天灸巴布劑的質量標準研究

劉茜茜　蔡小連　朱水源

【摘要】 目的：建立天灸巴布劑的質量標準。方法：采用TLC 法鑒別方中白芥子、延胡索、細辛和甘遂。采用HPLC 法測定方中芥子堿硫氰酸鹽的含量。結果：TLC結果顯示與對照藥材有顏色相同的斑點，且分離度好、專屬性強，陰性對照無干擾。HPLC 測定芥子堿硫氰酸鹽在0.008096-0.4048mg/ml有較好的線性關系，平均回收率為98.43%，RSD為1.3075%，天灸巴布劑中芥子堿硫氰酸鹽的含量平均為0.5571mg/貼。結論： 所建立的質量控制方法準確、可靠、可行， 可有效控制制劑質量。

【關鍵詞】天灸；巴布劑；質量標準；HPLC；芥子堿硫氰酸鹽

【中圖分類號】R286.0 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）04-0119-01

天灸巴布劑中藥配方源于清朝名醫張璐所著的《張氏醫通》，是治療哮喘的經典配方。配方由白芥子、延胡索、甘遂、細辛等藥味組成，臨床上使用多將配方量下的中藥研細粉，加以現磨生姜汁調敷[1]。為了控制天灸巴布劑的質量標準，采用薄層色譜法鑒別方中主要藥味，高效液相色譜法控制主要藥味藥含量，為天灸巴布劑深入研究提參考。

1 儀器與試劑

JA2003型電子天平（上海良平儀器儀表有限公司），Agilent1100series液相色譜系統；四元泵G1311，柱溫箱G1316A檢測器G1314A，超聲波清洗器（型號：KQ-300功率：300W；工作頻率：40KHz；昆山市超聲儀器有限公司），PL602-L型電子天平（梅特勒-托利多），CNY-1型初黏性測試儀（濟南蘭光機電技術有限公司），ST-1型水凝膠涂布機（溫州皓豐機械有限公司），電熱恒溫干燥箱（廣州市康恒儀器有限公司），KBS-150型數控超聲波細胞粉碎機裝置（昆山市超聲儀器有限公司）；芥子堿硫氰酸鹽對照品（中檢所，批號：111702-200501）；白芥子、延胡索、細辛、甘遂藥材（均購置于佛山市中藥飲片廠有限公司）；磷酸二氫鉀溶液試劑均為色譜純，乙醇、甲醇、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮、甲酸均為分析純；雙重蒸餾水乙腈。

2 方法與結果

2.1 白芥子薄層鑒

2.1.1 取本品1 片，剪碎，加甲醇50 mL，300 W超聲處理45 min，濾過，濾液蒸干，加水25 mL 溶解，用水飽和的正丁醇提取2 次，每次20 mL，合并正丁醇液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1 mL 使溶解，作為供試品溶液。

2.1.2取缺芥子的陰性樣品（按處方去除芥子），依2.1項下制成陰性對照溶液；另取芥子堿硫氰酸鹽對照品，加甲醇制成每1mL 含1 mg 的溶液，作為對照品溶液。

2.1.3 按照照薄層色譜法試驗（附錄VIB）[2]，吸取上述3種溶液各5μL分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（8：3：2：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品和對照品在色譜圖相應位置上有顏色相同的斑點，而陰性對照無干擾，結果見圖1。

2.1 甘遂薄層鑒定

2.2.1取本品1 片，剪碎，加乙醇50 mL，功率300 W超聲處理0. 5 h，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2 mL 使溶解，作為供試品溶液。取缺甘遂的陰性樣品（按處方去除甘遂），依法制成陰性對照溶液；另取甘遂對照藥材1 g，加乙醇10 mL，同法制得對照藥材溶液。

2.2.2照薄層色譜法試驗[2]，吸取上述3 種溶液各5 μL 分別點于同一硅膠G 薄層板上，以甲苯-丙酮（10：1. 2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。供試品與對照藥材在色譜圖相應位置上有相同顏色的斑點而陰性對照無干擾，結果見圖2。

2.2 細辛薄層鑒定

2.2.1 取本品1片，加甲醇50 mL，300W超聲處理1 h，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解，乙醚萃取，揮干后，乙酸乙酯溶解為供試品溶液；取缺細辛的陰性樣品（按處方去除細辛），依法制得陰性對照溶液；另取對照藥材1 g，同法制得對照藥材溶液。

2.2.2 照薄層色譜法（附錄VIB） [2]試驗，吸取上述3 種溶液10μL，分別點于同一塊硅膠G 薄層板，以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯（16：3：4）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5% 香草醛硫酸，105 ℃加熱烘干顯色清晰。供試品與對照藥材在色譜相應位置上有相同顏色斑點，而陰性對照無干擾，結果見圖3。

2.3 延胡索薄層鑒別

2.3.1 取本品1片，加甲醇50 mL，300W超聲處理1 h，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解，加濃氨水調pH 至堿性，乙醚萃取，揮干后，甲醇溶解作為供試品溶液；取缺延胡索的陰性樣品（按處方去除延胡索），依法制得陰性對照溶液；取對照藥材粉末1 g，處理方法同供試品溶液，制成對照藥材溶液。

2.3.2 照薄層色譜法（附錄VI B）試驗[2]，吸取上述3種溶液10μL，分別點于同一塊硅膠G薄層板，以甲苯-丙酮（9：2）為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣熏3 min，在紫外燈（256 nm）下顯色清晰。供試品與對照藥材在色譜相應位置上有相同顏色熒光斑點，而陰性對照無干擾，結果見圖4。

2.4 芥子堿硫氰酸鹽的含量測定[3-5]

進行對照品溶液制備、供試品溶液制備、陰性對照溶液制備，備用。通過對進行線性關系考察、精密度試驗、穩定性試驗表明內有良好的線性關系、儀器精密度良好、供試品溶液在10 h 內穩定。

3 討論

含量測定的關鍵在于取樣的均勻性和完全性，由于巴布劑的基質為高分子材料，且具有一定的黏度，還有很多附加劑及溶媒，提取精制比較困難，根據藥物特性，可容易甲醇，實驗比較用該溶劑直接萃取，蒸餾法等都顯示，其有效成分溶出率較低，不適宜定性的標準，而通過超聲過后，利用空化效應可以是溶劑滲透性增強，有效成分擴散增加，達到比較高的提取率。最終采用本文報道的方法，通過方法學驗證，結果穩定可行，可作為本品的質量控制指標，并為其他巴布劑含量測定的質量標準研究提供參考。

參考文獻

[1] 李立芳.天灸[J].尋醫問藥，2011，7：28-29.

[2]中國藥典[S].一部. 2005：附錄31.

[3] 劉莉，穆曉敏，沈亦妙，等.穴敷喘平凝膠貼劑質量標準研究[J].中國實驗方劑學雜志， 2010， 16（11）：32-34.

[4] 鄧紅，區潔雯，張蜀，等.復方白芥子巴布劑的質量標準研究[J].中成藥，2010，32（5）：886-888.

[5] 張新勇，劉麗芳，徐中南，等.HPLC法測定復方止咳清肺膠囊中有效成分含量的研究[J].中國野生植物資源，2011，30（1）：61-63.