小鼠卵母細胞減數(shù)分裂期間組蛋白乙酰化及其對卵母細胞成熟質(zhì)量的影響

王 婧， 李靜心， 孟春花， 朱前明， 劉 勇， 曹少先， 王慧利

(1.南京農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，江蘇 南京 210095;2.江蘇省農(nóng)業(yè)科學院畜牧研究所，江蘇 南京 210014;3.阜陽師范學院生命科學學院，安徽 阜陽 236041)

組蛋白乙酰化是表觀遺傳修飾的重要組成部分，在有絲分裂和減數(shù)分裂過程中發(fā)揮了重要的生物學功能［1-2］。組蛋白乙酰化與組蛋白去乙酰基酶(HDACs)密切相關，HDACs分為 I、II、III、IV 4 類亞型［3］，主要負責組蛋白去乙酰化，并在活性受到抑制后乙酰化水平升高。哺乳動物中的研究多集中于廣譜性HDACs抑制劑處理卵母細胞改變乙酰化狀態(tài)［4-7］，對減數(shù)分裂過程中具體調(diào)控組蛋白乙酰化的HDACs亞型知之不多。

哺乳動物中，生發(fā)泡(Germinal vesicle，GV)期卵母細胞組蛋白均高度乙酰化，但對于減數(shù)分裂過程中是否存在組蛋白乙酰化/去乙酰化的動態(tài)變化，不同研究間存在矛盾［4-11］。此外，利用HDACs抑制劑處理卵母細胞來研究組蛋白乙酰化對發(fā)育的影響，不同學者得到的結(jié)論并不相同［12-17］，分析發(fā)現(xiàn)，上述研究所用HDACs抑制劑均為廣譜性藥物，是否因為這種廣譜性抑制導致了對發(fā)育影響的不確定性?因此，有必要進一步研究HDACs特異性抑制后組蛋白乙酰化對卵母細胞發(fā)育的影響。

本試驗以組蛋白H4K12乙酰化為標記，利用免疫熒光技術，首先對小鼠卵母細胞減數(shù)分裂過程中組蛋白乙酰化的表達模式進行研究，然后分別利用廣譜及特異性HDACs抑制劑處理減數(shù)分裂中的卵母細胞，以確定調(diào)控組蛋白乙酰化的HDACs亞型。在此基礎上，進一步明確減數(shù)分裂期間組蛋白乙酰化/去乙酰化的動態(tài)變化規(guī)律，最后就組蛋白乙酰化對卵母細胞成熟質(zhì)量的影響進行探討，以期為闡明哺乳動物卵母細胞減數(shù)分裂過程中組蛋白乙酰化的調(diào)控機制提供理論基礎。……