HE4 對卵巢早期惡性腫瘤診斷中的價值

梁濟慈 景軍寧 馮暄 張慶華 郝勝菊

【摘要】卵巢癌在女性婦科腫瘤中致死率占首位，但其發病隱匿導致早期診斷困難。 隨著國內外研究的不斷深入，人附睪分泌蛋白 4（human epididymis secretory protein 4，HE4）在診斷早期卵巢癌方面的價值也越來越受到普遍關注。研究表明HE4是一個潛在的有效的卵巢腫瘤標記物HE4可能比CA125更具有高效性，檢測HE4可能對卵巢惡性腫瘤的診斷、病情和療效的監測有一定價值。

【關鍵詞】卵巢腫瘤；HE4；腫瘤標志物；早期診斷

【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】A 【文章編號】1671-8801（2014）12-0012-02

卵巢癌在婦科腫瘤中發病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌居第三位，而其致死率卻占據首位。這主要是因為卵巢深藏于腹腔之內，早期癥狀不明顯，只有 19%的卵巢癌患者在癌組織突破卵巢之前能夠被發現，大多數患者就診時已處于晚期，并且容易腹腔轉移及復發。卵巢癌早期治療，其 5 年生存率可達92%，然而晚期的卵巢癌 5 年生存率不足 50%[1]。因此卵巢癌的早期診斷與早期治療是改善預后的關鍵。HE4聯合CA125等血清標記物檢測既可用于卵巢惡性腫瘤的診斷又可監測病情的復發。

1 HE4的發現，結構及主要生物學功能

HE4又名核心表位蛋白2（WFDC2）其基因的cDNA最早是從附睪的上皮遠端分離出來的，Kirchoff 等[2]于 1991 年在人附睪遠端上皮細胞中發現 HE4 基因，并認為 HE4 是一種酸性小分子分泌蛋白，富含半胱氨酸，是乳清酸蛋白（whey acidic protein，WAP）結構域家族蛋白中的一員。其編碼的蛋白質主要由乳清酸性蛋白（WAP）類型的4個二硫鍵核心（即WGDC）組成，與細胞外蛋白酶抑制劑有很高的同源性[3]與其同源的轉錄介質WFDC的蛋白質家族是白細胞中的蛋白酶抑制劑，HE4在自然免疫中也可能有作用。研究顯示HE4主要在附睪和女性的生殖道包括輸卵管、子宮內膜和宮頸中呈高度表達，在近端的氣管上皮中也有較高表達，但是在胃腸道、胰臟、肝臟、脾臟、肌肉組織、淋巴結、心臟、骨骼肌、乳房、腦組織中則不表達[4]。 目前對HE4的功能尚不明了， 其可能主要發揮免疫調節和促進生殖細胞成熟的作用。

2 HE4 在早期卵巢癌診斷中的價值

目前臨床上尚缺乏診斷早期卵巢癌敏感性和特異性較理想的方法。自1991 由 Kirchoff 等發現 HE4以來，國內外學者對其進行了眾多的研究，驗證了它作為診斷卵巢癌標志物的價值。

2.1 HE4在卵巢惡性腫瘤發病中可能的作用及分子機制

一些研究表明， 在卵巢惡性腫瘤早期和晚期中均有HE4過度表達，但HE4在卵巢惡性腫瘤中過度表達的機制尚不明確。Zou等[5]為了解HE4在卵巢癌進展中的作用，篩選了9株有HE4表達的卵巢癌細胞株，通過RNA干擾，在卵巢癌的CaoV3和SKOV3.ip1細胞系中使HE4基因不表達，通過熒光定量法檢測HE4基因不表達后對細胞周期、細胞凋亡及遷移和入侵的影響，結果發現，HE4基因不表達后，可阻止細胞周期的進程，阻止細胞從G0/G1期發展為S期，并抑制細胞的增殖、遷移和入侵。故HE4可能參與了細胞周期的調控，促進卵巢癌遷移和入侵。Gao 等[6]通過研究發現 HE4 基因過表達后，卵巢癌細胞增殖減弱，凋亡增強，侵襲減弱，腫瘤增長變慢，得出結論 HE4 能抑制卵巢癌細胞的增殖和轉移，是抗腫瘤基因。

2.2 HE4 在卵巢癌患者中的表達

Galgano 通過基因芯片和組織芯片發現 HE4 所有的漿液性乳頭狀卵巢癌和低分化卵巢癌中均表達，80%的卵巢子宮內膜樣癌及卵巢胃腸道轉移癌有表達，在卵巢黏液性癌、卵巢性索間質腫瘤和卵巢生殖細胞腫瘤中不表達[7]。有研究分析HE4 在 100%的卵巢子宮內膜樣癌、93%的卵巢漿液性癌和 50%的卵巢透明細胞癌中表達，但在卵巢粘液性癌及正常卵巢組織中不表達。所以，HE4 是一種由漿液性卵巢癌和子宮內膜癌過表達的糖蛋白。HE4 如此高的表達特異性，使之在區分卵巢腫塊的良、惡性及腫瘤的類型方面的優勢尤為突出，進一步研究表明，HE4能在早期發現患卵巢癌和子宮內膜癌的高風險患者。

2.3 作為卵巢癌的腫瘤標志物，HE4 比 CA125 更具優勢

目前，糖類抗原 125（carbohydrate antigen 125，CA125）被廣泛地應用于卵巢癌的早期診斷，它的升高在Ⅰ期卵巢癌患者的檢出率僅為 50%，而在Ⅱ ～ Ⅳ期的檢出率可高達 90% ～94%。但是 CA125 在某些良性疾病如子宮內膜異位癥，盆腔炎等也出現升高，且這種假陽性通過影像學不容易排除。所以，作為診斷早期卵巢癌的標志物，CA125 的特異性還是不足的，迫切需要一種敏感性和特異性較強的標志物來輔助 CA125 或替代其來提高卵巢癌的診斷水平。蘇彤等[8]分別用 ELISA和電化學發光免疫分析（electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA）檢測 121 例婦女（43 例健康，51 例卵巢良性病變，27 例卵巢癌）血清 CA125 和HE4 水平，結果發現 HE4 診斷卵巢癌的敏感性和特異性分別為 66.7% 和 98.0%；CA125 診斷卵巢癌的敏感性和特異性分別為 88.9% 和 78.4%。得出結論HE4 單項檢測的特異度優于 CA125 的單項檢測。

2.4 HE4 聯合其他途徑提高診斷卵巢癌的敏感性

臨床上用單一腫瘤標志物診斷某種腫瘤的方法并不能達到理想的效果，所以聯合檢測是目前較為理想的方法。Moore等[9]比較了HE4、CA125、CA72-4、活化素A、抑制素、可溶性間皮瘤相關肽、骨橋蛋白、人類表皮生長因子受體2（HER2）和表皮生長因子受體（EGFR）9種腫瘤標記物，結果顯示：就單一卵巢腫瘤標記物而言，HE4診斷卵巢惡性腫瘤的敏感度最高（72.9%），特異度為95%，對于不同標記物的組合，CA125和HE4聯合檢測的敏感度最高（76.4%），特異度為95%，如再聯合其他的標記物，其敏感度幾乎不變，而且血清HE4的升高早于CA125的變化，早期卵巢癌中，HE4已有明顯升高，其敏感度與CA125的敏感度分別為82.7%及45.9%。

2.5 HE4對卵巢惡性腫瘤治療效果的監測價值

HE4可以作為臨床上監測卵巢惡性腫瘤患者的病情轉歸的手段之一。Allard等[10]報道的 HE4臨床動態研究，按血清CA125的水平以及盆腔CT的結果將80例卵巢上皮性癌患者的臨床狀態劃分為好轉、惡化及長期帶瘤生存3類，共434份樣本，來自正在接受治療或者監測疾病復發的患者。縱向比較分析顯示，78.8%的患者血清擦25的水平與其臨床的狀態相關，76.2%的患者血清HE4的水平與其臨床的狀態相關，提示在臨床預測方面，血清HE4水平的意義不比血清CA125差（P=0.039）。在血清CA125水平與其臨床的狀態不相符合的患者中，有23.5%，患者與血清HE4相符合，而在血清HE4水平與其臨床狀態不相符合的患者中，31.6%的患者與血清CA125相符合，其中83.8%的患者血清CA125或HE4水平與其臨床狀態相符。故血清HE4可以作為臨床上監測卵巢惡性腫瘤復發的標記物，而且與CA125具有一致性。

2.6 HE4的檢測方法

隨著 HE4 研究成果的不斷出現，檢測 HE4 的方法也在不斷改進。HE4 檢測產品的不斷升級，為其從實驗室走向臨床奠定了堅實的基礎，有多種檢測 HE4 的方法及產品的出現。無論哪種檢測方法，其目的都是使 HE4 更方便有效的應用于臨床，給盆腔腫瘤患者帶來福音。

綜上所述，HE4 是一種適宜的卵巢癌標志物，HE4在卵巢惡性腫瘤的診斷中，特別是早期診斷中優于CA125，其與CA125聯合檢測在卵巢惡性腫瘤的診斷及病情監測中均有重要意義。因為 HE4 分子量小，早期可分泌入血；在正常卵巢組織不表達，而在卵巢癌高表達；HE4 的表達獨立于 CA125 的表達，單獨檢測優于 CA125 且聯合檢測可提高診斷能力；HE4 水平在卵巢癌術后明顯降低，可作為卵巢癌病情監測和療效觀察的指標。總之，HE4 做為一個新的卵巢癌腫瘤標志物，隨著對它研究的深入與廣泛應用，必將提高卵巢癌的診治率。

參考文獻：

[1] Li J， Dowdy S， Tipton T， et al. HE4 as a biomarker for ovarian and endometrial cancer management[J]. Expert Rev Mol Diagn， 2009， 9（6）： 555-566.

[2] Kirchhoff C， Habben I， Ivell R， et al. A major human epididymis-speci?c cDNA encodes a protein with sequence homology to extracellar proteinase inhibitors[J]. Biol Reprod， 1991， 45（2）： 350-357.

[3] Hellstrom I，Hellstrom KE.fTow movel biomarkers，mesothelin and HE4，for diagnois of ovarian carcinoma[J]. Expert Opin Med Diagn，2011，5（3）：227-240.

[4] Anastasi E，Granato T，Marchei GG，et al. Ovarian tumor marker HE4 is differently expressed during the phases of the menstrual cycle in healthy young women[J]. Tumor Biol，2010，31（5）：411-415.

[5] Zou SL，Chang XH，Ye X，et al. Effect of human epididymis protein 4 gene silencing on the malignant phenotype in ovarian canaer[J]. Chin Med J（Engl），2011，124（19）：3133-3140.

[6] Gao L， Cheng H Y， Dong L， et al. The role of HE ovarian cancer： inhibiting tumour cell proliferation and metastasis[J]. J Int Med Res， 2011， 39（5）： 1645-1660.

[7] Galgano M T， Hampton G M，Frierson H F Jr. Comprehensive analysis of HE4 expression in normal and malignant human tissues[J]. Mod Pathol， 2006， 19（6）： 847-853.

[8] 蘇彤， 王曉巖， 劉輝， 等. 聯合檢測附睪蛋白4和腫瘤抗原125在卵巢癌患者血清中的水平及臨床意義[J]. 中國煤炭工業醫學雜志， 2011， 14（10）： 1421-1423.

[9] Moore RG，Brown AK，MillerMC，et al.The use of multiple novel tumor bio-markers for the detection of ovarian carcinoma patients with a pelvic mass[J].Gynecol Oncol，2008（2）：402-408.

[10] Kong SY，Han MH，Yoo HJ，et al.Serum HE4 level is an independent prognostic factor in epithelial overian[J].Ann Surg Oncol，2012，19（5）：1707-1712.

△通訊作者：郝勝菊