Bcl—2與S100A6在不同子宮平滑肌腫瘤中的表達及意義

宋亭亭+李美蓉+雅玲

子宮平滑肌肉瘤（LMS）及30例富于細胞型子宮平滑肌瘤（CL）應用免疫組化的方法檢測Bcl-2和S100A6蛋白的表達。結果 UL組、CL組Bcl-2蛋白陽性表達率明顯高于LMS組（P<0.05），UL組和CL組Bcl-2蛋白陽性表達率無統計學差異；LMS組S100A6蛋白陽性表達率明顯高于UL組（P<0.05），LMS組S100A6蛋白陽性表達率明顯高于CL組（P<0.05）。結論 本研究結果提示，Bcl-2蛋白和S100A6蛋白的表達可能在子宮平滑肌腫瘤的發生、發展中起重要作用。

[關鍵詞] 子宮平滑肌腫瘤；Bcl-2；S100A6

[中圖分類號] R737.33 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）14-0042-03

子宮平滑肌腫瘤是最常見的子宮腫瘤，常見于30～50歲婦女。子宮平滑肌腫瘤有良性、交界性與惡性之分，常見的良性腫瘤為子宮平滑肌瘤，惡性為子宮平滑肌肉瘤最常見，臨床上比較常見的交界性腫瘤為富于細胞型平滑肌瘤，其預后一般好，但組織病理學與平滑肌肉瘤難以鑒別，容易誤診，且近年來發病率顯著增高。本文通過Bcl-2及S100A6在不同平滑肌腫瘤中的表達為臨床病理診斷提供實驗依據，并以期為鑒別子宮平滑肌腫瘤良惡性提供輔助診斷指標。

1資料與方法

1.1一般資料

選取山西醫科大學第一臨床醫院2006～2012年手術切除且資料完整的良性平滑肌瘤30例，富于細胞型平滑肌瘤30例，平滑肌肉瘤10例。所有子宮平滑肌瘤組織蠟塊為4 μm切片，其病理診斷均根據已知的診斷標準。

1.2試劑

Bcl-2（兔抗人單克隆抗體）、S100A6（兔抗人單克隆抗體）、山羊抗兔二抗均購自武漢博士德生物公司。

1.3 免疫組化化學

石蠟標本作4 μm連續切片，常規脫蠟及復水，PH6.0枸櫞酸液高壓熱修復，3%H2O2消除內源性過氧化物酶20 min，5%BSA封閉，滴加一抗4℃過夜，滴加山羊抗兔二抗20 min，37℃滴加SABC30 min，后DAB顯色，蘇木素復染，脫水，樹膠封片。每次實驗以PBS代替一抗作為陰性對照，以已知陽性片作為陽性對照。

1.4 免疫組化結果判定

Bcl-2的效應產物為棕色顆粒，分布于細胞漿，S100A6效應產物為棕色顆粒，分布于細胞核。在400倍鏡視野下隨機選取切片中至少5個區域，計數陽性染色細胞的百分數，取其平均值為該切片的陽性細胞百分數，可分為5級：0分：染色細胞<5%；1分：染色細胞5%～25%；2分：染色細胞25%～50%；3分：染色細胞：50%～75%；4分：染色細胞>75%。染色強度分為4級：0分：不顯色；1分：淺黃色；2分：棕黃色；3分：深棕色。兩者相加為最終免疫組化結果（0～1為-，2～3為+，4～5為++，6～7為+++）。

1.5 統計學方法

采用SPSS17.0統計軟學件進行統計處理，計數資料的組間比較采用χ2檢驗，檢驗水準為0.05，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

在30例良性平滑肌瘤（UL）中，Bcl-2陽性表達28例（93.3%），S100A6陽性表達9例（30.0%）；30例富于細胞型平滑肌瘤（CL）中，Bcl-2陽性表達27例（90.0%），S100A6陽性表達17例（56.7%）；10例子宮平滑肌肉瘤（LMS）中，Bcl-2陽性表達4例（40.0%），S100A6的陽性表達9例（90.0%）。UL組Bcl-2表達陽性率明顯高于LMS組（P<0.05﹚，CL組Bcl-2表達陽性率明顯高于LMS組（P<0.05﹚；CL組S100A6表達陽性率明顯高于UL組（P<0.05﹚，LMS組S100A6表達陽性率明顯高于UL組、CL組（P<0.05﹚。見表1、2。

3討論

子宮平滑肌腫瘤是婦科最常見的腫瘤，由平滑肌和結締組織組成，常見于30～50歲婦女，據尸檢統計，30歲以上的婦女約20%有子宮肌瘤。因肌瘤多無或很少有癥狀，臨床報道發病率遠低于肌瘤真實發病率[1]。其組織學分為三大類：良性子宮平滑肌瘤（UL），子宮平滑肌肉瘤（LMS），交界性子宮平滑肌瘤（CL）。子宮肉瘤少見，惡性程度高，占子宮惡性腫瘤的2%-4%，占女性生殖道惡性腫瘤的1%[1]，大多數預后極差。交界性子宮平滑肌腫瘤有多種類型，富于細胞型子宮平滑肌瘤是交界性子宮平滑肌瘤中的一種[2]，占子宮平滑肌腫瘤的3.7%[3]，具有生長迅速、容易復發及具有惡變傾向的特點。目前其發病機制尚未完全闡明。富于細胞型子宮肌瘤雖然臨床表現為良性，但是在短期內增長迅速，應盡早手術或術后加強隨訪[4]，在組織病理學上，因鏡下細胞可異常豐富，甚至出現個別異型細胞[5]，與平滑肌肉瘤難以鑒別，容易誤診，且近年來發病率顯著提高，因而給日常診療工作帶來很大的困難。

Bcl-2蛋白是Bcl-2 原癌基因的編碼產物，可以促進細胞的存活。Bcl-2蛋白家族成員中有些促進凋亡，如Bad，有些阻止細胞凋亡，如Bcl-2。有些細胞因為缺乏營養因素或者因為其他刺激，從而凋亡，而Bcl-2通過在體內或體外增加其表達產物，能夠抑制細胞的凋亡，還有細胞通常是由于生長因子的需求而進行復制的，而Bcl-2蛋白可以降低細胞對生長因子的需求[6]。有資料顯示，Bcl-2表達陽性率高的細胞不僅壽命長，而且細胞凋亡進程緩慢，從而引起細胞的堆積，繼而導致腫瘤的發生[7]。因此，Bcl-2蛋白對腫瘤的生長起到重要的作用。本研究顯示Bcl-2在UL和CL組織中的表達高于LMS組，推測Bcl-2在UL、CL的生長中發揮重要的作用。由以上可見，在良性腫瘤及交界性腫瘤中Bcl-2呈高表達，在惡性腫瘤中呈低表達，隨著惡性程度的升高，其表達越低，說明CL是有別于惡性腫瘤的。

S100A6是鈣結合蛋白S100家族成員之一，是由Kuznicki和Filipek最先在Ehrlich腹水瘤中檢驗出來的[8]。S100A6在人體內參與細胞周期活動、腫瘤生長、細胞分化及細胞外基質分泌活動等，以上這些生物學功能都是通過與靶蛋白及鈣離子的相互作用而發生的。S100蛋白家族是一類非泛素化、EF-手型鈣結合蛋白，其在細胞內的分布很廣泛，其分布受細胞分裂狀態和鈣離子濃度的影響，當細胞內鈣離子濃度或細胞分裂狀態變化時，細胞進入S期的時間也不一樣，S100A6的分布也會發生變化[9]。S100A6對卵巢子宮異位內膜的凋亡起到抑制作用[10]；在惡性程度高、淋巴結有轉移的宮頸癌組織中，S100A6蛋白的表達明顯升高[11]；骨肉瘤患者術后生存時間的長短，不僅取決于腫瘤的轉移程度，還取決于S100A6在骨肉瘤中的表達[12]。在胃癌中S100A6呈現高表達；S100A6通過對乳腺細胞MCF-7的生物學促進作用，參與乳腺癌的發生發展[13]；在惡性程度高、淋巴結有轉移的甲狀腺組織中S100A6呈現出高表達[14]。在肝癌、黑色素瘤、結直腸腫瘤、胃癌、乳腺癌、甲狀腺癌中，S100A6呈現高表達，由此，推測S100A6的異常表達與腫瘤的增殖和分化有著千絲萬縷的關系。目前S100A6在子宮平滑肌腫瘤中的研究較少，本實驗研究表明：S100A6蛋白表達陽性率在LMS組顯著高于UL組（P<0.05﹚和CL組﹙P<0.05﹚，S100A6在惡性子宮平滑肌腫瘤中的表達中染色程度深，表達增強，與S100A6在其他惡性腫瘤如骨肉瘤、黑色素瘤等有一致性，而在良性子宮平滑肌腫瘤中呈現出低表達，提示S100A6的異常表達與惡性腫瘤細胞的增殖和分化有密切的關系。

綜上所述，Bcl-2蛋白的表達隨子宮平滑肌腫瘤的惡性程度的增加而降低，S100A6的表達隨子宮平滑肌腫瘤惡性程度的增加而增加，故在USMT中應用免疫組化檢測Bcl-2、S100A6的表達可提示腫瘤的良惡性，為臨床提供診斷依據。另外可進一步證明，子宮富于細胞型平滑肌瘤可能是一種介于良惡性子宮平滑肌腫瘤間的特殊類型的腫瘤。

[參考文獻]

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[14] 李志鋒， 劉進忠， 李冠軍，等. S100A6蛋白在甲狀腺癌中檢測的意義[J]. 中國藥物經濟學，2013，（8）：284-285.

（收稿日期：2014-02-17）

S100A6是鈣結合蛋白S100家族成員之一，是由Kuznicki和Filipek最先在Ehrlich腹水瘤中檢驗出來的[8]。S100A6在人體內參與細胞周期活動、腫瘤生長、細胞分化及細胞外基質分泌活動等，以上這些生物學功能都是通過與靶蛋白及鈣離子的相互作用而發生的。S100蛋白家族是一類非泛素化、EF-手型鈣結合蛋白，其在細胞內的分布很廣泛，其分布受細胞分裂狀態和鈣離子濃度的影響，當細胞內鈣離子濃度或細胞分裂狀態變化時，細胞進入S期的時間也不一樣，S100A6的分布也會發生變化[9]。S100A6對卵巢子宮異位內膜的凋亡起到抑制作用[10]；在惡性程度高、淋巴結有轉移的宮頸癌組織中，S100A6蛋白的表達明顯升高[11]；骨肉瘤患者術后生存時間的長短，不僅取決于腫瘤的轉移程度，還取決于S100A6在骨肉瘤中的表達[12]。在胃癌中S100A6呈現高表達；S100A6通過對乳腺細胞MCF-7的生物學促進作用，參與乳腺癌的發生發展[13]；在惡性程度高、淋巴結有轉移的甲狀腺組織中S100A6呈現出高表達[14]。在肝癌、黑色素瘤、結直腸腫瘤、胃癌、乳腺癌、甲狀腺癌中，S100A6呈現高表達，由此，推測S100A6的異常表達與腫瘤的增殖和分化有著千絲萬縷的關系。目前S100A6在子宮平滑肌腫瘤中的研究較少，本實驗研究表明：S100A6蛋白表達陽性率在LMS組顯著高于UL組（P<0.05﹚和CL組﹙P<0.05﹚，S100A6在惡性子宮平滑肌腫瘤中的表達中染色程度深，表達增強，與S100A6在其他惡性腫瘤如骨肉瘤、黑色素瘤等有一致性，而在良性子宮平滑肌腫瘤中呈現出低表達，提示S100A6的異常表達與惡性腫瘤細胞的增殖和分化有密切的關系。

綜上所述，Bcl-2蛋白的表達隨子宮平滑肌腫瘤的惡性程度的增加而降低，S100A6的表達隨子宮平滑肌腫瘤惡性程度的增加而增加，故在USMT中應用免疫組化檢測Bcl-2、S100A6的表達可提示腫瘤的良惡性，為臨床提供診斷依據。另外可進一步證明，子宮富于細胞型平滑肌瘤可能是一種介于良惡性子宮平滑肌腫瘤間的特殊類型的腫瘤。

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（收稿日期：2014-02-17）

S100A6是鈣結合蛋白S100家族成員之一，是由Kuznicki和Filipek最先在Ehrlich腹水瘤中檢驗出來的[8]。S100A6在人體內參與細胞周期活動、腫瘤生長、細胞分化及細胞外基質分泌活動等，以上這些生物學功能都是通過與靶蛋白及鈣離子的相互作用而發生的。S100蛋白家族是一類非泛素化、EF-手型鈣結合蛋白，其在細胞內的分布很廣泛，其分布受細胞分裂狀態和鈣離子濃度的影響，當細胞內鈣離子濃度或細胞分裂狀態變化時，細胞進入S期的時間也不一樣，S100A6的分布也會發生變化[9]。S100A6對卵巢子宮異位內膜的凋亡起到抑制作用[10]；在惡性程度高、淋巴結有轉移的宮頸癌組織中，S100A6蛋白的表達明顯升高[11]；骨肉瘤患者術后生存時間的長短，不僅取決于腫瘤的轉移程度，還取決于S100A6在骨肉瘤中的表達[12]。在胃癌中S100A6呈現高表達；S100A6通過對乳腺細胞MCF-7的生物學促進作用，參與乳腺癌的發生發展[13]；在惡性程度高、淋巴結有轉移的甲狀腺組織中S100A6呈現出高表達[14]。在肝癌、黑色素瘤、結直腸腫瘤、胃癌、乳腺癌、甲狀腺癌中，S100A6呈現高表達，由此，推測S100A6的異常表達與腫瘤的增殖和分化有著千絲萬縷的關系。目前S100A6在子宮平滑肌腫瘤中的研究較少，本實驗研究表明：S100A6蛋白表達陽性率在LMS組顯著高于UL組（P<0.05﹚和CL組﹙P<0.05﹚，S100A6在惡性子宮平滑肌腫瘤中的表達中染色程度深，表達增強，與S100A6在其他惡性腫瘤如骨肉瘤、黑色素瘤等有一致性，而在良性子宮平滑肌腫瘤中呈現出低表達，提示S100A6的異常表達與惡性腫瘤細胞的增殖和分化有密切的關系。

綜上所述，Bcl-2蛋白的表達隨子宮平滑肌腫瘤的惡性程度的增加而降低，S100A6的表達隨子宮平滑肌腫瘤惡性程度的增加而增加，故在USMT中應用免疫組化檢測Bcl-2、S100A6的表達可提示腫瘤的良惡性，為臨床提供診斷依據。另外可進一步證明，子宮富于細胞型平滑肌瘤可能是一種介于良惡性子宮平滑肌腫瘤間的特殊類型的腫瘤。

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（收稿日期：2014-02-17）