納洛酮對右美托咪定麻醉小鼠催醒作用的研究

李 翠 余劍波 周 汾 陳慧榮 王 曼 宮麗榮 穆 蕊 董樹安

納洛酮對右美托咪定麻醉小鼠催醒作用的研究

李 翠 余劍波△周 汾 陳慧榮 王 曼 宮麗榮 穆 蕊 董樹安

目的 探討納洛酮對右美托咪定麻醉小鼠有無催醒作用及其作用機制。方法30只清潔級昆明種小鼠隨機分成納洛酮組（NAL組）、阿替美唑組（ATI組）和生理鹽水組（NS組）3組(n=10)。各組小鼠均腹腔注射右美托咪定1 mg/kg，給藥后90 min，各組分別腹腔注射納洛酮2 mg/kg、阿替美唑2 mg/kg與生理鹽水10 mL/kg，于右美托咪定給藥前及給藥后5、15、30、60、90、95、105、120、180 min評估鎮靜、鎮痛水平，并觀察小鼠蘇醒時間（以翻正反射恢復為標準）。結果各組在右美托咪定給藥5 min后即表現明顯的鎮靜、鎮痛效應，約在60 min時達到峰效應和在180 min恢復；阿替美唑和納洛酮均可降低右美托咪定的鎮靜、鎮痛效應。NAL組在給藥后95、105、120、180 min鎮靜評分均低于NS組，在95、105、120 min鎮靜評分均高于ATI組；NAL組在給藥后95、105、120 min鎮痛評分均低于NS組(均P＜0.05)，與ATI組差異均無統計學意義。ATI組、NAL組小鼠的蘇醒時間短于NS組[min：(3.0±1.9)vs(5.0± 2.5)vs(91.0±5.7)；F=1 793.368，P＜0.05]，NAL組與ATI組差異無統計學意義。結論納洛酮對右美托咪定麻醉小鼠具有一定的催醒作用。

麻醉；納洛酮；右美托咪啶；鎮痛；阿替美唑；催醒作用；蘇醒時間

右美托咪定是一種新型的高選擇性α2-腎上腺素能受體激動劑，可以產生劑量依賴性的鎮靜、鎮痛和抗焦慮作用，還可改善手術期間的心血管穩定性和提供器官保護作用[1]，在諸多領域的臨床實踐中顯示出優越性和應用價值，但應用右美托咪定長時間鎮靜及全麻術后患者的意識恢復時間較長。任何一種麻醉藥的應用都需要尋找到一種有效的拮抗藥來作為安全保障，阿替美唑是一種具有高度選擇性的α2-腎上腺素能受體拮抗劑，但其尚未應用于臨床，需要更多的臨床安全性研究。納洛酮是一種安全而有效的全麻催醒藥，是阿片受體競爭性拮抗劑，有文獻表明納洛酮對安定、氯胺酮等有一定拮抗作用[2]，但有關其對右美托咪定有無拮抗作用的研究較少，本研究旨在觀察納洛酮對右美托咪定麻醉小鼠有無催醒作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組 清潔級昆明種小鼠30只，雌雄各半，體質量（20±2）g，由軍事醫學科學院實驗動物中心提供，采用隨機數字表法分成生理鹽水組（NS組）、阿替美唑組（ATI組）和納洛酮組（NAL組）3組，每組10只。

1.2 實驗藥品 納洛酮由重慶萊美藥業股份有限公司生產（批號：1007012）；右美托咪定由江蘇恒瑞醫藥股份有限公司生產（批號：11031034）；阿替美唑由南京博鴻電子材料開發有限公司生產（批號：104054-27-5）；生理鹽水由廣東大冢制藥有限公司生產（批號：1110243）。

1.3 實驗方法 通過動物面罩吸入純氧，小鼠腹腔注射右美托咪定1 mg/kg[3]，在右美托咪定給藥后90 min各組再分別腹腔注射生理鹽水10 mL/kg、阿替美唑2 mg/kg[3]和納洛酮2 mg/kg[4]，動態觀察小鼠的行為學表現，于右美托咪定給藥前（基礎值）、給藥后5、15、30、60、90、95、105、120和180 min時分別進行鎮靜、鎮痛評分。評分標準參照Granholm等[5]并作適當調整，鎮靜評分包括自主體位、對聲音刺激的反應、下頜及舌張力3個方面，標準如下，自主體位：不能站立計4分；躺下，站立困難，計3分；躺下，能夠困倦站立，計1分；正常，計0分。對聲音刺激的反應（敲打不銹鋼手術臺面）：對聲響刺激無反應，計3分；表現耳動、睜眼，計2分；表現耳動、睜眼、肢體瞬間抽動，計l分；有抬頭掙扎表現，計0分。下頜及舌張力：牽拉舌，可輕易拉出口腔，且不能自主復位，計3分；牽拉舌，可拉出口腔，但能自主復位計2分；牽拉舌時有明顯阻力，計1分；牽拉時逃避并搖頭，計0分。鎮痛評分：鉗夾鼠爪，痛覺完全消失，計3分；痛覺明顯降低，計2分；痛覺輕度障礙，計1分；痛覺明顯與給藥前相同，計0分。

觀察小鼠翻正反射消失持續時間（蘇醒時間）。小鼠連續3次仰臥后5 s不能恢復站立為翻正反射消失，連續3次仰臥后恢復站立為翻正反射恢復。

2 結果

2.1 納洛酮對右美托咪定麻醉小鼠鎮靜評分的影響 右美托咪定給藥5 min后各組鎮靜評分較給藥前均明顯增加(P＜0.05)，且在給藥后大約60 min各組達到最大鎮靜效應。給藥后90 min各組小鼠分別給予生理鹽水、阿替美唑及納洛酮腹腔注射，在給藥后120、180 min ATI組鎮靜評分與給藥前基礎值差異無統計學意義，在180 min NAL組鎮靜評分與給藥前基礎值差異無統計學意義。NAL組在給藥后95、105、120、180 min鎮靜評分均低于NS組，在95、105、120 min鎮靜評分均高于ATI組(均P＜0.05)。見表1。

2.2 納洛酮對右美托咪定麻醉小鼠鎮痛評分的影響 右美托咪定給藥5 min后各組鎮痛評分較給藥前均明顯增加(P＜0.05)，且在給藥后大約60 min各組達到最大鎮痛效應，給藥后90 min各組小鼠分別給予生理鹽水、阿替美唑及納洛酮腹腔注射，在給藥后180 min NS組鎮痛評分與給藥前基礎值差異無統計學意義，在105、120、180 min ATI組和NAL組鎮痛評分與給藥前基礎值差異均無統計學意義。NAL組在給藥后95、105、120 min鎮痛評分均低于NS組(P＜0.05)，與ATI組差異均無統計學意義。見表2。

2.3 納洛酮對右美托咪定麻醉小鼠蘇醒時間的影響 納洛酮、阿替美唑均能明顯縮短右美托咪定麻醉小鼠的蘇醒時間[分別是（5.0±2.5）、（3.0±1.9）min]，且與NS組（min:91.0±5.7）比較差異均有統計學意義(F=1 793.368,P＜0.05)，NAL組與ATI組差異無統計學意義。

Tab.1 Sedative scores of mice in each group表1 各組鎮靜評分的變化 （n=10，分，±s）

Tab.1 Sedative scores of mice in each group表1 各組鎮靜評分的變化 （n=10，分，±s）

＊P＜0.05；a與基礎值比較，P＜0.05；表2同

組別NS組(1) ATI組(2) NAL組(3) F基礎值5 min 5.0±1.0a4.6±0.7a4.7±0.5a0.709 15 min 7.6±0.7a7.3±0.5a7.2±0.4a1.444 30 min 7.5±0.7a7.6±0.5a8.0±0.8a1.465 60 min 8.2±0.4a8.0±0.5a8.3±0.5a1.105 90 min 8.1±0.7a7.6±0.5a7.7±0.5a2.011 F 149.969＊415.622＊419.694＊P(1)∶(3) P(2)∶(3) 000-------------95 min 7.7±0.8a2.5±0.5a4.5±0.5a175.810＊＜0.001 ＜0.001 105 min 6.1±0.6a1.3±0.5a2.3±0.5a243.887＊＜0.001 ＜0.001 120 min 5.0±0.7a0.6±0.5 1.4±0.5a168.545＊＜0.001 0.012 180 min 2.9±1.0a0.5±0.7 0.5±0.5 32.604＊＜0.001 1.000

Tab.2 Analgesic scores of mice in each group表2 各組鎮痛評分的變化 （n=10，分，±s）

Tab.2 Analgesic scores of mice in each group表2 各組鎮痛評分的變化 （n=10，分，±s）

組別NS組(1) ATI組(2) NAL組(3) F基礎值5 min 1.2±0.4a1.2±0.4a1.5±0.5a1.421 15 min 1.8±0.4a1.9±0.6a2.0±0.5a0.415 30 min 2.1±0.3a2.1±0.6a2.1±0.3a＜0.001 60 min 2.5±0.5a2.5±0.5a2.5±0.5a＜0.001 90 min 2.5±0.5a2.3±0.5a2.3±0.5a0.537 180 min 0.6±0.5 0.2±0.6 0.1±0.3 2.739 F 30.723＊33.060＊52.105＊P(1)∶(3) P(2)∶(3) 000-------------95 min 2.4±0.5a0.8±0.6a0.9±0.3a31.435＊＜0.001 1.000 105 min 2.0±0.7a0.5±0.5 0.3±0.5 27.105＊＜0.001 1.000 120 min 1.5±0.5a0.3±0.5 0.3±0.5 19.343＊＜0.001 1.000 --

3 討論

本研究中動物在注射右美托咪定后約60 min鎮靜、鎮痛達到峰效應，約180 min自然恢復，選擇在注射右美托咪定后90 min時給藥便于觀察，本研究觀察右美托咪定鎮靜和鎮痛的強度和作用時間與前期研究一致[5]。右美托咪定是一種高選擇性α2-腎上腺素能受體激動劑，通過激動α2-腎上腺素能受體而產生鎮靜、抗焦慮和鎮痛等效應，而阿替美唑是一種具有高度選擇性的α2-腎上腺素能拮抗劑，可用來拮抗由α2-腎上腺素能激動劑所產生的鎮靜、催眠、鎮痛及其他作用。Granholm等[5]研究表明阿替美唑可有效拮抗右美托咪定的作用，本實驗結果也表明阿替美唑在給藥后可明顯降低鎮靜、鎮痛水平并顯著縮短蘇醒時間，提示其對用右美托咪定麻醉小鼠有明顯的催醒作用。

本研究結果顯示，納洛酮可降低右美托咪定麻醉小鼠的鎮靜、鎮痛評分，且明顯縮短小鼠的蘇醒時間，提示納洛酮對右美托咪定麻醉小鼠具有一定的催醒作用。納洛酮雖然也可縮短翻正反射消失持續時間，但其并非α2受體的特異拮抗藥。有研究表明使用右美托咪定患者血漿β-內啡肽在早期具有一定增高反應，右美托咪定發揮作用可能通過促進阿片肽的釋放而間接與阿片受體相關[6]。納洛酮是阿片受體競爭性拮抗劑，可有效地拮抗阿片樣物質和內源性阿片肽，能迅速通過血腦屏障，拮抗內啡肽所介導的中樞抑制作用，促進蘇醒。另有研究表明右美托咪定與嗎啡合用可產生協同作用，從而減少嗎啡的使用量[7]，Riedl等[8]研究認為，α2受體和阿片受體在傷害性感覺初級傳入神經纖維上存在共表達區域，這兩種受體在皮膚外周神經末稍和脊髓背角淺層均有廣泛共區，且與P物質所在區域相同。雖作用于不同的受體，納洛酮對右美托咪定的催醒作用，可能與α2受體和阿片受體激活之后的某種共同的生理、生化機制相關。另一方面，右美托咪定作用于中樞神經系統突觸后膜α2受體，活化抑制交感神經活性,避免交感神經的過度興奮[9-10]，而使用納洛酮后痛覺敏感增加而產生交感神經興奮現象。

綜上所述，納洛酮對右美托咪定麻醉小鼠具有一定的催醒作用，納洛酮可嘗試用于臨床拮抗右美托咪定，其作用機制有待進一步研究。

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（2014-05-01收稿 2014-07-18修回）

（本文編輯 陳麗潔）

Awaken Effect of Naloxon in Dexmedetomidine-Anesthetized Mice

LI Cui,YU Jianbo△,ZHOU Fen,CHEN Huirong,WANG Man,GONG Lirong,MU Rui,DONG Shuan
Deportment of Anesthesiology，Tianjin Nankai Hospital，Tianjin 300100，China
△

E-mail：yujianbo11@126.com

ObjectiveTo investigate the awaken effect of naloxon on dexmedetomidine anesthetized mice and its mechanism.MethodsThirty Kunming mice of clean grade were randomly divided into 3 groups which included NAL group(Naloxon group),ATI group（Atipamezole group）and NS group(Normal Saline group).All groups were given dexmedetomidine 1 mg·kg-1intraperitoneally.Naloxon 2 mg·kg-1,atipamezole 2 mg·kg-1and normal saline 10 mL·kg-1were randomly given intraperitoneally to the NAL,ATI and NS group respectively 90 minutes after dexmedetomidine administration. At timepoints prior to dexmedetomidine administration and 5,15,30,60,90,95,105,120,180 minutes after it,the sedative and analgesic effects besides recovery time(based on restore of righting reflex loss)were assessed.ResultsSedation and analgesia effects became apparent within 5 minutes,and peaked at approximately 60 minutes then spontaneously recovered at 180 minutes after injection of dexmedetomidine.The sedative and analgesic effects were reduced in both ATI and NAL groups.Compared with ATI group,the sedation scores were higher at 95,105 and 120 minutes after dexmedetomidine administration than those in NAL group(P＜0.05)but the scores were not statistically significant at 180 minutes between these two groups.Compared with NS group,the sedation scores were lower at time points of 95,105,120 and 180 minutes than those in NAL group(P＞0.05).The analgesic scores were not statistically significant at time points of 95,105,120 and 180 minutes between NAL group and ATI group,but they were lower in NAL group compared with NS group at timepoints of 95,105 and 120 minutes(P＞0.05).The recovery time in ATI and NAL group were shorter than that in NS group(F=1 793.368,P＜0.05),but it showed no statistical difference between ATI group and NAL group(P＞0.05).ConclusionNaloxone had a certain awaken effect on dexmedetomidine anesthetized mice.

anesthesia;naloxone;dexmedetomidine;analgesia;atipamezole;awaken effect;recovery time

R614.2

A

10.3969/j.issn.0253-9896.2014.12.009

天津醫學會麻醉學分會中青年科研培育基金項目

天津市南開醫院麻醉科（郵編300100）

△通訊作者 E-mail：yujianbo11@126.com