高效液相色譜法在酚類化合物和膽固醇分析中的應用研究

【摘要】高效液相色譜法是非常常見的一種針對分離和分析的技術，它與傳統(tǒng)的分離與分析技術相比，主要使用的是高壓泵等設備，因為這種分離技術能夠將指定的物質分離，而且在對其進行分析時，效率特別高，這也是它能夠得到廣泛使用的主要原因。本文主要通過對這種技術的應用和發(fā)展狀況的分析，進而探討了這種技術在酚類化合物和膽固醇中的具體應用，僅此提供借鑒。

【關鍵詞】高效液相色譜法酚類化合物膽固醇應用研究

【中圖分類號】R286.0【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）10-0214-02

在所有色譜技術中，液相色譜法是最早（1903年）發(fā)明的，但其初期發(fā)展比較慢，在液相色譜普及之前，紙色譜法、氣相色譜法和薄層色譜法是色譜分析法的主流。到了20世紀60年代后期，將已經(jīng)發(fā)展得比較成熟的氣相色譜的理論與技術應用到液相色譜上來，使液相色譜得到了迅速的發(fā)展。特別是填料制備技術、檢測技術和高壓輸液泵性能的不斷改進，使液相色譜分析實現(xiàn)了高效化和高速化。從此，這種分離效率高、分析速度快的液相色譜就被稱為高效液相色譜法，也稱高壓液相色譜法或高速液相色譜法。

高效液相色譜法在我國的很多領域都得到了廣泛的使用，比如化工、食品、農(nóng)業(yè)、石油、醫(yī)藥行業(yè)等。這種技術隨著時代和科技的發(fā)展，在幾乎所有學科領域中廣泛應用，大大提高了分離和分析技術水平。因為高效液相色譜法操作相對簡單，原理也不復雜，最為重要的一點是，在某些行業(yè)應用這種技術能夠起到環(huán)保的效果，在此，就高效液相色法在酚類化合物和膽固醇分析中的相關問題進行研究。

一高效液相色譜法簡單原理及其發(fā)展現(xiàn)狀

1、簡單原理

高效液相色譜法開始逐漸引起人們的關注是在上世紀七十年代，它與傳統(tǒng)分離技術相比，有很多的優(yōu)勢，可以說是一種新型的柱色譜技術。雖然分離技術不止這一種，但是它無疑是最重要的一種。因為樣品中各組分在兩相中有著不一樣的吸附作用和不同的分配系數(shù)等，尤其是在固定相和流動相中這種不同體現(xiàn)的更為明顯，而高效液相色譜法主要利用的就是不同組分在這些方面的不同來分離樣品，各組分性質的不同使之在分離的過程中保留時間也不一樣，這樣就可已達到分離的效果。

因為固定相和流動相有著強弱不同的相對極性，就是根據(jù)這種不同通常將高效液相色譜法劃分為兩種：一種是固定相極性大于流動相極性的稱為正相色譜，而另一種與之相反的稱為反色相譜。反相色譜是當今液相色譜的最主要分離模式，幾乎可用于所有能溶于極性或弱極性溶劑中的有機物質的分離。本文所探討的高效液相色譜法在酚類化合物和膽固醇分析中的應用，也是使用的反色相譜。

2、發(fā)展現(xiàn)狀概述

近幾年，高效液相色譜技術被廣泛應用，為很多行業(yè)做出了貢獻，值得一提的是，這種技術在發(fā)展的同時，也出現(xiàn)了很多聯(lián)用技術，將色譜分離技術與各種前處理、檢測技術有效的結合起來，就是我們現(xiàn)在常用的色譜聯(lián)用技術，這種技術彌補了單純液相色譜的一些弊端，使液相色譜得到了更廣泛的應用。比如色譜和柱后衍生儀有效的聯(lián)用，克服了液相色譜通用檢測器只能對含生色團物質檢測的不足，擴大了檢測范圍，使液相色譜的價值發(fā)揮得更大；色譜與原子光譜的聯(lián)用，實現(xiàn)了優(yōu)勢互補，已發(fā)展成為解決復雜體系中痕量元素分析的重要途徑；而色譜與熱分析儀聯(lián)用，就可以在檢測樣品的同時分析出樣品的熱分解行為；色譜與氣相色譜聯(lián)用，減少了樣品前處理環(huán)節(jié)，節(jié)約了樣品處理的時間；色譜的高效分離能力和核磁共振的精確結構分析能力的結合，為中等大小分子的有機化合物分離和分析提供了有效手段；色譜與質譜的聯(lián)用，可以對未知結構的物質進行定性、定結構分析的同時進行定量分析。

二高效液相色譜法在酚類化合物中的應用

植物中含有很多的酚類化合物質，我們經(jīng)常使用的物質中也含有大量的酚類化合物，由于利用酚類化合物可以改變食物的口感、顏色，所以經(jīng)常把它應用在食品中，接下來，筆者就這種方法在食品分析中的具體應用。

因為近些年關于食品安全的事件時有發(fā)生，所以擁有一個簡單方便的食品檢測方法很重要，我國主要的食品檢測方法主要有三大類，一類是色譜法，另一類是光譜法，最后一類是生物檢測法，而這其中的色譜法就包括高效液相色譜法。因為這種技術方法分析效率高，靈敏度強，分離效果好，最為關鍵的是容易操作，所以在食品分析中經(jīng)常使用這種方法，比如利用這種方法來檢測食品是否有農(nóng)藥殘留、有哪些營養(yǎng)成分、是否含有毒素、是否添加了添加劑以及有哪些無機成分等。最常見的就是利用高效液相色譜法來檢驗豬、雞等人們食用的動物的肌肉和肝臟是否含有不健康的物質，在檢測的過程中，利用加速溶劑萃取法來檢測樣品，這樣的方法與傳統(tǒng)的萃取方法相比，減少了很多環(huán)節(jié)，而且也沒有很多的背景吸收，既有助于節(jié)省分析時間，也有很高的回收率。還有很多的學者利用緩沖溶劑的方法來對苦蕎麥谷粒進行檢測，主要檢測白藜蘆醇的含量，這種方法來檢測白藜蘆醇是非常實用的，利用這種檢測方法和相應的儀器，能夠非?？焖俚姆治龀龊?。

三高效液相色譜法在膽固醇分析中的具體應用

通常動物類食物中都含有大量的膽固醇，如果身體攝入過多的膽固醇，會引發(fā)很多病癥比如動脈硬化、高膽固醇血癥等。鑒于膽固醇類組分對人體的影響，人們不斷采取各種各樣的手段來減少食物組分中的膽固醇。近些年發(fā)生的地溝油事件，讓很多的居民產(chǎn)生恐慌，要檢測樣品是否是地溝油，一個非常簡便的方法就是測定樣品中膽固醇的含量，這就要求建立一種簡單、快速而重現(xiàn)性好的測定膽固醇的方法，此時高效液相色譜法就起到了非常重要的作用。

對膽固醇進行檢測的技術和方法很多，食品中膽固醇的測定方法主要包括：比色法、酶催化法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。比色法和酶催化法僅適用于純動物性食品中膽固醇的測定，當存在植物甾醇類物質如谷甾醇、豆甾醇等時，測定結果明顯偏高，應用范圍較窄。常規(guī)比色法存在前處理復雜、誤差大、重復性差等問題。氣相色譜法操作步驟同樣繁瑣，另外也有利用GC-MS測定膽固醇的報道，但設備較為昂貴，不能達到大范圍推廣的要求。而高效液相色譜法操作簡單、測量精度高，配合濁點萃取的前處理方法，免去了繁瑣的皂化步驟，既減少了污染又降低了成本。這種方法只需要選擇合適的表面活性劑溶液，就能夠取得良好的分離效果，這種方法需要的溶劑少，污染小，萃取效率高，為油脂中的脂溶性物質預富集和檢測提供了一種參考方法。

四結語

綜上所述，可知高效液相色譜法無論在酚類化合物分析中，還是在膽固醇的分析中，都有很好的應用，為人們日常生活的飲食安全提供了保障。在現(xiàn)代的生活中，人們對于物質的安全要求越來越高，對于物質中出現(xiàn)的對人體有害的東西，一直是一個敏感話題，而對于這些東西何從分辨呢？最后還是要歸于分析檢驗。所以液相色譜分析的前景很樂觀。今后，隨著各種分析分離技術的出現(xiàn)及聯(lián)用技術的發(fā)展，高效液相色譜法將會被應用到更廣的領域，未來發(fā)展前途廣大。

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