基于若干種中藥及其復方抗真菌實驗研究

鄺陽勇

【摘要】目的：對單味中藥及其復方的抑制真菌的最小濃度進行試驗測定。方法：以試管內藥基法對單味中藥及其復方進行實驗研究，對它們對常見真菌的抑制效果進行測定評價。結果：大風子、川椒、皂角對真菌的抑制作用最強，復方組抑菌最小濃度為0.625%，效果好于單味中藥。結論：大風子、皂角、川椒等對皮膚癬菌具有明顯的抑制效果，復方的抑菌效果優于單味中藥，中藥之間具有協同作用。

【關鍵詞】中藥；復方；抗真菌；最小濃度

【中圖分類號】R28 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）04-0037-02

隨著器官移植、器官插管的不斷開展，廣譜抗生素、甾體抗生素在臨床上的大量使用，一些免疫障礙類疾病的大量出現，使得真菌感染的情況迅速增加[1] 。床上使用的抗真菌藥物也不斷增加，但是因為抗真菌藥物的耐藥問題及毒副作用的問題對其廣泛推廣應用產生了影響[2]。而中藥具有來源廣、毒副作用小、不容易出現耐藥性、價格低等優點，使得抗真菌中藥的研究具有比較好的發展前景[3]。手足癬是臨床上常見行淺部真菌病，該病的致病菌種主要有石膏樣毛癬菌、紅色毛癬菌、白色念球珠菌等[4]。本文對臨床上常用來治療手足癬的10種單味中藥及其復方進行研究，以試管內藥基法，測定其抑制真菌的最小濃度，報道如下：

1資料與方法

1.1 一般資料

菌種：白色念珠菌、紅色毛癬菌、石膏樣毛癬菌。

菌液制作：用接種鉤挑選適量菌種放入生理鹽水，再經研磨制成混懸液。在血細胞計數板上對菌液濃度進行調節，濃度一般為5×105CFU/ML。

藥液制備：取大風子、川椒、皂角、蛇床子、百部、大黃、地骨皮、苦參、黃柏、白鮮皮各30g，各加水250ML煮沸15分鐘，將藥汁以紗布濾出。然后再加水250ML煮沸15分鐘，將兩次煮出的藥汁兌再一起，進行加熱濃縮至50ML，得100%藥液。

其他儀器：蛋白胨、蒸餾水、瓊脂、葡萄糖、氯霉素、加樣器、試管、恒溫箱、高壓消毒鍋、微量天平、顯微鏡、5ML注射器、20ML注射器等。

單味中藥的實驗方法：制備常規沙氏瓊脂培養基，注入系列試管，每管4ML，取140支試管，為1-140支。以5ML的注射器抽取2ML100%藥液注入試管1ML，得20%藥液與培養基混合物；再以剩1ML藥液的5ML注射器抽取1ML蒸餾水，混合均勻后注1ML到下一試管，得10%的藥液與培養基的混合物。以此方法，可獲得0.3125%，0.625%，1.25%，2.5%，5%，10%，20%濃度的藥液與培養基的混合物，并做好標記。再取141與142管，注入1ML蒸餾水，做好標記，總計142支。以高壓消毒鍋進行高溫消毒，持續15分鐘，然后置斜面等待冷卻，這樣就制成對照培養基與系列藥物濃度的培養基。將1-140管與生長對照管（141管）接種待測試的菌種，和空白對照管（142管）一起放入恒溫箱14天，恒溫箱溫度保持在25℃，觀察真菌的生長情況。

復方的試驗方法：按照單味中藥的實驗效果抽取5種效果最好的中藥：大風子、川椒、皂角、地骨皮、藿香組成復方。制備藥基和接種菌種相同的單味中藥，觀察真菌的生長情況。

1.2效果判定

真菌發育迅速旺盛，記4+；真菌發育比較旺盛，但是菌落比正常偏小，記3+；真菌發育不旺盛，記2+，真菌發育緩慢，菌落較小，記1+；真菌完全不發育，記-。最小真菌完全無生長濃度就是抑制真菌生長的最低濃度。

2 結果

3討論

中藥在臨床上的應用一般是復方制劑，因此對復方中藥進行研究具有十分中藥的理論和實踐意義[5]。

真菌皮膚病的基本致病因素是濕、蟲、毒、熱，因為濕邪粘滯，所以病情反復，難以治愈，時間久則會瘀阻脈絡、傷津耗血，使血不榮膚。相關文獻報道中一般采用祛風止癢、清熱燥濕、殺蟲療癬等藥物進行治療[6]。本次試驗采用的10種藥物就是具有上述功效的藥物。實驗過程中，142支始終沒有真菌生長，證明實驗過程中沒有出現真菌的交叉感染，141支生長始終迅速旺盛，證明菌株在培養基上的生長情況良好，提示測試結果可靠準確。

不同藥物具有不同的真菌活性，大風子、川椒、皂角、藿香、苦參等具有顯著的抑菌作用，而蛇床子、百部等抑菌效果較差；同一藥物對不同菌種的抗真菌活性也不相同，10種藥物對白色念珠菌的抑制效果較差。而復方組對三類真菌的抑制效果菌比較理想，優于單味藥，最小濃度為0.625%，且對于白色念珠菌的抑制效果也比較好，最小濃度為2.5%，證明這些重要之間具有協同作用。

相信通過系統科學的研究，中藥抗真菌會取得新進展。

參考文獻

[1]邱瑩，于騰. 20種中藥及其復方抗真菌實驗研究[J].濟寧醫學院學報.2007.9（3）：237-238

[2]劉靜，蔡希. 中醫藥治療手足癬的研究進展[J].四川中醫.2011.29（8）：44-45

[3]常小東，段渠，張溯，李俊儀.中藥復方外用治療手足癬研究進展[J]. 河南中醫. 2012.3（32）：390-391

[4] 錢方，葉秋華. 二大歸芷湯治療角化型手足癬臨床及實驗研究[J].湖南中醫藥大學學報. 2008.28（1）：41-42

[5] 秦麗.自擬克癬湯治療濕熱型手足癬30例療效觀察[J].工企醫刊.2008.21（5）：50-51

[6]陶茂燦，夏修蛟，曹毅.中藥復方制劑抗真菌的實驗研究進展[J].浙江臨床醫學.2008.11（10）：1506-1507