哈薩克族食管正常上皮細胞的原代培養方法

黃思語， 阿爾孜古麗·吐爾遜， 鄧彥超， 陳 艷,3

(1新疆醫科大學公共衛生學院， 烏魯木齊 830011； 2新疆醫科大學第一附屬醫院臨床醫學研究所； 3新疆食管癌研究所；4新疆醫科大學第一附屬醫院， 烏魯木齊 830054)

食管癌是發生在食管黏膜層的惡性腫瘤，占所有腫瘤的2%，是世界上最常見的惡性腫瘤之一[1]。新疆是我國食管癌高發區，以哈薩克族(以下簡稱哈族)人群死亡率最高(88.7/10萬)，遠高于該地區其他民族(22.3/10萬)[2]，哈族食管癌的病死率(33.90/10萬)比其他少數民族高2～31倍，比全國平均病死率(14.59/10萬)高2.3倍[3-4]。關于正常食管上皮細胞惡性轉化，并進一步發展成食管癌的相關研究[5-6]逐漸受到了大家的重視。而成功獲取體外培養的正常食管上皮細胞是研究食管上皮細胞增殖、分化及惡性轉化的必要條件。國內外目前沒有可供研究的哈族食管正常上皮細胞株。體外培養正常食管上皮細胞的步驟復雜，嚴重制約了后續的研究工作。本研究采用酶消化法并綜合國內外關于正常食管上皮細胞培養的優點，在無血清培養基中培養哈族食管正常上皮細胞。旨在探討一種更簡便、細胞純度更高的培養方法，為進行哈族食管正常上皮細胞惡性轉化的研究提供可靠的工具。

1 材料與方法

1.1實驗儀器和材料人正常食管上皮細胞專用培養基EpiCM-2(美國ScienCell公司)，RPMI 1640培養基(美國Gibco公司)，胎牛血清(美國Gibco公司)，0.25%Dispase Ⅱ酶(瑞士Roche公司)，0.25%胰蛋白酶，0.05%胰蛋白酶/0.03%EDTA，雙抗(美國Hyclone公司)，DMSO(美國Sigma公司)，鼠抗人廣譜角蛋白抗體(博士德生物有限公司)，二步法免疫組化檢測試劑盒(中杉金橋公司)，DAB試劑盒(中杉金橋公司)。……