肝癌衍生生長因子在胃腺癌組織中的表達及意義

李惠芬，馬桂芳，宋祥和

（鹽城衛生職業技術學院，江蘇 鹽城 224001）

·論著·

肝癌衍生生長因子在胃腺癌組織中的表達及意義

李惠芬，馬桂芳，宋祥和

（鹽城衛生職業技術學院，江蘇 鹽城 224001）

目的探討肝癌衍生生長因子（HDGF）在胃腺癌發生、發展及轉移中的作用。方法運用免疫組織化學S-P方法檢測32例正常胃上皮組織、60例胃腺癌組織中HDGF的表達，同時檢測血管內皮生長因子（VEGF）在胃腺癌組織中的表達。采用χ2檢驗比較HGDF在兩種組織中的表達，分析HDGF表達與胃腺癌臨床病理學因素和VEGF的關系。結果胃腺癌組織中HDGF的陽性表達率為68.3%，正常胃上皮組織中HDGF的陽性表達率為25.0%，兩者差異有統計學意義（χ2=15.752，P<0.01）；HDGF表達與胃腺癌組織的浸潤程度（χ2=6.459，P=0.011）和淋巴結轉移有關（χ2=5.844，P=0.016）；HDGF與VEGF表達呈正相關。結論HDGF在胃腺癌組織中的表達顯著高于在正常胃上皮組織中的表達，與胃腺癌浸潤程度和淋巴結轉移密切相關，與VEGF表達呈正相關，提示HDGF在胃腺癌的發生、發展及轉移中具有重要作用。

胃腺癌；HDGF；VEGF

在我國，胃癌的死亡率居常見惡性腫瘤之首[1]，而胃腺癌是胃癌最常見的一種，發生率占胃癌的95%[2]，死亡率占胃癌的14%，居各類癌癥死亡率首位[3]。Nakamura等于1994年從人肝癌細胞系HuH-7培養液中成功分離出一種新的生長因子并命名為肝癌衍生生長因子(Hepatoma-derived growth factor，HDGF)，國內外一系列研究結果顯示HDGF可能是一個普遍的腫瘤相關因子，在多種腫瘤組織如肝癌、非小細胞肺癌、結腸癌中高表達，研究認為HDGF具有促進細胞增殖和組織分化的作用，進而促進新生血管形成，與腫瘤的發生、發展以及轉移等密切相關[4-5]。然而目前對于HDGF的研究仍處于初級階段，本研究擬通過分析HDGF在胃腺癌組織和正常胃上皮組織中的表達、胃腺癌組織中HDGF表達與臨床病理學特征的關系、胃腺癌組織中HDGF和VEGF表達的關系來探討HDGF在胃腺癌發生、發展及轉移中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2012年3月至2013年9月鹽城市第一人民醫院病理科胃腺癌標本60例，所有標本均為手術切除，術前未經放療、化療，取同期正常胃上皮組織標本32例作為對照，并獲取患者的年齡、性別、臨床病理學相關指標。60例胃腺癌標本中男性41例，年齡39～78歲，女性19例，年齡41～77歲，其中未侵入漿膜24例，侵入漿膜36例；29例伴有淋巴結轉移。

1.2 試劑(1)兔抗HDGF：稀釋度1:100，北京博奧森生物技術有限公司產品；(2)鼠抗HDGF：稀釋度1:1000，福州邁新生物技術公司產品；(3)SP免疫組化試劑盒，福州邁新生物技術公司；(4)PBS磷酸鹽緩沖液，福州邁新生物技術公司；(5)DAB顯色液，福州邁新生物技術公司。

1.3 方法采用免疫組化S-P法。步驟如下：石蠟切片60°溫箱烘烤5 min；二甲苯脫蠟2次，每次10 min，梯度酒精脫水；PSB沖洗3次，每次3 min；內源性過氧化酶阻斷10 min；高壓組織抗原修復；滴加一抗，4℃孵育過夜；二抗室溫孵育45 min；鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化物酶室溫孵育45 min；DAB顯色5～10 min；蘇木素復染；脫水、透明、封固后光鏡下觀察。

1.4 結果判定采用雙盲法由兩名病理科醫生判讀。參閱相關文獻[6]，若胞核內出現棕黃色顆粒，為HDGF表達陽性染色，高倍鏡下(×400)觀察，每一張均切片隨機選擇50個視野，每個視野下讀取200個細胞，將≥90%的腫瘤細胞的胞漿和胞核染色均強于或等于血管內皮細胞則判斷為陽性表達，否則為陰性表達。參閱相關文獻[7]，若胞漿內出現棕黃色顆粒，為VEGF表達陽性染色，高倍鏡下(×400)觀察，每一張切片均隨機選擇5個視野，每個視野下讀取200個細胞，陽性細胞占比高于25%為陽性表達，否則為陰性表達。

1.5 統計學方法應用SPSS13.0軟件進行數據統計分析，采用χ2檢驗分析HDGF在兩種組織中表達的比較、HDGF與胃腺癌臨床病理學特征的關系、胃腺癌組織中HDGF與VEGF表達的關系，均以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 胃腺癌組織和正常胃上皮組織中HDGF的表達60例胃腺癌組織中，HDGF陽性表達41例，陰性表達19例，陽性表達率為68.3%，而32例正常胃上皮組織中陽性表達8例，陰性表達24例，陽性表達率為25.0%，兩者差異有統計學意義(χ2=15.752，P<0.01)。

2.2 胃腺癌組織中HDGF表達與臨床病理學因素的關系胃腺癌組織中，HDGF表達與浸潤程度(χ2= 6.459，P=0.011)和淋巴結轉移相關(χ2=5.844，P= 0.016)，浸潤程度越高HDGF陽性表達率越高，有淋巴結轉移者HDGF陽性表達率高于無淋巴結轉移者，而與性別、年齡、腫瘤部位及分化程度均無關(P> 0.05)，見表1。

表1 胃腺癌組織HDGF表達與臨床病理學因素的關系(例)

2.3胃腺癌組織中HDGF與VEGF表達的關系HDGF陽性表達的41例中，有33例VEGF為陽性表達(χ2=11.130，P<0.01)，列聯系數C=0.396，HDGF與VEGF表達呈正相關。

3 討論

HDGF表達在胃腺癌的發生、發展、轉移中有重要作用。Hu等[8]研究比較HDGF在肝癌組織與臨近正常肝組織中的表達，結果顯示HDGF在肝癌組織中的表達水平明顯高于正常肝組織。本研究以60例胃腺癌組織為研究組，32例正常胃上皮組織為對照組，采用免疫組化技術檢測兩種組織中HDGF的表達情況，結果顯示研究組的陽性表達為41例，陽性表達率為68.3%，顯著高于對照組陽性表達為8例，陽性表達率為25.0%，差異有統計學意義(χ2=15.752，P<0.01)，表明HDGF表達在胃腺癌的發生中可能有重要作用。有學者研究317例胃癌組織中HDGF的表達，結果發現HDGF的表達與胃癌的腫瘤大小、浸潤程度、淋巴結轉移以及無瘤生存期密切相關[9]。本研究對胃腺癌組織中HDGF的表達與臨床病理學特征的關系行卡方檢驗，結果顯示，HDGF表達與浸潤程度和淋巴結轉移密切相關，而與性別、年齡、腫瘤部位及分化程度無關，表明HDGF表達在胃腺癌的發展、轉移中有可能有重要作用。

研究表明VEGF主要通過刺激內皮細胞增殖和增加血管通透性的方式，在腫瘤的病理性血管發生和腫瘤的發展、轉移中起著重要作用[10]。Everett等[11]的研究結果顯示HDGF可能是通過誘導VEGF促進腫瘤血管的生成，進而促進腫瘤的生長，增加轉移的風險。目前已有研究顯示，HDGF與VEGF的表達在一些惡性腫瘤組織中呈正相關[5，12]。本研究結果顯示，在胃腺癌組織中HDGF與VEGF的表達呈正相關，在HDGF陽性表達的41例中有33例出現了VEGF的陽性表達，與文獻報道一致，提示HDGF通過誘導VEGF生成的方式可能是其影響胃腺癌發生、發展和轉移的機制之一，但具體的機制還有待進一步研究。

綜上所述，HDGF在胃腺癌組織中的表達顯著高于在正常胃上皮組織中的表達，與胃腺癌浸潤程度和淋巴結轉移密切相關，與VEGF表達呈正相關，提示HDGF在胃腺癌的發生、發展及轉移中具有重要作用。

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Expression and significance of hepatoma-derived growth factor in gastric adenocarcinoma.

LI Hui-fen,MA Gui-fang,SONG Xiang-he.Yancheng Institute of Health Sciences,Yancheng 224001,Jiangsu,CHINA

ObjectiveTo explore the effect of on occurence,development,and metastasis of gastric adenocarcinoma.MethodsBased on immunohistochemical S-P method,the expression of HDGF in gastric adenocarcinoma tissues of 60 cases and normal gastric epithelial tissues of 32 cases were detected,as with vascular endothelial growth factor(VEGF)in gastric adenocarcinoma tissues.Compared the expression of HDGF in both tissues and analyzed the relationship between HDGF and clinical pathology,VEGF.ResultsThe positive rate of HDGF in gastric adenocarcinoma tissues was 68.3%,significantly higher than 25.0%in normal gastric epithelial tissues(χ2=15.752,P<0.01).The expression of HDGF was significantly correlated to immersion degree(χ2=6.459,P=0.011)and lymph node metastasis (χ2=5.844,P=0.016).HDGF was positively correlated to VEGF.ConclusionHDGF in gastric adenocarcinoma tissues was greater than normal gastric epithelial tissues,as well as it was closely correlated to immersion degree,lymphnode metastasis and VEGF.HDGF may have great effect on occurence,development,and metastasis of gastric adenocarcinoma.

Gastric adenocarcinoma;Hepatoma-derived growth factor(HDGF);Vascular endothelial growth factor(VEGF)

R735

A

1003—6350（2014）07—0953—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.07.0370

2013-10-11)

李惠芬。E-mail：437835649@qq.com