臨床判斷子宮內膜樣腺癌的惡性程度和預后具有一定的意義，還可能作為一種有價值的腫瘤標志物。

【關鍵詞】子宮內膜樣腺癌CDK4；CDK6；免疫組織化學

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.05.029文章編號：1004-7484（2014）-05-2428-02

1資料與方法

1.1資料

1.1.1組織標本選取2005年1月——2012年6月中山大學附屬第五醫院病理科保存的資料完整的手術標本，經常規病理證實，術前未做任何激素替代治療及放、化療等治療，病理診斷及分類參照WHO的分類標準。其中子宮內膜樣腺癌組50例，年齡（52.8±6.5）；非典型增生子宮內膜組50例（輕-中度30例，重度20例），年齡（47.9±5.3）；子宮內膜增生組50例（復雜性20例，單純性20例），年齡（44.5±4.6）；另取同期因其他原因行子宮切除術的正常子宮內膜組40例作為對照組，年齡（48.2±4.3）。

1.1.2主要試劑CDK4單克隆抗體、CDK6單克隆抗體、SP試劑盒及DAB顯色試劑盒均購武漢博士德公司，其中SP試劑盒為即用型，其余濃縮型抗體稀釋度均為1：50。

1.2方法

1.2.1實驗方法免疫組織化學染色采用標準化的SP法，按試劑盒說明書所示步驟進行操作，用PBS液代替一抗作為陰性對照，用已知陽性的結腸癌組織為陽性對照。

1.2.2結果判斷CDK4、CDK6陽性表達信號為細胞核內出現棕黃色顆粒。參照Fromowitz方法，兩名病理醫生每張片隨機抽取20個高倍視野，按陽性細胞所占百分比并參考著色強度分級如下：①著色范圍：無著色為0，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；②陽性范圍：<5%為0分，5%-25%為1分，26%-50%為2分，51%-70%為3分，>70%為4分。兩項結果相加<2分為陰性（-），2-3分為弱陽性（+），4-5分為中度陽性（++），6-7分為強陽性（+++）。

1.2.3統計學分析所有數據采用χ2檢驗及相關性分析，用SPSSl3.0軟件包，P<0.05有統計學意義。

2結果

2.1CDK4、CDK6在子宮內膜中的表達CDK4、CDK6在子宮內膜樣腺癌組中的陽性率分別為72.0%（36/50）、68.0%（34/50），從正常、內膜增生、非典型性增生至子宮內膜樣腺癌，CDK4、CDK6蛋白的陽性表達呈逐漸上升，組間差異具有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2子宮內膜樣腺癌中CDK4、CDK6的表達與臨床病理學特征的關系CDK4、CDK6在子宮內膜樣腺癌中的高表達與子宮內膜樣腺癌的分化程度、淋巴結轉移、Dukes分期等病理因素相關，見表2。

3討論

CDK6蛋白也是CDKs蛋白家族中的核心成員，并參與多種腫瘤細胞的分化[2]，有研究表明CDK6蛋白的過度表達，與細胞異常增殖、腫瘤的發生和轉移、浸潤密切相關。有學者通過反義核酸技術在轉錄和翻譯水平上阻斷CDK6在異常增殖細胞中的異常表達，最終導致異常細胞表型的逆轉或凋亡。在人類多種腫瘤中有過表達，表明CDK6參與腫瘤的發生、發展，并與腫瘤的組織學分型、淋巴結轉移、臨床分期和預后有關。有研究表明CDK6蛋白高表達涉及了子宮內膜樣腺癌的發生、發展過程。多因素分析的結果顯示，CDK6缺失并不影響正常細胞增殖，提示CDK6有可能成為預測腫瘤預后的指標和輔助治療的新靶點，可以作為很好的治療癌癥的靶點

本組的研究結果顯示，在正常子宮內膜、子宮內膜增生、非典型增生、子宮內膜樣腺癌中，CDK4、CDK6蛋白的陽性表達呈上升趨勢，在非典型增生組和子宮內膜樣腺癌中陽性表達均顯著高于正常組和增生組（P<0.05），這與內膜增生—內膜非典型增生—子宮內膜樣腺癌疾病的自然進展演變過程相一致，提示CDK4、CDK6與子宮內膜樣腺癌的病程進展有關，并與子宮內膜樣腺癌的分化程度、淋巴結轉移及臨床分期呈正相關，表明細胞周期正性調控因子CDK4、CDK6蛋白高表達所致的G1期調控異常涉及了子宮內膜樣腺癌的發生、發展過程。

CDK4、CDK6的高表達導致細胞異常增殖不僅涉及子宮內膜樣腺癌的起始階段，并使癌組織具有更強的侵襲、轉移和復發能力。在子宮內膜非典型增生和癌組中檢測CDK4和CDK6蛋白，可作為臨床早期診斷和科學評價腫瘤預后、指導臨床治療的指標，二者將能為子宮內膜樣腺癌的基因治療提供新途徑。

參考文獻

[1]車力凡，孫鈺，邵素芳.CDK4、PTEN蛋白與子宮內膜癌浸潤轉移的關系[J].當代醫學，2010，16（24）：18-20.

[2]朱紅琴.周期蛋白依賴性激酶6與腫瘤和細胞分化[J].生命的化學，2009，28（1）：52.