利心丸質量標準的研究

王喜民 孫 文 吳 晶

（吉林省食品藥品認證和培訓中心，吉林 長春 130021）

利心丸質量標準的研究

王喜民 孫 文 吳 晶

（吉林省食品藥品認證和培訓中心，吉林 長春 130021）

目的 建立利心丸的質量控制方法。方法 用薄層色譜法對利心丸中的防己、牡丹皮進行了定性鑒別；用HPLC法對該藥品中的丹皮酚含量進行了測定。結果 薄層色譜鑒別斑點清晰，分離效果好，易于觀察識別；HPLC法測定牡丹皮中丹皮酚的含量的精密度與重現性良好，丹皮酚的進樣量在0.102～0.510 μg范圍內線性關系良好（r=0.99999），平均加樣回收率為99.1%，RSD=0.8%。結論 該方法可有效控制利心丸的產品質量。

利心丸；丹皮酚；高效液相色譜法

1 薄層色譜鑒別

1.1 儀器與試藥

利心丸（批號：060301、060302、060303）；對照品與對照藥材均來源于中國藥品生物制品檢定所。

1.2 方法與結果

1.2.1 防己的鑒別

稱取本品20 g，加硅藻土適量，研細，加濃氨試液1～2mL濕潤，加三氯甲烷50 mL，超聲處理（功率300 W，頻率50 kHz）15 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取粉防己堿與防己諾林堿對照品，加三氯甲烷制成每1 mL各含1 mg的混合溶液，作為對照品溶液。再取除防己的全部樣品成分，同法制成陰性對照溶液。用定量毛細管吸取對照品混合溶液5 μL、供試品溶液與陰性對照溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板（規格10 cm× 10 cm，厚度0.3 mm）上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇（6∶1∶1）為展開劑，上行展開，取出，晾干噴以稀碘化鉍鉀試液。結果顯示：在混合對照品色譜所顯斑點的位置上，供試品色譜均顯相同顏色的斑點，陰性則無。見圖1。

圖1 防己的薄層色譜圖（a、粉防己堿，b、防己諾林堿；1、2、3批號：060301、060302、060303；4、粉防己堿與防己諾林堿混合對照品；5、陰性對照）

1.2.2 牡丹皮的鑒別

稱取本品20 g，加硅藻土適量，研細，加乙醚80 mL，超聲處理（功率300 W，頻率50 kHz）20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取丹皮酚對照品，加丙酮制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。再取除牡丹皮的全部樣品成分，同法制成陰性對照溶液。用定量毛細管吸取上述兩種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板（規格10 cm×10 cm，厚度0.3 mm）上，以正己烷-乙酸乙酯（3∶1）為展開劑，上行展開，取出，晾干，噴以鹽酸酸性的5%三氯化鐵乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。在對照品色譜所顯斑點的位置上，供試品色譜顯相同顏色的斑點，陰性則無。見圖2。

圖2 牡丹皮的薄層色譜鑒別（1、2、3批號：060301、060302、060303；4：丹皮酚對照品；5：陰性對照）

2 含量測定

2.1 儀器與試藥

Agilent-1200型高效液相系統。丹皮酚對照品由中國藥品生物制品檢定所提供，批號0708-9704，供含量測定用。甲醇為優級純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

2.2 方法與結果

2.2.1 色譜條件

色譜柱：迪馬C18色譜柱（DiamnosilTMC18，250 mm×4.6 mm，5 μm）；甲醇-水（70∶30）為流動相；檢測波長為274 nm。理論板數按丹皮酚峰計算應不低于3000。

2.2.2 對照品溶液的制備

精密稱取丹皮酚對照品適量，加甲醇制成每1 mL含20 μg的溶液，即得。

2.2.3 供試品溶液的制備

取本品水蜜丸，研細，或取重量差異項下的大蜜丸，剪碎，取約1.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，室溫放置30 min，超聲處理（功率300 W，頻率50 kHz）30 min，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.2.4 陰性對照溶液的制備

取按處方比例制成的除去牡丹皮的陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液。

2.2.5 系統適用性試驗

分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液與陰性對照溶液各10 μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。結果陰性對照溶液在丹皮酚峰保留時間處無色譜峰，即處方中其他組分對測定無干擾。丹皮酚峰與其他組分峰基線分離，符合要求；對照品溶液與供試品溶液主峰的保留時間一致，理論板數板數按丹皮酚峰計算不低于3000。

2.2.6 線性關系考察

精密稱取丹皮酚對照品20.38 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并加該溶劑稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 μL、10 μL、15 μL、20 μL、25 μL，分別注入液相色譜儀，以進樣量（μg）為橫坐標（X），峰面積積分值為縱坐標（Y）繪制標準曲線，得回歸方程為Y=5103.6948X+0.3757（r=0.99999），表明進樣量在0.102～0.510 μg范圍內，與峰面積呈良好的線性關系。

2.2.7 精密度試驗

取本品（批號060301），照正文方法，連續進樣5次，每次10 μL，計算5個峰面積的RSD為0.8%，表明該方法的精密度較好。結果表明精密度良好。

2.2.8 重復性試驗

取本品（批號060301），照供試品溶液的制備方法，獨立測定6份，丹皮酚含量的RSD為0.9%，表明該方法重復性較好。

2.2.9 穩定性試驗

取同一供試品（批號：060301）溶液，在制備后的0 h、30 h、48 h、72 h，分別測得峰面積，4個時間點測得峰面積的RSD為0.2%，表明在72 h內穩定。

2.2.10 回收率試驗

精密稱取已知含量的本品（批號：060303，含丹皮酚0.63 mg/g）細粉約0.75 g，6份做基底，再分別精密加入丹皮酚對照品溶液（0.02166 mg/mL）10 mL、11 mL、12 mL各2份，制成供試品溶液，測定丹皮酚的含量，計算回收率，得平均回收率為99.1%，RSD為0.8%，該方法的準確度較好。

2.2.11 樣品測定結果及限度

三批樣品中丹皮酚含量測定結果分別為0.64、0.63、0.63 mg/g。綜合考慮牡丹皮藥材質量標準[1]中含量的限度，藥材產地等的質量不確定性及生產工藝的波動性因素，將本品的含量限度定為每1 g含牡丹皮以丹皮酚（C9H10O3）計，不得少于0.40 mg。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典(一部)[S].2005年版.北京:北京化學工業出版社,2005:119.

R9

B

1671-8194（2014）18-0088-02