洗滌式自體血回輸中不同溫度洗滌液對人紅細胞形態結構的影響

王勇+歐陽孟琳

[摘要] 目的 探討自體血回輸中不同溫度洗滌液對人紅細胞形態結構的影響。方法 選擇臨床自體血回輸者60例，根據洗滌液NS溫度的不同，分為三組[4℃、24℃（常溫）、37℃]分別記錄洗滌前后的回收血液pH值、Na+、K+、血紅蛋白（Hb）、紅細胞壓積（Hct），收集回輸血液中的紅細胞，分別在電子顯微鏡下觀察紅細胞的形態變化。結果 洗滌后三組Hb、Hct、血鈉水平均較洗滌前顯著升高（P<0.01），24℃組和37℃組Hb、Hct升高幅度并不如4℃組（P<0.05）。三組洗滌后血K+濃度較洗滌前顯著下降（P<0.01）。洗滌后三組并沒有出現顯著紅細胞變形，隨著時間的延長，三組棘形紅細胞均有所增加（P<0.01），而溫度越高，隨著時間的延長，棘形紅細胞比例越高（P<0.01）。結論 自體血回輸過程中，4℃的洗滌液對紅細胞形態的維持優于常溫和37℃，尤其隨著時間的延長，優勢更加明顯。

[關鍵詞] 不同溫度； 洗滌液； 紅細胞； 形態結構

[中圖分類號] R457.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）14-0031-03

由于外科手術用血的需求量越來越大，術中自體血液回收是解決血源緊張與防止血源性傳染病的重要途徑。如何降低自體血液回收過程對紅細胞的損傷，是研究的課題之一。目前國內外對于自體血的研究主要集中在自體血在各種手術中的應用以及自體血回輸對于患者電解質凝血功能等的影響，對紅細胞的功能和保護方面研究很少，洗滌液溫度對于紅細胞的影響的研究屬于空白[1]。本研究尋求更好的回收紅細胞的方法，減少自體血回輸中對紅細胞的損傷，從而達到避免患者在緊急情況下因等待交叉配血時間而貽誤搶救時機，同時降低患者因輸入庫血所帶來的風險，也減少患者使用庫血所需要花費的高額醫療費用，同時為社會節約寶貴的血液資源。現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇ASAⅠ或Ⅱ級、無高血壓、糖尿病、內分泌疾病的擇期手術患者60例，所有患者無血液系統疾病，肝腎功能正常，預計術中出血量≥500mL。所有患者均采用氣管插管靜吸復合麻醉下進行手術，吸入七氟烷維持麻醉。根據洗滌液溫度分為4℃組，24℃組（常溫）和37℃組。每組20例。

1.2研究方法

入選患者采用氣管插管靜吸復合麻醉，潮氣量為（7～8） mL/kg，頻率為（12～14）次/min，吸氣呼氣比1∶2，氧流量1.5 L/min，呼氣末EtCO2 35～45 mmHg。吸入七氟烷維持麻醉維持。血壓、心率波動幅度<基礎值的30%。血液回輸機為美國cellsaver自體血回輸機，負壓設定為150 mmHg，抗凝素為肝素液，125萬U肝素加入到500 mL生理鹽水中，配成濃度為5萬U/L，滴入的速度與回收血液速度為1∶5。離心轉速設為5600轉/min，探測到血層后，分別采用4℃、24℃和37℃生理鹽水進行洗滌，沖洗速度相同，為500 mL/min，洗滌液為回收血液的1.5倍。洗滌液溫度采用日立可控恒溫箱進行控制。

1.3檢測項目

當首次回收機儲血罐內血液達500 mL時，抽取2 mL作為洗液前血液標本，用于待測。血液洗滌后，抽取洗滌后血液10 mL，并保存于相對應溫度箱內，分別于洗滌后、洗滌后1h、洗滌后2h、洗滌后4h進行檢測。檢測項目包括pH值，Na+，K+，血紅蛋白（Hb），紅細胞壓積（Hct）。取洗滌后的紅細胞血樣，在電子顯微鏡下觀察各組血液中紅細胞的形態變化，記錄1000個紅細胞中變形紅細胞的數量。血氣分析采用i-STAT血氣分析儀進行檢測。

1.4統計學方法

采用SPSS16.0統計學軟件對數據進行分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用成組t檢驗或F檢驗，計數資料比較采用χ2 檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1洗滌前后血氣分析結果比較

洗滌后三組Hb、Hct、血鈉水平均較洗滌前顯著升高（P<0.01），而在隨后4h內并沒有顯著的變化，而24℃組和37℃組Hb、Hct升高幅度不如4℃組（P<0.05）。三組洗滌后血K+濃度較洗滌前顯著下降（P<0.01），隨后4h內并沒有顯著變化。三組洗滌前后血pH值沒有顯著變化（P>0.05）。見表1。

2.2不同溫度洗滌液洗滌前后紅細胞形態變化

不同溫度洗滌液前后紅細胞變形百分比比較見表2。洗滌后三組并沒有出現顯著紅細胞變形，隨著時間的延長，三組棘形紅細胞均有所增加（P<0.01），而溫度越高，隨著時間的延長，棘形紅細胞比例越高（P<0.01）。

3討論

外科手術用血的需求量越來越大，社會用血量猛增和獻血量的不足矛盾越來越嚴峻，術中自體血液回收是解決血源緊張與防止血源性傳染病的重要途徑，自體血回輸的深入研究和臨床上科學的應用，不但有利于降低患者醫療成本、降低輸血風險，還可以改進醫療質量、提高醫療服務的社會滿意度。紅細胞作為血液中最多的血細胞，可以反映血液的保存質量。紅細胞具有重要的生理功能，正常紅細胞的雙凹圓盤形狀對其發揮正常生理功能具有重要的意義。正常紅細胞的形態需要細胞膜以及細胞的蛋白質保持正常的結構，而外界的溫度、剪切力等會影響紅細胞的蛋白質結構，從而會出現細胞膜功能受損，細胞會出現棘形變[2，3]。研究顯示，紅細胞離體后，如果保持穩定的細胞外環境和內環境，紅細胞能夠存活，并能維持其正常生理功能[4，5]。紅細胞可以離體存活，那么盡量延長其存活時間，對維持血液保存質量具有重要的意義。

既往有研究顯示，高溫會影響紅細胞的形態結構，并且溫度越高，隨著時間的延長，棘形紅細胞的比例越高，影響紅細胞正常的生理功能[6-8]。研究顯示，隨著溫度的增加，紅細胞會發生熱穿孔而導致細胞膜通透性增加，導致熱溶血[9，10]。當溫度超過紅細胞能夠承受的范圍時，高溫破壞細胞膜的穩定，導致細胞膜骨架組織變化。在本次研究中，隨著時間的延長，三組均有不同數量的紅細胞發生棘形變，而4℃組棘形紅細胞數量最少，其次為24℃組，37℃組最多，說明低溫能夠盡可能延長紅細胞正常形態的維持時間。本次研究均顯示，在洗滌后，血紅蛋白和紅細胞壓積均有顯著升高，但是4℃組升高更顯著，具體機制還不十分明確，但這個現象說明低溫洗滌液能夠為血液回輸提供更好的紅細胞功能。紅細胞的形態受到溫度、所處環境等多種因素的影響[11，12]。本次研究中所有患者均采用生理鹽水作為洗滌液，洗滌后，血鈉濃度均顯著升高，因此，在4℃環境下，隨著時間的延長，紅細胞仍然出現了不同程度的棘形變化。有研究比較枸櫞酸鈉-枸櫞酸-葡萄糖-磷酸二氫鈉-氯化鈉-腺嘌呤-甘露醇（MAP液）替代生理鹽水用于自體血回收洗滌液，并與生理鹽水比較，顯示MAP液能更好地維持紅細胞的正常形態[13]。

綜上所述，自體血回輸過程中，4℃的洗滌液對紅細胞形態的維持優于常溫和37℃，尤其隨著時間的延長，這些優勢更加明顯。另外，即使在4℃，采用生理鹽水作為洗滌液，隨著時間的延長，仍然會出現棘形變，因此在臨床中，應盡量縮短血液回輸的時間。

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（收稿日期：2013-12-09）

綜上所述，自體血回輸過程中，4℃的洗滌液對紅細胞形態的維持優于常溫和37℃，尤其隨著時間的延長，這些優勢更加明顯。另外，即使在4℃，采用生理鹽水作為洗滌液，隨著時間的延長，仍然會出現棘形變，因此在臨床中，應盡量縮短血液回輸的時間。

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（收稿日期：2013-12-09）

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（收稿日期：2013-12-09）