李 慧, 李秀娟, 古力熱巴·夏依買旦, 阿曼古麗·如則, 吳 江, 聶永梅
(新疆醫科大學1基礎醫學院生理學教研室, 烏魯木齊 830011; 2基礎醫學院病理生理學教研室, 烏魯木齊 830011;3第二附屬醫院心電圖室, 烏魯木齊 830063)
血管內皮細胞分布于全身各組織器官,傳統認為其功能是促進水及小分子物質交換,是位于血液與間質組織間的一層半透性屏障。近年來發現內皮細胞可分泌多種生物活性物質通過進入循環、旁分泌或自分泌等方式作用于靶細胞,對機體進行調節。血管內皮細胞功能障礙的發展后果已成為血管性疾病關注的熱點[1-2]。細胞實驗已經成為不可或缺的研究方法。相關的疾病主要有高血壓、冠心病、動脈粥樣硬化及腫瘤惡化[3]。對血管內皮細胞功能的研究常用的是臍靜脈內皮細胞,主要有原代臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVECs)和EA.HY926人臍靜脈內皮細胞株。本實驗在建立原代人臍靜脈內皮細胞體外分離和培養方法的同時,比較原代人臍靜脈內皮細胞與 EA.HY926人臍靜脈內皮細胞株的生物特性,為血管性疾病研究的細胞來源的選擇提供理論支撐。
1.1材料原代細胞:來源于新疆醫科大學第一附屬醫院產科健康剖宮產產婦分娩后所取的新生胎兒臍帶,長度15~20 cm。EA.HY926人臍靜脈內皮細胞株來自上海細胞庫。
1.2試劑M199培養基(Hyclone 美國),胎牛血清(Gibco 美國),內皮細胞生長因子(ECGS Millipore),Ⅱ型膠原酶(Worthington 美國),胰酶(Biosharp),雙抗/青鏈霉素合劑(Gibco 美國),內皮細胞Ⅷ因子相關抗原免疫組化試劑盒(中杉),PBS液(自配),MTT(自配)。
1.3方……