聚乙二醇6000對(duì)間尼索地平溶解性的影響*

石曉偉,孫萌萌,王靜,楊彩琴

(1.河北醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,石家莊 050017；2.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院,石家莊 050000)

聚乙二醇6000對(duì)間尼索地平溶解性的影響*

石曉偉1,孫萌萌2,王靜1,楊彩琴1

(1.河北醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,石家莊 050017；2.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院,石家莊 050000)

目的 研究聚乙二醇6000對(duì)間尼索地平溶解度和體外溶出度的影響,為間尼索地平劑型的選擇提供參考。方法以聚乙二醇(PEG)6000為載體,采用溶劑-熔融法制備間尼索地平固體分散體。應(yīng)用差示掃描量熱分析法(DSC)、X射線粉末衍射光譜(XRD)對(duì)固體分散體進(jìn)行鑒定,紫外分光光度法測(cè)定固體分散體的溶解度和體外溶出度。結(jié)果固體分散體的DSC、XRD圖譜與原料藥及其物理混合物均不同,不同比例的間尼索地平-聚乙二醇固體分散體的溶解度及體外溶出度均高于原料藥,2 h的溶出百分率:原料藥26.80%,固體分散體(1∶3,1∶5,1∶7)分別為35.31%, 38.71%,41.48%,比例相同的固體分散體的溶出率高于其物理混合物。結(jié)論間尼索地平與聚乙二醇6000形成了低共熔物,聚乙二醇6000作為間尼索地平的載體,可加速其體外溶出。

間尼索地平;聚乙二醇6000;溶出,體外;量熱分析,差示掃描;X射線粉末衍射光譜

間尼索地平(m-nisoldipine,m-Nis)是河北醫(yī)科大學(xué)藥物化學(xué)教研室合成的二氫吡啶類鈣拮抗藥。在三氯甲烷或丙酮中易溶,在甲醇或乙醇中略溶,但在水中幾乎不溶。聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)為較常用的藥用輔料,具有水溶性高、毒性小、能顯著改善藥物的溶出速率和生物利用度的特點(diǎn)[1]。因此,筆者制備m-Nis-PEG固體分散體,考察PEG對(duì)間尼索地平溶出性能的影響,為m-Nis高效制劑的選擇提供有效途徑。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 KS型康氏震蕩器(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠),TU-1901紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限公司),YRIS 1型DSC差示分析儀(0.2 MW,美國(guó)Perkin Elmer公司),RC-3溶出度測(cè)試儀(天津市國(guó)銘醫(yī)藥設(shè)備有限公司)。

1.2 試藥 m-Nis原料藥(河北醫(yī)科大學(xué)藥物化學(xué)教研室,批號(hào):031231,純度≥99.5%),PEG 6000(天津市標(biāo)準(zhǔn)科技有限公司,批號(hào):20050306),其他試劑均為分析純,實(shí)驗(yàn)用水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 m-Nis-PEG固體分散體的制備 將m-Nis0.5 g溶于丙酮5.0 mL中,PEG6000(與m-Nis的質(zhì)量比3∶1,5∶1,7∶1)于水浴(60℃)上熔融,然后將兩液混勻,在不斷攪拌下蒸去溶劑,冷卻,移至干燥器內(nèi)干燥,使之脆化,粉碎[2]。

2.2 固體分散體的鑒定

2.2.1 差示掃描量熱法(differential scanning calorimetry,DSC)分別將m-Nis、PEG6000、m-Nis與PEG物理混合物(physical mixture,PM)、固體分散體(solid dispersions,SD)進(jìn)行差示掃描量熱分析。以空鋁皿為參比,另一鋁皿中放入樣品,升溫速度為10℃·min-1,氮?dú)饬魉?0 m L·min-1,升溫范圍是30～150℃,DSC圖譜見圖1。

a.m-Nis;b.PEG6000;c.1∶5 PM;d.1∶3 SD;e.1∶5 SD; f.1∶7 SD圖1 m-Nis固體分散體DSC曲線a.m-Nis；b.PEG6000；c.1∶5 PM；d.1∶3 SD；e.1∶5 SD；f.1∶7 SDFig.1 DSC curvesof solid dispersions of m-nisoldipine

由圖1可知,137℃是m-Nis的熔化峰,64.6℃是PEG的熔化峰,物理混合物的DSC圖譜是PEG和m-Nis的疊加,在64.9、137℃存在吸熱峰,而1∶3固體分散體在58℃存在吸熱峰,1∶5固體分散體在60℃存在吸熱峰,1∶7固體分散體在61℃存在吸熱峰,分散體吸熱峰位較m-Nis和PEG吸熱峰均前移,表明m-Nis與PEG形成了低共熔物,m-Nis可能以微晶或無定形充分分散在載體中[3-4],且隨著載體量的增加,分散體的吸熱峰右移。

2.2.2 X射線粉末衍射實(shí)驗(yàn)(x-ray powder diffraction,XRD)分別將m-Nis、PEG6000、m-Nis與PEG物理混合物、固體分散體約0.05 g放XRD池中進(jìn)行譜圖測(cè)定,測(cè)定條件:靶Cu；濾波器Ni；電壓20 kV；電流20 mA；接受裂縫寬度0.3 mm；掃描范圍(2θ),5°～40°；步長(zhǎng),0.05°/s[5]。XRD圖譜見圖2。

由圖2顯示m-Nis在9.5°,23.4°,24.85°有特征晶體衍射峰,PEG6000在5°～40°之間有兩個(gè)特征的晶體衍射峰。物理混合物的XRD峰是m-Nis和PEG6000的疊加,固體分散體中m-Nis的特征晶體衍射峰減小,沒有新的衍射峰出現(xiàn),表明藥物與載體之間沒有發(fā)生化學(xué)反應(yīng),只是m-Nis的結(jié)晶受到抑制,以超細(xì)結(jié)晶狀態(tài)存在于載體中。

a.PEG6000;b.m-Nis;c.1∶5 PM;d.1∶3 SD;e.1∶5 SD; f.1∶7 SD圖2 m-Nis固體分散體XRD圖譜a.PEG6000；b.m-Nis；c.1∶5 PM；d.1∶3 SD；e.1∶5 SD；f.1∶7 SDFig.2 XRD spectrum of solid dispersions of mnisoldipine

2.3 m-Nis含量測(cè)定

2.3.1 m-Nis儲(chǔ)備液的配制 105℃干燥至恒重的m-Nis15.3 mg,精密稱定,置于50 mL棕色量瓶中,加適量的95%乙醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,得m-Nis儲(chǔ)備液Ⅰ(306μg·mL-1)。精密量取10 mL,置25 mL量瓶中,加95%乙醇稀釋至刻度,搖勻,得m-Nis儲(chǔ)備液Ⅱ(122.4μg·mL-1)備用。

2.3.2 測(cè)定波長(zhǎng)的確定 配制一定濃度的m-Nis水溶液、PEG6000水溶液,于200～400 nm范圍內(nèi)分別進(jìn)行掃描。m-Nis的最大吸收波長(zhǎng)在238 nm,在此波長(zhǎng)處,PEG6000幾乎無干擾,故選用238 nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.3.3 m-Nis標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密量取m-Nis儲(chǔ)備液Ⅱ0.05,0.10,0.40,0.80,1.20,1.60,2.00 m L,置10 mL棕色量瓶中,加純化水稀釋至刻度,搖勻,在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)吸光度,進(jìn)行線性回歸,得出回歸方程:A=0.070 9ρ-0.038 1(r=0.999 8),m-Nis濃度在0.612～12.240μg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.3.4 回收率的測(cè)定 分別在高、中、低不同濃度的m-Nis溶液,按比例加入相應(yīng)量的PEG6000,在238 nm處測(cè)定吸光度,結(jié)果平均回收率99.35%,RSD0.73% (表1)。

2.3.5 精密度實(shí)驗(yàn) 日內(nèi)精密度:分別準(zhǔn)確量取4.896,6.120,7.344μg·m L-1的m-Nis溶液,在238 nm處測(cè)定吸光度,共測(cè)5次,日內(nèi)精密度為0. 75%；日間精密度:用上述溶液,每日測(cè)定一次,連續(xù)測(cè)定5 d,日間精密度為1.12%,日內(nèi)、日間精密度符合方法學(xué)要求。

表1 m-Nis的回收率Tab.1 Recovery of m-nisoldipine μg·mL-1,n=9

2.3.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 準(zhǔn)確量取4.896,6.120, 7.344μg·mL-1的m-Nis溶液,在室溫分別放置0,2, 4,6,8 h后在238 nm處測(cè)定吸光度,RSD為1.53%。

2.4 溶解度的測(cè)定 裝有水20 mL的三角瓶中,分別加入足量m-Nis原料藥、固體分散體(1∶3,1∶5, 1∶7),在震蕩器中振搖,至體系達(dá)到平衡時(shí)取樣,經(jīng)孔徑0.45μm微孔濾膜過濾,濾液在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,計(jì)算溶解度[6]。測(cè)得溶解度如下:原料藥0.89 mg·L-1；m-Nis-PEG6000固體分散體(1∶3,1∶5, 1∶7)分別為2.92,3.33,4.01 mg·L-1。由此可見,不同載體比例的固體分散體溶解度均高于原料藥。

2.5 體外溶出度測(cè)定 精密稱取m-Nis原料藥50 mg、加入相當(dāng)于m-Nis原料藥50 mg的SDs、PM,以0.2%十二烷基硫酸鈉的鹽酸(9→1 000)900 mL為溶出介質(zhì),采用《中華人民共和國(guó)藥典》方法[7],槳法:恒速100 r·min-1,水浴恒溫(37±1)℃,溶出于5,10, 20,30,40,60,120,180,240 min時(shí)取樣10 mL,同時(shí)補(bǔ)充同溫度同體積的新鮮溶出介質(zhì),用孔徑0.45μm微孔濾膜過濾,于最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,計(jì)算累積溶出百分率(Q,%)。120 min的溶出百分率:原料藥26.80%,固體分散體(1∶3,1∶5,1∶7)分別為35.31%,38.71%和41.48%,m-Nis原料藥不同比例固體分散體溶出曲線見圖3,同比例固體分散體及物理混合物的溶出曲線見圖4。

由圖3,4可知,2 h的累積溶出百分率:原料藥26.80%,固體分散體(1∶3,1∶5,1∶7)分別為35.31%,38.71%和41.48%,物理混合物(1∶5)為28.42%,不同比例m-Nis固體分散體溶出度均高于原料藥,載體比例越大,溶出百分率增加越多；比例相同的固體分散體的溶出率高于其物理混合物。將原料藥、物理混合物和固體分散體在2 h的體外溶出率用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS進(jìn)行卡方檢驗(yàn)處理,結(jié)果顯示,固體分散體與原料藥相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(u=-1.96,P＜0.05),原料藥與物理混合物相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(u=-1.09,P＞0.05),不同比例的固體分散體相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(u=7.20,P＜0.05)。

圖3 m-Nis原料藥及固體分散體的溶出曲線Fig.3 Dissolution profiles of m-nisoldipine and solid dispersions of m-nisoldipine

圖4 m-Nis固體分散體與物理混合物的溶出曲線Fig.4 Dissolution profiles of solid dispersion of mnisoldipine and its physicalm ixture

3 討論

PEG是乙二醇和環(huán)氧乙烷聚合物,毒性小,在胃腸道內(nèi)易于吸收,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,能顯著地增加藥物的溶出速率,筆者以PEG6000為載體采用改良的熔融法即溶劑-熔融法制備m-Nis固體分散體。DSC分析結(jié)果顯示,137℃是m-Nis的熔點(diǎn)峰[5],65℃是PEG6000的熔點(diǎn)峰[8],物理混合物中既有PEG6000又有m-Nis的熔點(diǎn)峰,說明物理混合物沒有改變藥物的存在狀態(tài),分散體中藥物的熔點(diǎn)峰完全消失,表明藥物與載體發(fā)生相互作用,不同比例的分散體均出現(xiàn)了前移的吸熱峰,表明m-Nis與PEG形成了低共熔物。XRD實(shí)驗(yàn)顯示物理混合物的衍射峰是m-Nis和PEG的疊加,固體分散體中m-Nis的特征晶體衍射峰減小,說明其結(jié)晶受到抑制,m-Nis以超細(xì)結(jié)晶狀態(tài)存在于PEG中,不同比例的m-Nis分散體的衍射圖譜基本相同,沒有出現(xiàn)新的特征衍射峰,表明m-Nis固體分散體中沒有新的化合物或降解物產(chǎn)生。

固體分散體中,載體對(duì)藥物晶核的形成和生長(zhǎng)受到抑制,提高了藥物的分散度,當(dāng)m-Nis分散體與水接觸時(shí),水溶性載體材料PEG首先溶解,m-Nis以細(xì)微晶體狀態(tài)分散在PEG的溶液中,加快了m-Nis的溶出,隨著PEG載體比例的增大,m-Nis的溶出速率增大。藥物的溶出速率與溶出介質(zhì)、溫度等有很大的關(guān)聯(lián)[9],m-Nis難溶于水,在本實(shí)驗(yàn)選用的溶出介質(zhì)條件下,2 h固體分散體(1∶3,1∶5,1∶7)的累計(jì)溶出百分率比原料藥明顯提高(分別是1.3、1.4和1.6倍)。本實(shí)驗(yàn)所制固體分散體能加速m-Nis體外溶出,該研究為難溶性藥物m-Nis劑型的優(yōu)選提供理論參考。

[1] MAHMOUD E,GIHAN F,MOHAMED F.Improvement of solubility and dissolution rate of indomethacin by solid dispersions in gelucire 50/13 and PEG4000[J].Saudi Pharm J,2009,17(3):217-225.

[2] HA N S,TRAN TT,TRAN PH,etal.Dissolution-enhancing mechanism of alkalizers in poloxamer-based solid dispersions and physical mixtures containing poorly water-soluble valsartan[J].Chem Pharm Bull,2011,59(7):844-850.

[3] 范仁鋒,鄭敦勝,劉美華.吲哚美辛-泊洛沙姆188固體分散體的制備[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2011,30(3):356-357.

[4] 郭波紅,黃嘉敏,李曉芳,等.頭孢地尼-乙烯吡咯烷酮固體分散體的制備[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,32(8):1072-1075.

[5] YANG C Q,REN T K,WANG J,et al.Thermodynamic stability analysis ofm-nisoldipine polymorphs[J].JChem Thermodynamics,2013,58(2):300-306.

[6] 胡程耀,黃培.固體溶解度測(cè)定方法的近期研究進(jìn)展[J].藥物分析雜志,2010,30(4):761-766.

[7] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(二部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010:附錄ⅩC.

[8] 馬素英,董若怡,尚校軍,等.氟苯尼考PEG6000固體分散體的制備與表征[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2010,36(5):589-593.

[9] 齊曉丹,王偉,田珊.擠出滾圓法制備間尼索地平-磺丁醚-β-環(huán)糊精微丸及其質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué), 2011,28(1):60-63.

DOI 10.3870/yydb.2014.05.035

Influences of Polyethylene Glycol 6000 on the Solubility of m-Nisoldipine

SHI Xiao-wei1,SUN Meng-meng2,WANG Jing1,YANG Cai-qin1
(1.School of Pharmaceutical Sciences,Hebei Medical University,Shijiazhuang 050017,China;2.The Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000,China)

ObjectiveTo investigate the influences of polyethylene glycol6000 on the solubility andin vitrodissolution ofm-nisoldipine,which could provide guidance for chosing formulations ofm-nisoldipine.MethodsSolid dispersions ofmnisoldipine were prepared by solvent-melting method with polyethylene glycol 6000 matrix.DSC and XRD spectroscopy were applied to identify the solid dispersions.The solubility andin vitrodissolution were detected by UV spectroscopy.ResultsThe DSC and XRD map were different from the crude drug and their physicalmixtures.The dissolution rates(1∶3,1∶5,1∶7)were faster(35.31%,38.71%,41.48%)than that of the crude drug(26.80%),and the dissolution rates of the solid dispersions in the same ratio were higher than the physical mixtures.ConclusionDSC analysis indicated that eutectic compounds were produced by them-nisoldipine and polyethylene glycol,in which polyethylene glycol6000 acts as a carrier.The solubility andin vitrodissolution ofm-nisoldipine can be increased.

m-Nisoldipine;Polyethylene glycol 6000;Dissolution,in vitro;Calorimetry,differential scanning; Diffraction,X-ray powder

R972.4;TQ460.6

A

1004-0781(2014)05-0664-04

2013-03-26

2013-05-22

*河北省教育廳自然科學(xué)研究計(jì)劃項(xiàng)目(2009148)；河北省衛(wèi)生廳醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題(20090059)

石曉偉(1981-),男,河北石家莊人,講師,碩士,主要從事藥物設(shè)計(jì)與開發(fā)。電話:0311-6265624,E-mail:foolstone@126.com。

楊彩琴(1967-),女,河北石家莊人,教授,碩士,主要從事藥物新技術(shù)與新劑型的研究。電話:0311-6265627,E-mail:yang_caiqin@163.com。