明膠空心膠囊鑒別試驗條件改進及修訂操作步驟的建議

李如棟，覃志高,彭遼宇

明膠空心膠囊鑒別試驗條件改進及修訂操作步驟的建議

李如棟1，覃志高2,彭遼宇3

目的通過優化明膠空心膠囊鑒別試驗中的某些條件，提高鑒別結果的準確性。方法在藥典方法的基礎上，鑒別試驗(1)的母液加入一定量的活性碳進行脫色；鑒別試驗(2)直接取用經脫色后的原液進行試驗；鑒別試驗(3)中用氫氧化鈉代替鈉石灰進行試驗。結果鑒別試驗(1)經改進后生成的絮狀沉淀為真正的橘黃色，而原方法生成的顏色則為橘黃色與本底顏色的混合色；鑒別試驗(2)取用經脫色后的原液進行試驗的結果比原方法生成的渾濁更明顯易判；鑒別試驗(3)的兩種方法均能使濕潤的紅色石蕊試紙變藍色，但氫氧化鈉更易于購買與保存。結論為確保結果準確性，建議修訂藥典中明膠空心膠囊鑒別試驗操作過程中的不合理步驟。

明膠；明膠空心膠囊；鑒別試驗；脫色

明膠空心膠囊是由藥用明膠所制成，以區別于其他非明膠為原料所制成的膠囊[1，2]，而明膠一般是動物的皮、骨、筋腱中的膠原質經部分水解后提純而獲得的蛋白質制品[3]，具有膠原蛋白質的理化性質。經查詢文獻[4-8]得知，明膠空心膠囊的鑒別試驗與明膠的鑒別試驗項目一致，均為3個理化鑒別。筆者在長期的日常檢驗中發現，由于膠囊是在明膠原料的基礎上加入一定的輔料與遮光劑制作而成，如果直接按照現有方法操作，前兩項鑒別試驗基本無法呈現正反應；第三項鑒別的試劑則較難獲取。針對這種情況，筆者對現有的方法進行改進，在前兩項中去除干擾因素，對第三項尋找代替試劑，效果較好。

1 材料與方法

1.1 供試品與試劑 明膠空心膠囊8批，囊殼顏色分別為棕紅、全紅、黃紅、黃綠、黃白、綠白、藍白和橙黃。重鉻酸鉀試液、稀鹽酸、鞣酸試液、純化水均為本單位配制，氫氧化鈉、鈉石灰為分析純，紅色石蕊試紙為市售商品，乙醇燈。

1.2 鑒別試驗(1)

1.2.1 藥典法[4-8]取供試品0.25 g，加水50 ml，加熱使溶化，放冷、搖勻，取溶液 5 ml，加重鉻酸鉀試液-稀鹽酸(4∶1)的混合液數滴。

1.2.2 改進法 取供試品0.25 g，加水50 ml，加熱使溶化，加入活性碳約0.5 g，煮沸2 min，搖勻，放冷，過濾，取濾液5 ml，加重鉻酸鉀試液-稀鹽酸(4∶1)的混合液數滴。

1.2.3 結果規定 應生產橘黃色絮狀沉淀。

1.3 鑒別試驗(2)

1.3.1 藥典法[4-8]取鑒別(1)項下剩余的溶液1 ml，加水50 ml，搖勻后，加鞣酸試液數滴。

1.3.2 改進法 取對比法中鑒別試驗(1)的剩余溶液1 ml，加鞣酸試液數滴。

1.3.3 結果規定 應發生渾濁。

1.4 鑒別試驗(3)

1.4.1 藥典法[4-8]取本品約0.3 g，置試管中，加鈉石灰少許。

1.4.2 改進法 取本品約0.3 g，置試管中，加氫氧化鈉少許，混勻，加熱。

1.4.3 結果規定 產生的氣體能使濕潤的紅色石蕊試紙變為藍色。

2 結 果

2.1 鑒別試驗(1)結果 由表1可見，本研究中的8批明膠空心膠囊以藥典法進行鑒別，僅1批呈正反應，其余7批為假陰性結果；而以改進法進行鑒別，則8批均為陽性結果。

表1 明膠空心膠囊囊殼在鑒別試驗(1)中各階段顏色變化及沉淀情況

注：“/”表示未觀察到橘黃色絮狀沉淀生成

2.2 鑒別試驗(2)結果 以藥典法進行鑒別試驗(2)，在滴加鞣酸試液后，在試液的接觸面有少量渾濁生成，振搖后，渾濁完全溶解；而以改進法進行試驗時，則有明顯沉淀生成，此時溶液也是渾濁的，振搖后，沉淀不溶解。

2.3 鑒別試驗(3)結果 藥典法不能呈陽性反應；改進法可以呈顯陽性反應。

3 討 論

3.1 本底色的干擾與排除 由于目前市面上的膠囊基本都在囊殼中加入遮光劑或藥用色素，以滿足避光或改善色澤的需要，這些額外添加的物質在上述試驗條件下基本不溶于水而呈混懸狀態，此時，溶液顏色即為2節囊殼所含的不同的遮光劑或藥用色素溶于水后的混合色。當反應生成橘黃色絮狀沉淀時，溶液更深的本底顏色將反應現象予以掩蓋或表現為幾種顏色的混合色，嚴重干擾對結果的判斷，所以，必須除去本底顏色的干擾。研究表明，在原溶液中加入一定量的活性炭后，可將遮光劑或藥用色素吸附于其中，過濾后溶液變為無色(或僅略顯黃色)，從而排除了干擾。需要指出的是，藥用炭的加入量要合適，過少則無法除盡溶液中的遮光劑或藥用色素；過多則大量吸附膠原蛋白質，使其濃度大大降低而不利于后續現象的觀測，甚至有時無法呈現正反應。筆者經過預實驗的摸索發現，當藥用炭用量約0.5 g時能起到很好的兼顧作用。

3.2 混濁與沉淀的量效關系 渾濁與沉淀的關系主要表現為量的關系，當生成的固體顆粒很少，在溶液中基本為混懸狀態，即表現為渾濁；當生成的固體顆粒很多，固體顆粒過飽和時，聚集成較大顆粒沉積于容器底部而形成沉淀。本研究中兩種方法之所以產生不同結果，是因為藥典法將供試液稀釋了50倍。行業標準解釋表明：明膠在1∶4500的濃度時可和鞣酸生成絮狀沉淀[8]，如果按藥典法稀釋，溶液濃度為0.25/(50×50)=1∶10000，當剛剛加入鞣酸試液未振搖時，鞣酸與溶液的接觸面可看到少量渾濁；當振搖后，少量渾濁即全部溶于水中，這表明藥典法所呈現結果不穩定，易產生誤判。但改進法溶液的濃度為0.25/50=1∶200，所以渾濁(沉淀)很明顯，而且此時溶液為飽和狀態，振搖后沉淀也不會溶解，說明改進法能很好地保證結果的重現性。藥典法之所以將原溶液稀釋50倍，可能是因為以沒有除去遮光劑的溶液進行試驗的情況下其本底色會干擾鑒別(2)的實驗現象，而稀釋后使本底色變得很淡，基本不影響結果判斷；但同時產生的另外一問題是，經稀釋后溶解度的因素又極大地弱化了鑒別(2)的實驗結果。如上所述，本研究中加入藥用炭的做法起到了一舉兩得的效果。

3.3 堿解反應的條件改進 鑒別(3)的反應實質是膠原蛋白質與強堿在加熱條件下氧化分解生成氨氣，氨氣能使濕潤的紅色石蕊試紙變藍色。鈉石灰是由NaOH與CaO按一定比例(CaO含量約為75%，NaOH含量>3%)混合后加一定著色劑制成的試劑，臨床上用于除濕及除CO2，其中主要是發揮CaO的作用[9]。藥典之所以用鈉石灰作為該鑒別的反應試劑，可能是考慮到上述反應生成較多的水與CO2，應使用可除去這2個成分的試劑，消除其可能影響(氨極易溶于水，CO2可與氨在有水的情況下再度反應)。本研究結果證明，NaOH也能達到相同的效果。一般來說，NaOH為較常用的試藥，價錢相對便宜，為實驗室必備；而鈉石灰使用率極低，價格相對較高，購買時需預訂(筆者進行試驗時，聯系了所在城市的10余家化學試劑經銷商，無一商家有現貨；幾經周折，一商家答應幫助訂貨，到貨期為2個月)。而且由于鈉石灰中同時存在NaOH與CaO，其吸濕與吸CO2能力大大超過NaOH，不易貯存，開瓶后不到半年，剩余的鈉石灰已不能再用于做實驗，造成一定的浪費。故建議藥典中可考慮用NaOH代替鈉石灰。另外，按藥典原方法，該試驗不進行加熱，無法生成氨氣，不利于結果的判定，所以改進實驗中加入了“加熱”這一實驗條件。歷版明膠空心膠囊標準也一直標明這一條件，但中國藥典2010年版卻將這一條件刪除，高亞敏[10]2010年在對最新版藥典進行解釋時亦明確指出該鑒別一定要加熱，但至今中國藥典也沒有進行任何修訂或勘誤。

總之，現行版中國藥典所收載的明膠空心膠囊的3項鑒別試驗均存在不同程度的缺陷，如果按照筆者研究成功的改進法進行修訂則基本可以消除這些缺陷。

[1] 李如棟，覃志高.關于明膠空心膠囊脆碎度檢查的建議[J].中國藥房,2013,24(9): 818-820.

[2] 周 濤.明膠空心膠囊標準簡介[J].明膠科學與技術,2008,28(1):47-48.

[3] 劉振龍.明膠空心膠囊質量現狀及其控制策略研究[J].中國衛生產業,2011,8(6):24-25.

[4] 衛生部藥典委員會.衛生部頒藥品標準(化學藥品及制劑第1冊)[S].1989:79-81.

[5] 衛生部藥典委員會.衛生部頒藥品標準(二部第5冊)[S].1996:39-40.

[6] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[S].北京:化學工業出版社,2000:438-439.

[7] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[S].北京:中國醫藥科技出版社,2010:1204-1206,附錄199,附錄164,XIV,附錄69.

[8] 中國醫藥包裝協會.明膠空心膠囊[S].2007:14.

[9] 國家藥典委員會.國家藥品標準(化學藥品地方標準上升國家標準第6冊)[S].2005:121.

[10] 高亞敏.中國藥典(2010年版)“明膠空心膠囊”[J].明膠科學與技術,2010,30(2):97-99.

(2013-11-11收稿 2014-03-20修回)

(責任編輯 梁秋野)

Improvementofconditionofidentificationtestaboutvacantgelatincapsulesandtheoperatingstepsofproposedamendment

LI Rudong1, QIN Zhigao2, and PENG Liaoyu3. 1. Department of Medical Service, 3. Department of Pharmacy, Guangxi Zhuang Autonomous Regional Corps Hospital, Chinese People’s Armed Police Forces, Nanning 530003, China; 2. Nanning Institute for Food and Drug Control, Nanning 530001, China

ObjectiveTo improve the accuracy of results by optimizing the conditions of gelatin capsules identification test.MethodsOn the basis of the original method, the identification test (1): to the mother liquor add a certain amount of active carbon for decolorizing; identification test (2): directly take the decolorized concentrate to do experiment; identification test (3): use sodium hydroxide instead of soda lime.ResultsIdentification test (1) the floccules generated by the improved method were of real orange color, while the floccules generated by the original method were of a mixture of orange color and background color; identification test (2): the turbidity generated by using decolorized concentrate was more marked and easier to distinguish; the two methods of identification test (3) can both make the wet red litmus paper turn blue, but sodium hydroxide is easier to procure and preserve.ConclusionsThe results of this study show that in order to ensure the accuracy of results, economy and rationality, the unreasonable steps for vacant gelatin capsules identification test should be revised.

key words gelatin;vacant gelatin capsules; identification test; decoloration

李如棟，本科學歷，主管藥師，E-mail:474892886@qq.com

530003南寧，武警廣西總隊醫院：1.醫務處，3.藥局；2.530001，南寧食品藥品檢驗所

覃志高，E-mail:nnqzg@163.com

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