中藥補腦止散對戊四氮致大鼠海馬谷氨酸和氨酪酸含量的影響及抗機制

龔惠娥

龔惠娥

目的 通過使用中藥補腦止散，研究采用戊四氮致大鼠海馬谷氨酸（Glu）和氨酪酸（GABA）含量的變化，從而探討中藥補腦止散治療癲的作用機制。方法 將90只正常大鼠隨機抽取15只作為空白對照組，剩余75只大鼠腹腔注射戊四氮制作癲點燃模型，從造模成功的大鼠中隨機選取50只分為模型組、丙戊酸鈉組、中藥補腦止散大劑量組、中劑量組和小劑量組，每組10只。給藥7d和15d后分別處死各組一半實驗大鼠，取其海馬切片，檢測切片中Glu和GABA含量。結果 與模型組相比，中、大劑量組和小劑量組海馬神經元Glu含量均顯著降低，GABA含量有明顯的升高。結論 中藥補腦止散能對戊四氮慢性點燃癲大鼠中海馬中Glu和GABA含量進行調節，提高GABA含量，降低Clu含量，達到治療癲的作用。

癲；中藥；補腦止散；谷氨酸；氨酪酸

1 材料與方法

1.1 材料 選取健康成年SD大鼠90只，雄性，質量（200±12）g，一般條件飼養。所有大鼠體重、飼養條件等一般狀況無顯著差異，具有可比性。

1.3 方法

1.3.1 建模方法 每天上午給予大鼠腹腔注射戊四氮（PTZ）35mg/kg，注射后觀察大鼠行為變化60min[3]。根據Racine分級標準，其將大鼠行為分為6級[4]。若大鼠連續5d出現4級以上發作定義為模型點燃成功。將90只大鼠編號，隨機抽取15只作為空白對照組，剩余75只大鼠腹腔注射戊四氮制作癲點燃模型，從造模成功的大鼠中隨機選取50只分為五組，每組10只，即模型組、丙戊酸鈉組、中藥補腦止散大劑量組（以下稱大劑量組）、中藥補腦止散中劑量組（以下稱中劑量組）和中藥補腦止散小劑量組（以下稱小劑量組），建模選取的50只大鼠病情狀況差異均無統計學意義（P＞0.05）。灌胃治療劑量按體表面積比進行折算，折算后中藥補腦止散大、中、小劑量組分別給予1.6g/kg、0.8g/kg和0.4g/kg灌胃治療[5-6]。丙戊酸鈉組大鼠給予丙戊酸鈉等效劑量15.75mg/kg，空白對照組和模型組大鼠灌服等體積0.9%氯化鈉注射液，每天用藥一次，連續治療30d。

1.3.2 標本采集 灌胃治療7d后，將六組各取一半大鼠給予麻醉，然后開胸暴露心臟，先對大鼠實施灌注后開顱取腦，然后將其固定，切取海馬段腦組織，最后進行石蠟包埋，切片[7]。封片后在高倍鏡下觀察并拍照進行分析，計算GABA和Glu陽性神經元的平均灰度值，并記錄數據[8]。同樣方法在灌胃15d后將各組剩余大鼠用上述方法獲取GABA和Glu陽性神經元的平均灰度值，并記錄數據。

1.4 觀察指標 對大鼠海馬谷氨酸（Glu）和氨酪酸（GABA）含量進行觀察計算。

1.5 統計學分析 選擇SPSS 18.0進行數據統計，數據采用±s表示，均數的比較采用t檢驗，當P＜0.05時，差異具有統計學意義。

2 結果

表1 第1、7、15天各組發作等級及頻率比較

2.2 Glu和GABA含量變化 在鏡下觀察及運用圖像分析技術，對GABA和Glu陽性神經元的平均灰度值進行了記錄，分析可知，中、大劑量組與丙戊酸鈉組的Glu和GABA含量比較差異無統計學意義（P＞0.05）；大、中、小劑量組海馬神經元Glu含量和GABA含量與模型組相比分別顯著降低和明顯升高，且大、中劑量組的變化幅度明顯大于小劑量組的變化幅度，見表2。

表2 第7、15天大鼠海馬Glu陽性細胞GABA陽性細胞平均灰度值(±s)

表2 第7、15天大鼠海馬Glu陽性細胞GABA陽性細胞平均灰度值(±s)

注：第7天大劑量組與模型組Glu含量相比t=4.9296，P=0.0012；大劑量組與模型組Glu含量相比t=8.3018，P＜0.01。第5天大劑量組與模型組Glu含量相比t=5.4627，P=0.0006；大劑量組與模型組Glu含量相比t=20.5498，P＜0.01

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3 討論

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R285.5

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1673-5846(2014)06-0032-03

長沙市第一醫院藥劑科，湖南長沙 410005

龔惠娥（1975-），本科學歷，副主任中藥師。研究方向：藥事管理。Tel：15273152098，E-mail：275271941@qq.com