脈君安膠囊中氫氯噻嗪的溶出度研究

2014-05-13 09:55:38李博然黃志軍向陽陳鵬徐紹新翟莉

醫藥導報 2014年1期

李博然，黃志軍，，向陽，陳鵬，徐紹新，翟莉

(1.武漢理工大學化學工程學院，武漢 430070；2.武漢健民藥業集團股份有限公司，武漢 430052)

脈君安膠囊中氫氯噻嗪的溶出度研究

李博然1，黃志軍1，2，向陽2，陳鵬2，徐紹新2，翟莉2

(1.武漢理工大學化學工程學院，武漢 430070；2.武漢健民藥業集團股份有限公司，武漢 430052)

目的建立脈君安膠囊中氫氯噻嗪的溶出度測定方法。方法采用小杯法,以鹽酸溶液為溶出介質、轉速50 r·min-1測定溶出度,采用高效液相色譜法測定有效成分氫氯噻嗪的溶出量。結果氫氯噻嗪在2.48～12.40mg·L-1濃度內線性關系良好(r=0.999 9),平均回收率為99.1%。結論該方法簡便、準確、重復性好,可用于該藥的溶出度測定。

脈君安膠囊；溶出度；小杯法；色譜法,高效液相

脈君安膠囊為中西藥復方制劑,具有平肝熄風、解痙鎮痛的功效,臨床用于高血壓癥、頭痛眩暈、頸項強痛、失眠心悸、冠心病。氫氯噻嗪為處方中的化藥活性成分,由于難溶于水,故在體內的有效溶出是保證制劑生物利用度的關鍵之一。目前,對于中藥膠囊還只限于測定崩解時限,僅能反映藥物是否崩解,而不能反映出藥物的溶出量。因此筆者通過對脈君安膠囊中氫氯噻嗪溶出度的研究,建立了適宜的溶出系統,并采用高效液相色譜(HPLC)法測定氫氯噻嗪的體外溶出度,為評價和控制脈君安膠囊的質量提供了依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 ZRS-8G智能溶出實驗儀(天津大學無線電廠)；Shimadzu 10A型高效液相色譜儀(日本)；BP211D型1/10萬電子分析天平(德國Sartorius公司)。

1.2 試藥脈君安膠囊(武漢健民中藥工程有限責任公司,批號:060701,060702,060703)；氫氯噻嗪對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號:100309-200702)；鹽酸(分析純,武漢市亞泰化工試劑有限公司)；乙腈(色譜純,美國Tedia公司)。

2 方法與結果

2.1 溶出度測定方法的建立

2.1.1 色譜條件色譜柱為Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)；流動相為乙腈-0.06 mol·L-1磷酸二氫銨溶液(用磷酸調節pH至2.5)(10∶90)；檢測波長為272 nm；柱溫為30℃；流速為1 mL·min-1［1-2］。在此色譜條件下測定陰性樣品、氫氯噻嗪對照品及脈君安膠囊樣品,色譜圖見圖1,待測指標成分與其他成分分離度良好。

圖1 陰性樣品(A)、對照品(B)和樣品(C)HPLC色譜圖1.氫氯噻嗪

2.1.2 線性關系考察精密稱取氫氯噻嗪對照品4.96 mg,置200 mL量瓶中,加溶出介質振搖使溶解,并定容至刻度,作為對照品溶液。精密量取對照品溶液1,2,3,4,5 mL,分別置10 mL量瓶中,加溶出介質稀釋至刻度,搖勻,照上述色譜條件分別進樣20μL,記錄色譜圖。以峰面積(Y)對濃度(X)進行線性回歸。結果表明,氫氯噻嗪濃度在2.48～12.40 mg·L-1范圍時,與峰面積呈現良好的線性關系,回歸方程為: Y=67 843X+2 046.4,r=0.999 9。

2.1.3 回收率實驗精密稱取氫氯噻嗪對照品7.52 mg,置100 mL量瓶,加溶出介質振搖使溶解,并定容至刻度,搖勻。精密量取0,1,3,5 mL分別置50 mL量瓶中,加氫氯噻嗪陰性對照液稀釋至刻度,制成陰性溶液和20%,60%,100%溶出濃度的4組溶液各3份,照上述色譜條件分別進樣20μL,測定峰面積,計算出3個濃度的回收率(n=3)分別為99.8% (RSD=0.69%),98.7%(RSD=1.35%),98.9% (RSD=1.40%),平均回收率為99.1%。

2.1.4 精密度實驗取脈君安膠囊45 min溶出液,重復連續進樣6次,每次20μL,記錄色譜峰面積,RSD為1.33%,表明儀器精密度良好。

2.1.5 穩定性實驗取脈君安膠囊45 min溶出液,分別在0,2,4,6,8,10 h進樣20μL,記錄色譜峰面積, RSD為1.52%,表明溶出液在10 h內保持穩定。

2.2 溶出實驗條件的選擇

2.2.1 溶出度方法的選擇在本品處方中,氫氯噻嗪為難溶性有效成分,含量較低,在進行溶出度測定時考慮到含量測定方法的線性范圍和檢測靈敏度的要求,并參考相關文獻［3］,采用小杯法。

2.2.2 溶出介質的選擇參照《中華人民共和國藥典》二部中氫氯噻嗪片的溶出度測定方法［4］,本品選用鹽酸溶液(稀鹽酸24 m L加水至1 000 m L)200 mL作為溶出介質。

2.2.3 轉速的選擇取樣品(批號:060701),以鹽酸溶液(稀鹽酸24 mL加水至1 000 mL)200 m L為溶出介質,分別以25,50,75 r·min-1進行實驗,經45 min時取樣,進行測定。結果表明樣品在50 r·min-1即溶出良好,故確定轉速為50 r·min-1。

2.3 100%溶出量測定取樣品1粒(批號: 060701),置200 m L量瓶中,加溶出介質適量,超聲使完全溶解,加溶出介質定容至刻度,搖勻,用微孔濾膜(孔徑0.45μm)迅速濾過,取濾液作為100%溶出液。

2.4 溶出曲線的均一性取樣品(批號:060701),按照《中華人民共和國藥典》二部溶出度測定法第三法,以鹽酸溶液(稀鹽酸24 mL加水至1 000 mL)200 mL為溶出介質,轉速50 r·min-1,每個溶出杯中加入1粒樣品進行實驗,共6杯,分別在5,15,30,45,60,90 min時取樣2 m L(每次取樣后立即補充同體積的溶出介質),用微孔濾膜(孔徑0.45μm)迅速濾過,精密吸取濾液20μL,注入液相色譜儀,測定,計算累計溶出量與時間的溶出曲線,見圖2。結果表明,樣品溶出度的均一性良好。

2.5 樣品的溶出度測定結果按照《中華人民共和國藥典》2005年版二部附錄ⅩC第三法(小杯法),以鹽酸溶液(稀鹽酸24 m L加水至1 000 m L)200 mL為溶出介質,轉速50 r·min-1,每個溶出杯中加入1粒樣品進行實驗,經45 min時取樣,溶出液用微孔濾膜(孔徑0.45μm)迅速濾過,濾液作為供試品溶液。按上述方法測定3批脈君安膠囊45 min時的溶出度,結果批號為060701,060702,060703的3批樣品溶出度分別為91.7%(RSD=2.7%),90.2%(RSD=1.9%),92.1% (RSD=3.0%)。