論述高效液相色譜法對注射用硫酸頭孢匹羅含量的測定

【摘要】近些年來，我國醫藥領域的發展十分快速，在市場經濟改革不斷深入的形勢下，市場對于藥品的需求量不斷增多，同時對于藥品測定的要求也在不斷提高。我國人口老齡化趨勢嚴重，很多年輕人在快節奏和高壓力的生活環境下，其身體健康方面也不容樂觀，在這樣的形勢下，提高藥品測定的準確性，確保藥品安全及其藥效，從而為臨床應用提供有力保障。硫酸頭孢匹羅是臨床應用中，比較常見的一種藥品，其在抗菌方面療效顯著，本文利用高效液相色譜法對硫酸頭孢匹羅含量進行測定，結果顯示，其測定數據準確，操作簡單，峰值穩定，是可以種可靠的測定方法。

【關鍵詞】高效液相色譜法；硫酸頭孢匹羅；含量測定

【中圖分類號】R927.2【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）10-0252-01

引言

硫酸頭孢匹羅屬于第四代頭孢菌素，其廣譜抗菌活性強，在葡萄球菌、耐青霉素肺炎球菌的治療中，療效顯著。臨床主要用于較為嚴重的呼吸道感染以及尿道感染和皮軟組織感染中。高效液相色譜發，又稱為HPLC法，它是以液體作為流動相，利用高壓輸液系統對藥品進行測定一種方法，屬于色譜法的一個分支。這種方法在眾多領域得以廣泛應用，尤其是在藥品測定領域，因其具有自動化水平和分析精度高，操作簡單方便等優點，受到了業內人士的廣泛青睞，文章從幾個部分對其測定實驗進行了詳細的分析，研究和討論，希望能夠為人們提供一些幫助和參考。

一硫酸頭孢匹羅

硫酸頭孢匹羅是德國赫斯特公司和法國魯塞爾？尤克拉夫公司聯合研制，主要用于嚴重的下呼吸道感染、白細胞減少病人感染、重癥監護病人的嚴重感染、敗血癥/菌血癥、皮膚和軟組織感染和復雜性上、下尿路感染等。它不僅有第3帶頭孢菌素的特征而且與青霉素結合蛋白親和力高，在細菌周質中維持高濃度，對染色體和質粒介導的β內酰胺酶穩定且親和力低，對冬蟲耐藥菌有效，對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有高度抗菌活性。不僅具有抗需氧的革蘭陰性菌活性，有具有強大的抗厭氧菌活性。對引起腦膜炎的細菌均有良好的抗菌活性，且對血腦屏障的穿透力比其他的廣譜抗菌素強，是藥代動力學優良的長效藥物。

二實驗部分

進行實驗的之前，工作人員需要將實驗所需要的儀器，設備，藥品以及各種相關設施都準備齊全，做好消毒處理，保障試驗過程中無干擾情況發生，確保數據準確，其具體做法如下：

1、儀器和試藥

Agilent1100高效液相色譜儀，G1314紫外檢測器。注射用硫酸頭孢匹羅由哈藥集團制藥總廠研究所提供（批號：070903，070904，070905）；硫酸頭孢匹羅對照品由中國食品藥品檢定研究院提供。乙腈為色譜純；枸櫞酸、磷酸氫二鈉、均為分析純；水為重蒸水。

2、方法與結果

2.1檢測波長的選擇取硫酸頭孢匹羅對照品適量，用流動相溶解并制成每1mL約含硫酸頭孢匹羅50μg的溶液，在200nm～350nm波長范圍內掃描，結果在260nm～270nm波長范圍內吸收值較大，確定265nm為測定波長。

2.2色譜條件與系統適用性試驗色譜柱：依利特HypersilODS2色譜柱（5μm，4.6mm×200mm）；乙腈-pH3.6磷酸鹽緩沖液（稱取枸櫞酸1.42g、磷酸氫二鈉4.36g加水溶解并稀釋至1000mL）（12：88）為流動相，流速1.0mL？min-1，檢測波長265nm；進樣量：20μL。定量方法：外標法。樣品溶液測定色譜圖中，理論塔板數按硫酸頭孢匹羅峰計算為7150。

3.線性關系精密稱定硫酸頭孢匹羅對照品1568mg，置25mL容量瓶中，加流動相使溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取此溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0，10.0mL，分別置50mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。在上述色譜條件，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖；以對照品濃度（C）為橫坐標，峰面積（A）為縱坐標進行線性回歸，得回歸方程為：A=48.00C+26.15，r=0.9999。結果表明：在12.5μg？mL-1～125g？mL-1的濃度范圍內，硫酸頭孢匹羅的濃度與峰面積具有良好的線性關系。精密度試驗在上述色譜條件下，取上述線性項下50.18μg？mL-1的對照品溶液，連續進樣6次，依法測定峰面積，結果證明精密度試驗良好，RSD為0.098%（n=6）。

4.回收率試驗取硫酸頭孢匹羅對照品九份，精密稱定，按處方加入輔料，用流動相溶解并制成高、中、低3種不同濃度的溶液（約40μg？mL-1、50μg？mL-11、60μg？mL-1）各3份，按上述色譜條件測定，計算回收率。測定結果在各濃度下的回收率都比較高，平均回收為99.87%，n=9說明該方法的準確度高，方法可行。

5.溶液穩定性在上述色譜條件下，取“含量測定”項下的供試品溶液（070903），在0、1、2、3、4、6h分別進樣，記錄峰面積，硫酸頭孢匹羅峰面積的RSD分別為0.42%（n=6），說明該供試品在6h內穩定。

6.系統耐受性試驗

6.1在上述色譜條件下，分別用依利特HypersilODS2（5μm，4.6mm×200mm）及迪馬DikmaTechDiamonsil（鉆石）C18（5μm，4.6mm×200mm）兩根不同的色譜柱，取“含量測

定”項下的供試品溶液分別進樣，進行測定，色譜峰峰型、保留時間與理論塔板數均無明顯表化，說明本法耐用性良好。

6.2調節流動相pH值為3.4、3.8，取“含量測定”項下的供試品溶液（070903）進樣，進行測定，色譜峰峰型、保留時間與理論塔板數也均無明顯變化，說明3.6為合適的流動相pH

值。

7.進行硫酸匹羅含量的測定的過程中，工作人員首先要將對照品與注射用的硫酸匹羅進行精密稱定，數量為14毫克，然后將其分別放置在容積為25毫升的量瓶中，隨后加入流動相對其進行稀釋直到目標刻度，并進行搖動，使其均勻。再次分取兩種溶液5.0毫升，放入容積為50毫升的量瓶中，如上所述進行稀釋和搖勻。分別作為供試品溶液和對照品溶液，按上述選定的色譜條件測定，按外標法以峰面積計算。批號為070903，070904，070905的3批樣品含量測定結果分別為76.2%、75.9%、76.3%。

三結果與討論

本次使用了高效液色相鋪法對硫酸頭孢匹羅含量進行了測量，從實驗結果來看，此方法測定數據準確，操作性以及重現性方面，都具有明顯優勢。適用于硫酸匹羅的含量測定。如果與使用磷酸二氫銨.乙腈作為流動相的方法相比較，本辦法無論是在色譜峰峰值方面還是在塔板數方面都有明顯的改善。為了能夠確保測定數據準確，為臨床應用提供最為科學的依據，合理的選用測定方法，是非常關鍵的，在醫藥測定制度不斷改革和完善的過程中，高效液色相譜法的應用范圍也必將更加廣泛，嚴格按照步驟和規范進行操作，才能夠發揮其作用，為醫藥領域做出更多貢獻。

參考文獻

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