劉 凱, 張典剛, 譚 遙,葛 紅, 王若崢
(1新疆醫科大學附屬腫瘤醫院放療一科, 烏魯木齊 830011; 2河南省腫瘤醫院胸部放療科, 鄭州 450000)
非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的治療策略強調多學科綜合治療,放射治療是綜合治療的主要手段之一,主要適用于伴有內科疾病不能耐受手術的患者、不愿意手術的患者以及局部晚期的患者。立體定向放療(stereotactic body radiotherapy,SBRT or stereotactic ablative radiotherapy,SABR)是近年發展迅速的放療新技術,是一種低分隔、大劑量精確放療方式,是目前不能手術的早期NSCLC患者的標準治療手段[1],單次照射治療劑量之間存在很大差異,單次劑量可達到20 Gy。此外,分子靶向藥物治療也是近年來NSCLC綜合治療的研究熱點,分子靶向藥表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑(epidermal growth factor receptor tyrosine-kinase inhibitors ,EGFR-TKI)可作為NSCLC的二線治療方案[2]。本研究對體外培養的肺腺癌細胞系H358給予不同劑量射線與分子靶向藥Iressa干預后,觀察射線及藥物對H358細胞存活率、凋亡及周期分布的影響。
1.1實驗材料細胞株H358為肺腺癌細胞(購于中國科學院上海生命科學研究院生物化學與細胞學研究所),吉非替尼(Iressa)為阿斯利康公司生產,250 mg/片,將Iressa研磨后使用二甲莖亞砜(DMSO)溶解,濃度為5×104μmol/L,-20℃保存。 噻唑藍(MTT)為華美生物技術有限公司產品,用磷酸鹽(PBS)溶液溶解,濃度為5 mg/mL,-20℃保存。流式細胞技術采用BD公司生產的細胞凋亡檢測試劑盒。使用的實驗儀器主要有直線加速器、CO2培養箱、流式細胞儀、酶聯免疫檢測儀等。
1.2實驗方法
1.2.1 細胞傳代與培養 復蘇H358肺腺癌細胞,用含10%胎牛血清的RPMI-1640培養基,將細胞接種于底面積為5 cm×5 cm的細胞培養瓶,置于37℃、5%CO2的培養箱內貼壁培養,4~5 d可傳代1次,取對數生長期細胞完成后續實驗?!?br>