CD56、CD54在甲狀腺病變中的表達及意義

高 白，解 娜，薛逢貴，譚 穎，李 雪

（1.海南醫學院檢驗醫學系，海南 海口 571199；2.海南醫學院病理學教研室海南醫學院附屬醫院病理科，海南 海口 570102）

CD56、CD54在甲狀腺病變中的表達及意義

高 白1，解 娜2，薛逢貴2，譚 穎1，李 雪1

（1.海南醫學院檢驗醫學系，海南 海口 571199；2.海南醫學院病理學教研室海南醫學院附屬醫院病理科，海南 海口 570102）

目的檢測CD56、CD54在甲狀腺病變組織中的表達情況，探討CD56、CD54的表達在甲狀腺病變鑒別診斷中的作用。方法分別收集海南醫學院附屬醫院病理科73例甲狀腺乳頭狀癌、64例良性病變組織蠟塊。將137例石蠟標本制做組織芯片。應用免疫組織化學技術檢測CD56、CD54蛋白在甲狀腺病變組織中的表達情況。結果CD56在甲狀腺乳頭狀癌組織中大多表達缺失，表達率為14%，在良性甲狀腺病變組織中表達率高(92.2%)，兩者間表達率差異具有顯著統計學意義(P＜0.01)。CD54在甲狀腺乳頭狀癌及橋本氏甲狀腺炎組織中表達增高(69.9%vs 75.0%)，呈彌漫陽性表達，這兩組間表達差異無統計學意義(P＞0.05)；在其他良性甲狀腺組織包括結節性甲狀腺腫和濾泡性腺瘤中，CD54表達較低(3.8%)，主要呈散在弱陽性表達，與甲狀腺乳頭狀癌組織相比，其表達差異具有顯著統計學意義(P＜0.01)。結論CD56在甲狀腺乳頭狀癌中表達缺失，在甲狀腺良性病變組織中表達增高；CD54在甲狀腺乳頭狀癌及橋本氏甲狀腺炎中高表達，聯合檢測CD56、CD54對甲狀腺病變的鑒別診斷具有重要作用。

甲狀腺乳頭狀癌；CD56；CD54；組織芯片

甲狀腺乳頭狀癌(Papillary thyroid carcinoma，PTC)是甲狀腺惡性腫瘤中最常見的組織學類型，與乳頭狀良性增生、濾泡腺瘤鑒別有時較為困難，部分橋本氏甲狀腺炎常合并有甲狀腺乳頭狀癌，因而探索開發能應用于甲狀腺癌鑒別診斷的標記物至關重要。

CD56又稱為神經細胞粘附分子(NCAM)，多數研究認為CD56在PTC中表達缺失，具有一定的鑒別診斷意義[1-4]，然而也有報道認為CD56在甲狀腺乳頭狀癌中也存在較高的表達率，其鑒別診斷意義不明確[5-6]。CD54即細胞間粘附分子1(ICAM-1)，與CD56同屬于粘附分子免疫球蛋白超家族成員，近來有學者發現其在甲狀腺乳頭狀癌組織中高表達[7]，其結果尚需進一步證實。據此，我們擴大病例量，聯合檢測CD56、CD54，觀察其在甲狀腺病變中的表達情況，以明確CD56、CD54抗體在甲狀腺病變中的鑒別診斷作用。

1 材料與方法

1.1 材料 分別收集海南醫學院附屬醫院病理科檔存蠟塊137例，包括73例甲狀腺乳頭狀癌、28例結節性甲狀腺腫(含17例甲狀腺乳頭狀良性增生)、24例腺瘤、12例橋本氏甲狀腺炎組織蠟塊。甲狀腺乳頭狀癌組織材料中女性56例，男性17例，患者年齡21～74歲，≥45歲者34例，＜45歲者39例，平均32歲。其他病變中女性51例，男性13例，患者年齡13～86歲，≥45歲者39例，＜45歲者26例，平均37歲。所有病例均經病理確診，顯微鏡下選擇有代表性的區域進行標記、取材、制作芯片。

1.2 試劑與方法 小鼠CD56、CD54單克隆抗體，PV-9000通用型二步法免疫組化檢測試劑盒，3，3-二氨基聯苯胺(DAB)顯色液，均為北京中山生物有限公司產品。常規免疫組化兩步法染色，每次染色均設有陽性對照、空白對照。陽性對照以已知陽性的甲狀腺病變標本為陽性對照，空白對照用PBS代替一抗作為空白對照。

根據實驗研究的目的和需要，受體蠟塊設計為18×12點陣。光鏡下選擇HE標本中適宜的樣本位置，對照相應的供體蠟塊，每個標本取兩點。把各組樣本的點陣按順序排放，設陣列孔的左上方第一排第一個孔為空白標記，以免混淆方向。137個蠟塊制作成兩個組織芯片。免疫組化及組織芯片制作具體操作步驟見應用文獻[8]。

1.3 統計學方法 所有統計均由SPSS18.0統計軟件完成。所有免疫組化陽性判定以記數資料進行四表格χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CD56在甲狀腺病變中的表達情況 CD56在甲狀腺乳頭狀癌及濾泡腺癌組織中大部分表達陰性，僅個別病例弱陽性表達(14%，10/73)。在其他良性甲狀腺組織中表達率高，彌漫強陽性(92.2%，59/64)。 CD56在甲狀腺腺癌與甲狀腺其他良性病變中的表達率比較差異具有顯著統計學意義(P＜0.01)，見表1和圖1。

2.2 CD54在甲狀腺病變中的表達情況 CD54在絕大部分甲狀腺乳頭狀癌中強陽性表達(69.9%，51/73)，在橋本氏甲狀腺炎中也存在較高的陽性表達(75.0%，9/12)，而在其他甲狀腺良性病變中表達率相對較低，如結節性甲狀腺腫中未見明確表達(0，0/28)，僅在個別腺瘤組織中有少許散在弱陽性的表達(8.3%，2/24)。CD54在甲狀腺乳頭狀癌與結節性甲狀腺腫、濾泡性腺瘤中的表達差異有統計學意義(69.9%vs 3.8%，P＜0.01)。CD54在甲狀腺乳頭狀癌與橋本氏甲狀腺炎中的表達差異無統計學意義(69.9% vs 75.0%，P＞0.05)，見表1和圖1。

2.3 CD56、CD54蛋白在同一甲狀腺病變組織中的表達情況 甲狀腺乳頭狀癌病變中CD56、CD54的表達模式主要為CD56-/CD54+(49/73，67.1%)，而結節性甲狀腺腫、濾泡性腺瘤及橋本氏甲狀腺炎中不存在這種表達模式，這種組合性表達在甲狀腺乳頭狀癌與良性病變中差異有顯著統計學意義(P＜0.01)，見圖1。

表1 CD56、CD54在各種甲狀腺組織中的表達情況（例）

圖1 CD56、CD54在甲狀腺病變中的表達（SP法）

3 討論

甲狀腺乳頭狀癌是頭頸部常見的一個惡性腫瘤，典型的形態學易于診斷，但在部分甲狀腺病變中可以見到假乳頭或乳頭狀增生、帶有毛玻璃樣核改變的腺瘤樣增生結節，形態學上與甲狀腺乳頭狀癌常難以區別；而良、惡性甲狀腺疾病的誤診將造成患者治療、精神上的巨大損失，因而尋找甲狀腺良、惡性病變的鑒別標記物具有重要的意義。

CD56又稱為神經細胞粘附分子(NCAM)，屬于免疫球蛋白超家族，正常表達于神經元、星形細胞和自然殺傷細胞等[2]。在多種腫瘤，如神經內分泌腫瘤、NK/T細胞淋巴瘤、骨髓瘤等腫瘤中表達。有研究顯示，CD56在甲狀腺良性增生病變中表達增高，但在甲狀腺乳頭狀癌中存在失表達的現象，可能與甲狀腺癌轉移潛能和預后差相關。進一步的研究表明CD56的失表達可作為甲狀腺乳頭狀癌的鑒別診斷要點[3-4]，但也有學者持相反的意見[5-6]。

CD54即細胞間粘附分子(ICAM-1)，也是免疫球蛋白超家族中的一個成員，它可與整合素家族成員結合，參與炎癥、變態反應等促進炎癥的發生與發展。甲狀腺病變中，橋本氏甲狀腺炎(HT)被認為是一種自身免疫性疾病，多數報道認為HT的濾泡細胞上有CD54的較高水平表達[9-10]；近來也有學者指出CD54在浸潤性PTC中存在一定的高表達率[7]，能否作為獨立的預后因素及診斷依據尚需更多的數據支持。

為確認CD56、CD54在甲狀腺病變診斷中的作用，我們收集了137例甲狀腺病變組織，含73例甲狀腺乳頭狀癌組織，以保證樣本數量的統計學意義。采用組織芯片技術預防組織標本處理的不一致性，多批次重復實驗結果。

與常規組織切片相比，組織芯片(Tissue chip)具有以下特點：①同時對多個樣品進行分析，不僅提高工作效率，還節省大量的材料和試劑；②在同一張芯片上同時對不同的材料進行檢測，避免因檢驗時間的先后及其他人為因素而造成的誤差，極大地改善了實驗條件的同質性，從而提高檢測結果的可比性；③設計的靈活性大，既可將不同組織的標本列陣于同一塊芯片上，也可將同種組織不同病理階段的標本列陣在同一塊芯片上。

我們的實驗結果發現，CD56在73例PTC的僅小部分病例存在陽性表達，且陽性表達部位位于癌組織與正常組織交界處。癌旁良性甲狀腺組織、HT、FA等良性病變CD56多呈彌漫陽性表達，且表達率高，結果與文獻報道基本一致。CD54在大多數甲狀腺乳頭狀癌中呈現彌漫強陽性表達，橋本氏甲狀腺炎中也有較高的表達率，但在PTC與HT間CD54的表達率無顯著差異，而在結節性甲狀腺腫、腺瘤中幾乎無陽性表達。

形態學不典型病變中采用單個抗體的表達來鑒別診斷存在較大的風險，而采用抗體套餐的方法可降低此種風險。本研究發現中，在甲狀腺PTC中CD56表達缺失、CD54表達增高的病例有49例(49/73，67.1%)，良性病變不存在這中組合表達模式(P＜0.01)。

總之，CD56在甲狀腺乳頭狀癌組織中表達缺失，CD54在甲狀腺乳頭狀癌中表達增高，聯合應用CD56、CD54對甲狀腺良惡性病變診斷的鑒別具有重要作用。

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Expressions of CD56and CD54in thyroid diseases tissues.

GAO Bai1,XIE Na2,XUE Feng-gui2,TAN Ying1,LI Xue1.

1.Department of Laboratory Medicine,Hainan Medical University,Haikou 571159,Hainan,CHINA;2.Department of Pathology,Hainan Medical University,the Affiliated Hospital of Hainan Medical University,Haikou 570102,Hainan,CHINA

ObjectiveTo detect the expression levels of CD56and CD54in different thyroid lesions,and discuss the application of CD56and CD54in the differential diagnosis of thyroid lesions.MethodsParaffin samples including 73 cases of papillary thyroid carcinoma(PTC)and 64 cases of thyroid benign hyperplasia tissues from pathology department of Hainan medical college affiliated hospital were collected to be made as tissue chips.And then immunohistochemical techniques were applied to detect the expression levels of CD56and CD54in thyroid lesions.ResultsThe expression level of CD56in benign tissue was higher than that in PTC(92.2%vs 14%,P＜0.01).Compared with the groups of nodular goiter and follicular adenoma,the CD56positive expression rate in PTC was higher with a significant difference(69.9%vs 3.8%,P＜0.01).However,there was no difference in the positive expression rate of CD56between PTC and Hashimoto's thyroiditis(69.9%and 75.0%,P＞0.05).ConclusionWith lower expression of CD56in PTC rather than in benign tumor and higher expression of CD54in PTC and Hashimoto's thyroiditis,the combined detection of CD56and CD54might contribute to differential diagnosis of the thyroid diseases.

Papillary thyroid carcinoma;CD56;CD54;Tissue Chip

R581

A

1003—6350（2014）24—3720—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.24.1449

2014-06-03)

海南省自然科學基金(編號：811206)；海南醫學院大學生創新性實驗項目(編號：201105)

解 娜。E-mail：68001358@qq.com