結核性腦膜炎腦脊液中TNF—α、IL—6和IL—18表達關系的研究

杜一琴+劉忠達

[摘要] 目的 觀察結核性腦膜炎患者腦脊液中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）和白細胞介素-18（IL-18）的表達特征，關注其臨床價值。 方法 選取120例結核性腦膜炎患者作為觀察組，應用ELISA檢測觀察組腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18的表達。 結果 觀察組不同分期患者TNF-α、IL-6和IL-18的表達差異有統計學意義，觀察組中TNF-α、IL-6和IL-18的表達具有相關性。 結論 結核性腦膜炎患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18高表達及協同性對促進患者病程的進展可能有一定價值，聯合檢測TNF-α、IL-6和IL-18的表達可能對判斷病情程度有一定價值。

[關鍵詞] 結核性腦膜炎；腫瘤壞死因子-α；白細胞介素-6；白細胞介素-18

[中圖分類號] R529.3 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）14-0076-03

結核是一種世界性的嚴重威脅人類健康的感染性疾病，發展中國家患者占90%以上[1]。結核性腦膜炎（簡稱結腦）是結核病發展過程中的嚴重病變，也是神經系統結核病最常見的類型，被認為是肺外結核中的重癥結核病，是由結核桿菌侵入蛛網膜下腔而引起軟腦膜、蛛網膜的病變，進而累及腦實質和腦血管[2]。結腦的早期診斷主要依靠腦脊液常規、生化、細胞學檢測。近來研究顯示，結腦病變進展中多種炎性因子表達異常，尤其是腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）和白細胞介素-18（IL-18）高表達被認為與結核的進展有關[3]。本實驗通過對120例結腦患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18的表達進行檢測，關注其相關性及對病變進展的價值，以期為臨床工作提供理論支持。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2010年1月～2011年12月在我院住院治療的結核性腦膜炎患者作為觀察組，共120例，其中男68例，女52例，年齡24～58歲，平均（39.1±4.3）歲。患者均經頭顱CT 和MRI 檢測、體格檢查、腦脊液檢查（細胞學、生化檢測、微生物學以及病原學等）確診。排除標準：①伴有其他嚴重感染的患者；②伴有嚴重內臟器官疾病的患者；③自身免疫缺陷患者。本組患者Ⅰ期30例，其中男16例，女14例，年齡24～57歲，平均（39.0±4.1）歲；Ⅱ期40例，其中男21例，女19例，年齡25～58歲，平均（39.1±4.2）歲；Ⅲ期50例，其中男31例，女19例，年齡25～56歲，平均年齡（39.2±4.6）歲。三組患者一般臨床資料比較中差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 TNF-α、IL-6和IL-18的檢測方法

TNF-α、IL-6和IL-18檢測試劑盒均購自武漢博士德生物技術有限公司。抽取患者腦脊液2 mL后，應用ELISA法檢測TNF-α、IL-6和IL-18的表達，嚴格按實驗步驟操作，嚴格質控。

1.3 分期

根據英國醫學研究委員會的分類方法分為三期[4]。Ⅰ期：無特異性癥狀和體征、無意識模糊、無神經系統功能受損；Ⅱ期：腦膜刺激征、輕度神經系統功能受損（如神經麻痹）、運動功能異常；Ⅲ 期：驚厥或抽搐、昏睡或昏迷、嚴重神經系統功能受損。

1.4 統計學處理

數據均采用SAS 6.12進行統計分析，兩組間比較采用t檢驗，同時對數據進行線性相關分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察組不同分期患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18表達的比較

觀察組中Ⅲ期患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18的表達明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，見表1。

2.2 觀察組患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18表達的相關性分析

經線性相關分析顯示，觀察組患者腦脊液中TNF-α和IL-6（r=0.47， P=0.0153）、TNF-α和IL-18（r=0.48， P=0.0132）、IL-6和IL-18（r=0.45， P=0.0187）的表達均呈正相關。

3 討論

結核性腦膜炎是由結核桿菌引起的腦膜和脊膜的非化膿性炎癥性疾病，不僅具有較高的致死率，也具有較高的致殘率[5，6]。本病一般呈慢性經過，其癥狀常輕重不等，其潛在的病理在機體的表達常多種多樣[7]。在病變早期，腦膜、脈絡叢和室管膜均具有炎癥反應，腦脊液生成增多，蛛網膜顆粒吸收下降，形成交通性腦積水，顱內壓升高。近來多項研究認為血清及腦脊液中相關細胞因子的異常表達是促進病變進展的重要因素[8，9]。細胞因子是由免疫系統細胞以及其他類型細胞主動分泌的一類小分子量的可溶性蛋白質，包括淋巴因子、干預素、白介素、腫瘤壞死因子、趨化因子和集落刺激因子等，是免疫細胞間以及免疫系統細胞與其他類型細胞間的聯系中心。能有效改變分泌細胞自身或其他細胞的行為或性質，通過與細胞特異的膜受體而起作用[3]。與結核相關的細胞因子較多，而本實驗研究的TNF-α、IL-6和IL-18均為促炎細胞因子的典型代表。TNF-α主要由活化的單核細胞產生，可以促進炎癥反應，具有調節機體免疫功能的作用。TNF-α在作用過程中還可以介導細胞的凋亡過程，促進細胞的再生過程，因此其作用較為廣泛。TNF-α還可以通過受體（TNFR1和TNFR2）促進間質細胞的增生繁殖。多項研究還顯示，TNF-α可以和細胞因子一起參與機體的生長發育和維持內環境穩定，對介導感染、創傷及免疫應答反應有一定價值[9]。TNF-α高表達后還可以損傷細胞、促進趨化因子的運動、調節內環境的作用[10]。也有觀點認為，TNF-α具有廣泛的生物活性，具有強大的抗腫瘤作用，同時可以有效地抗病毒、細菌和激活T細胞，誘發炎癥反應的作用[11]。IL-6由184個氨基酸殘基組成，是一種特異性的糖蛋白。IL-6主要由淋巴細胞產生，不僅是B細胞終末分化因子，還是啟動炎性級聯反應的重要的促炎介質。也有研究顯示，IL-6可以誘導B細胞克隆和活化作用，同時能增強NK細胞的殺傷作用[12]。由于肺結核患者多呈現細胞免疫感染性，結核分枝桿菌能夠通過對機體單核巨噬細胞合成刺激而釋放IL-6，當其抵達機體循環系統后，就會引起發熱等炎癥反應[3]。IL-18也是體內重要的促炎介質。IL-18在結構上屬于IL-1家族，主要以無活性的前體方式存在于人類單核細胞、巨噬細胞和上皮細胞中。當其在細胞內的胱氨酸蛋白酶作用于裂解掉IL-1B部分后成為有活性的IL-18[13]。因此其表達升高時可以對NK細胞的增殖有重要作用。有觀點認為，IL-18可以誘導Th0細胞向Th1細胞分化，此時IL-18的功能具有多樣性[14]，即不僅具有經典的促炎癥反應作用，還具有調節凋亡、促進趨化性和加速免疫性疾病的進展。本實驗的研究結果顯示，觀察組中Ⅲ期患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18的表達明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，提示TNF-α、IL-6和IL-18與結腦病變程度和病變發展有關，也提示三者高表達可能是加速病變進展的重要蛋白。實驗顯示，患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18之間的表達具有正相關性，提示三者具有協同正向作用，也提示三者具有密切相關的級聯反應。結核性腦膜炎患者TNF-α、IL-6和IL-18的升高可引起細胞的損害，主要是當結核桿菌進入腦膜后引起大量巨噬細胞聚集，此時TNF-α大量產生，并刺激機體分泌大量的IL-6和IL-18，一方面通過水解細胞膜磷脂，引起腦膜完整性破壞及神經細胞損傷，另一方面TNF-α、IL-6和IL-18可以刺激機體的相關細胞產生大量的氧自由基和活性氧，加重對神經細胞的損傷，而神經細胞壞死后也可加重氧自由基的生成。也有觀點認為，TNF-α、IL-6和IL-18產生物具有強大的釋放TNF-α的能力，此時TNF-α的生成明顯增多，有效激活多種級聯因子，加速炎癥反應的發生和進展[15-17]。endprint

總之，結核性腦膜炎患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18高表達及協同性對確定患者病程的進展可能有一定價值，聯合檢測TNF-α、IL-6和IL-18的表達可能對判斷病情程度有一定價值。

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（收稿日期：2013-11-14）endprint

總之，結核性腦膜炎患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18高表達及協同性對確定患者病程的進展可能有一定價值，聯合檢測TNF-α、IL-6和IL-18的表達可能對判斷病情程度有一定價值。

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