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小鼠卵母細胞減數分裂期間組蛋白乙酰化及其對卵母細胞成熟質量的影響

2014-07-07 06:24:48李靜心孟春花朱前明曹少先王慧利
江蘇農業學報 2014年2期
關鍵詞:小鼠

王 婧, 李靜心, 孟春花, 朱前明, 劉 勇, 曹少先, 王慧利

(1.南京農業大學動物科技學院,江蘇 南京 210095;2.江蘇省農業科學院畜牧研究所,江蘇 南京 210014;3.阜陽師范學院生命科學學院,安徽 阜陽 236041)

組蛋白乙酰化是表觀遺傳修飾的重要組成部分,在有絲分裂和減數分裂過程中發揮了重要的生物學功能[1-2]。組蛋白乙酰化與組蛋白去乙酰基酶(HDACs)密切相關,HDACs分為 I、II、III、IV 4 類亞型[3],主要負責組蛋白去乙酰化,并在活性受到抑制后乙酰化水平升高。哺乳動物中的研究多集中于廣譜性HDACs抑制劑處理卵母細胞改變乙酰化狀態[4-7],對減數分裂過程中具體調控組蛋白乙酰化的HDACs亞型知之不多。

哺乳動物中,生發泡(Germinal vesicle,GV)期卵母細胞組蛋白均高度乙酰化,但對于減數分裂過程中是否存在組蛋白乙酰化/去乙酰化的動態變化,不同研究間存在矛盾[4-11]。此外,利用HDACs抑制劑處理卵母細胞來研究組蛋白乙酰化對發育的影響,不同學者得到的結論并不相同[12-17],分析發現,上述研究所用HDACs抑制劑均為廣譜性藥物,是否因為這種廣譜性抑制導致了對發育影響的不確定性?因此,有必要進一步研究HDACs特異性抑制后組蛋白乙酰化對卵母細胞發育的影響。

本試驗以組蛋白H4K12乙酰化為標記,利用免疫熒光技術,首先對小鼠卵母細胞減數分裂過程中組蛋白乙酰化的表達模式進行研究,然后分別利用廣譜及特異性HDACs抑制劑處理減數分裂中的卵母細胞,以確定調控組蛋白乙酰化的HDACs亞型。在此基礎上,進一步明確減數分裂期間組蛋白乙酰化/去乙酰化的動態變化規律,最后就組蛋白乙酰化對卵母細胞成熟質量的影響進行探討,以期為闡明哺乳動物卵母細胞減數分裂過程中組蛋白乙酰化的調控機制提供理論基礎。……

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