慢性特發性血小板減少性紫癜患者血清sHLA-G水平測定的臨床意義

宋 斌，章正華，李章志，陳 雁，萬楚成

（湖北醫藥學院附屬太和醫院血液內科，湖北 十堰 442000）

慢性特發性血小板減少性紫癜患者血清sHLA-G水平測定的臨床意義

宋 斌，章正華，李章志，陳 雁，萬楚成

（湖北醫藥學院附屬太和醫院血液內科，湖北 十堰 442000）

目的 探討血清可溶性人類白細胞抗原G（sHLA-G）在慢性特發性血小板減少性紫癜（CITP）中的表達及臨床意義。方法采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測76例初治慢性ITP患者治療前后血清中sHLA-G水平。結果 CITP患者治療前sHLA-G水平明顯高于對照組（P＜0.05）。經治療緩解后患者血清sHLA-G水平與治療前相比明顯下降（P＜0.05）。未緩解者sHLA-G水平與初診患者無明顯差異（P＞0.05）。結論 sHLA-G可能參與了CITP的發病，檢測sHLA-G水平變化有助于慢性特發性血小板減少性紫癜病情判斷,可作為療效觀察的新指標。

慢性；特發性血小板減少性紫癜；可溶性人類白細胞抗原G

人類白細胞抗原G（HLA-G）是一種非經典I類組織相容性復合體（MHC）分子，分為膜結合型HLA-G（mHLA-G）和可溶性HLA-G（sHLA-G）。大量的研究結果證實HLA-G在免疫調節及免疫耐受中發揮重要的生物學作用[1]。近期的研究表明HLA-G在自身免疫性疾病如多發性硬化、類風濕關節炎等疾病中的表達發生了改變，推測其可能在自身免疫性疾病的病理生理中發揮重要作用[2]。慢性特發性血小板減少性紫癜（CITP）是成人中最為常見的出血性疾病，其發病機制目前多數認為與免疫介導密切相關，被認為是一種自身免疫病。本研究采用ELISA方法檢測慢性特發性血小板減少性紫癜患者緩解前后血清中sHLA-G水平，探討血清sHLA-G在慢性特發性血小板減少性紫癜的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

CITP組：為2011年1月至2012年3月在我院住院治療的初治CITP患者76例，均按張之南主編的《血液病診斷及療效標準》[3]確診。其中男24例，女52例，年齡14歲～66歲。正常對照組：48例，均來源于正常志愿獻血員，男16例，女32例，年齡18～56歲。

1.2 治療方法及療效判定

慢性特發性血小板減少性紫癜患者主要采用腎上腺糖皮質激素潑尼松治療，腎上腺糖皮質激素潑尼松用量1.0～1.5 mg/（kg·d），口服，至血小板數回升至正常水平時逐漸減量，小劑量維持治療4～6月后停藥。部分病人同時靜脈滴注丙種球蛋白，丙種球蛋白用量400 mg/（kg·d），連用5天。

療效判定按《血液病診斷及療效標準》[3]，顯效：血小板恢復正常，無出血癥狀，持續3個月以上；良效：血小板上升至50×109/L或較原水平上升30×109/L以上，無或基本無出血癥狀，持續2個月以上；進步：血小板有所上升，出血癥狀改善，持續2周以上；無效：血小板計數及出血癥狀無改善或惡化。顯效及良效為緩解，進步及無效為未緩解。

1.3 標本采集

所有患者在治療前及治療后清晨空腹抽取靜脈血，同時進行血小板計數。取血清標本保存于-20℃備用。

1.4 血清sHLA-G檢測

采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法，sH LA-G試劑盒為捷克BioVendor公司產品，具體步驟嚴格按試劑盒說明書操作。

1.5 統計學分析

采用SPSS 19.0統計軟件進行分析，結果以“±s”表示，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

CITP患者治療后緩解組血清sHLA-G水平與治療前和未緩解組相比下降，且差異均有統計學意義（P＜0.05）；與對照組相比差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 治療前后和對照組血清sHLA-G水平（±s，μg/L）

表1 治療前后和對照組血清sHLA-G水平（±s，μg/L）

注：與對照組相比，#P＜0.05；與治療前相比，△P＜0.05；與對照組相比，※P＞0.05；與治療前相比，*P＞0.05。

組別 n 血清sHLA-G治療前 CITP 76 13.57±5.17#治療后 緩解組 58 6.20±3.78△※未緩解組 18 13.54±4.31*對照組 48 6.11±4.42

3 討論

HLA-G基因屬于非經典HLA-Ⅰb類基因，具有23個等位基因（16個位于外顯子，7個位于內含子），編碼7種HLA-G分子，即HLAG1～HLA-G7。生理狀況下HLA-G主要表達于胸腺上皮細胞、胚胎滋養層細胞及眼角膜細胞等[1]。大量研究表明HLA-G具有極強的免疫調節作用，主要表現在（1）有效抑制CTL和NK細胞的細胞毒作用；（2）誘導CD8+T細胞或CD8+NK細胞的凋亡；（3）抑制CD4+T細胞的增值或阻礙初始型T細胞的分化；（4）抑制樹突狀細胞等抗原遞呈細胞（antigen presenting cell，APC）的成熟和活化，影響抗原遞呈；（5）刺激APC細胞分泌TGF-β、IL-10等細胞因子，使Th1/ Th2平衡移向Th2[4]。研究發現在病理狀態下，腫瘤、移植、病毒感染等均能誘導HLA-G分子的異常表達[5]，說明HLA-G分子在一些疾病過程中可能發揮重要作用。

近期的研究表明HLA-G在多種炎性疾病和自身免疫性疾病中的表達發生改變，在潰瘍性結腸炎患者的腸粘膜、銀屑病患者的病損皮膚組織、哮喘患者的支氣管上皮及炎性肌病患者的肌纖維組織中均觀察到了HLA-G的表達[6]，表明HLA-G參與了此類疾病的病理生理過程。

本研究顯示CITP患者治療前水平明顯增高，其機制可能為在CITP發病過程中免疫遞呈細胞刺激T淋巴細胞，活化的T淋巴細胞產生sHLA-G,同時活化的T淋巴細胞激活單核巨噬細胞從而使sHLA-G的釋放增加。經治療緩解后患者血清sHLA-G水平與治療前相比明顯下降（P＜0.05），未緩解者sHLA-G水平與初診患者無明顯差異（P＞0.05）。提示我們sHLA-G可能參與了CITP的發病。

同時從本研究可以看出經腎上腺糖皮質激素治療未緩解者，其血清sHLA-G水平無明顯下降，提示我們在治療過程中監測sHLA-G水平可以指導治療及判斷病情，腎上腺糖皮質激素目前為CITP的首選治療，但在腎上腺糖皮質激素治療過程中，若血清sHLA-G無明顯下降，提示腎上腺糖皮質激素治療效果可能欠佳，則可采取其他治療措施，從而避免激素的長期大量使用而導致的副作用。

綜上所述我們認為sHLA-G可能參與了CITP的發病，檢測sHLA-G水平變化有助于慢性特發性血小板減少性紫癜病情判斷,可作為療效觀察的新指標。

[1] Apps R,Gardner L,Moffett A.A critical look at HLA-G[J].Trends Immu nol,2008,29(7):313-321.

[2] Rizzo R,Hviid TV,Govoni M,et al.HLA-G genotype and HLA-G ex pression in systemic lupus erythematosus:HLA-G as a putative su sceptibility gene in systemic lupus erythematosus[J].Tissue Antige ns,2008,71(6):520-529.

[3] 張之南,沈悌.血液病診斷及療效標準[M].第3版,北京:科學出版社,2007:172-175.

[4] 許惠惠,阮嫣赟,顏衛華,等.HLA-G誘導DC細胞在免疫耐受機制中的研究進展[J].生命科學,2011,23(08):736-741.

[5] Yan WH.Human leukocyte antigen-G in cancer:are they clinically relev ant[J].Cancer Lett,2011,311(2):123-130.

[6] Zelante A,Borgoni R,Galuppi C,et al.Therapy modi fi es HLA-G secreti on differently in Crohn's disease and ulcerative colitis patients[J].In fl a mm Bowel Dis,2011,17(8):94-95.

（本文編輯 董林）

Clinical signi fi cance of serum level of sHLA-G in patients with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura

SONG Bin,ZHANG Zheng-hua,LI Zhang-zhi,HEN Yan,WAN Chu-cheng
(Department of Hematology, Af fi liated Taihe Hospital of Hubei Medical College, Shiyan 442000,China)

Objective To investigate clinical signi fi cance of sHLA-G in patients with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura(CITP). Methods Serum levels of sHLA-G in 76 patients with initial CITP were detected using enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). Results The serum level of sHLA-G in initial patients with CITP was signi fi cantly higher than level of controls (P＜0.05), The serum level of sHLA-G in those having good response after therapy was signi fi cantly lower than before treatment(P＜0.05). There were no difference in sHLA-G between nonremission and initial patients(P＞0.05). Conclusion Serum levels of sHLA-G in the patients with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura is useful marker to judge state of illness, and sHLA-G may be regarded as new index of curative effect.

Chronic;Idiopathic thrombocytopenic purpura;sHLA-G

R554.6

B

10.3969/j.issn.1674-070X.2014.02.001.001.02

2013-07-12

宋 斌，男，碩士，主治醫師，研究方向：血液病的診斷與治療。

萬楚成，男，學士，主任醫師，碩士生導師，E-mail：lovmme@tom.com