翟佳 高興 李坤 高建峰 李家奎
摘要:為調查武漢地區家犬弓形蟲感染的流行病學特征,用間接血凝試驗方法檢測2013年3~12月采集的家犬血清樣本共279份。檢測結果表明,家犬弓形蟲血清抗體陽性樣本37份,陽性率為13.4%。家犬弓形蟲血清抗體陽性率不同性別變化不明顯,雌性13.0%,雄性13.4%;不同季節變化較明顯,夏季最高,為14.0%,春季最低,為12.7%;隨年齡增長呈上升趨勢,3~5歲最高,為21.2%。
關鍵詞:犬;弓形蟲;間接血凝試驗
中圖分類號:852.72+3文獻標識碼:A文章編號:1007-273X(2014)03-0014-02
弓形蟲病是一種人獸共患病,由龔地弓形蟲(簡稱弓形蟲)引起。弓形蟲是一種專性細胞內寄生原蟲[1],宿主為犬、貓(其中犬為中間宿主,貓為終末宿主),寄主范圍廣,可感染人及所有溫血動物,人和動物一旦攝入含弓形蟲卵囊污染的食物或飲水時就可被感染[2]。患犬多為1歲以內幼犬,主要臨床癥狀有高熱稽留、咳嗽、呼吸困難、眼鼻有膿性分泌物或嘔吐、血性下痢等;成年犬多呈隱性感染或呈一過性[3]。免疫功能正常人群感染后多呈無癥狀帶蟲狀態,但是在免疫功能受損者、免疫缺陷者及先天感染者中常導致嚴重的后果;孕婦感染可引起早產、流產、胎兒或嬰幼兒發育畸形、智力障礙、腦炎、腦膜炎甚至死亡等癥狀;對于艾滋病患者,弓形蟲是最常見的機會性感染原蟲之一,常可導致嚴重的并發癥甚至死亡。目前,隨著飼養犬的人群日益增多,犬成為人感染弓形蟲的傳染源,其分泌物和排泄物中的弓形蟲可通過逗玩、被舔等密切接觸,經黏膜及損傷的皮膚進入人體,使人感染弓形蟲病的機會大大增加[4]。為了解武漢地區家犬弓形蟲的感染情況,于2013年3~12月對該地區在華中農業大學獸醫院就診的犬進行了診斷調查。
1材料與方法
1.1調查對象
2013年3~12月,在華中農業大學獸醫院,通過隨機抽取的方式,共抽取了276份犬血清樣本,進行了弓形蟲病的流行病學調查。
1.2試驗方法
按照中華人民共和國農業行業標準NY/T573 2002的規定,用間接血凝試驗方法,對犬血清樣本進行弓形蟲病抗體檢測。
1.2.1試驗材料 犬血清樣本276份;弓形蟲間接血凝試驗試劑:弓形蟲IHA診斷制劑,稀釋液,陽性對照血清,陰性對照血清,均購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所;96(12×8)孔血凝反應板、移液器、振蕩器、高速離心機等。
1.2.2試驗方法 (1)待檢血清的采取:采被檢動物的血液2.0 2.5mL,分離血清(應無血球)。(2)加稀釋液:用微量加樣器在96孔血凝反應板上每孔中加0.075ml稀釋液,每個樣品需加稀釋液4孔。設置陽性血清、陰性血清、空白對照。(3)加待檢血清、陽性對照血清、陰性對照血清:第1孔加相應血清0.025 mL。(4)稀釋:陰性、陽性對照血清均稀釋至第7孔。待檢血清稀釋至第3孔。(5)加診斷液:凍干抗原,按說明書要求加5 mL滅菌蒸餾水稀釋搖勻,1 500 2 000r/min離心5 10 min,棄去上清液,加等量稀釋液搖勻,置4 ℃下靜置24 h后使用。用前搖勻,每孔加0.025 mL,加完后將反應板置于微量振蕩器上振蕩1 2 min,蓋上一塊與反應板大小相近的玻璃板置22 37℃作用2 3 h后觀察結果。
1.2.3判定標準 在陽性對照血清效價不低于1∶1024,陰性對照血清除第1孔允許有前滯現象“+”外,其余各孔均為“-”的前提下,對待檢血清進行判定,否則應重作。待檢血清效價達到或超過1∶64為陽性,“++”為陽性終點。
2弓形蟲病抗體檢測結果
279份犬血清進行的弓形蟲抗體檢測,檢測結果為陽性樣本共有37份,陽性率為13.3%。
2.1不同季節犬弓形蟲血清抗體陽性率
按照不同季節對弓形蟲血清抗體陽性率分別進行統計分析,結果見表1。
由表1可見,春、夏、秋、冬弓形蟲抗體陽性率分別為12.7%、14.0%、13.3%和12.7%,變化較大。其中以夏季的弓形蟲陽性率最高,春季最低。
2.2不同性別家犬弓形蟲抗體陽性率
按照不同性別對弓形蟲血清抗體陽性率分別進行統計分析,結果見表2。
由表2可見,不同性別犬血清弓形蟲抗體陽性率分別為雌性犬13.0%,雄性犬13.4%,變化不大。
2.3 不同年齡段家犬弓形蟲血清抗體陽性率
279只家犬按不同年齡段進行統計分析,其抗體檢測陽性率見表3。
由表3可見,隨著年齡的增大,犬弓形蟲血清抗體陽性率呈上升趨勢,幼年犬血清抗體陽性率最低,成年后陽性率升高,到老年有所下降,但不明顯。
從檢測結果可以看出,隨著年齡的增大,犬弓形蟲血清抗體陽性率呈上升趨勢,幼年犬血清陽性率最低,成年后陽性率升高,到老年有所下降,但不明顯。
3討論
通過對武漢市家犬弓形蟲病流行病學調查,說明該地區家犬存在弓形蟲感染,血清抗體陽性率為13.3%,需引起有關防疫部門及寵物主人的注意。
不同性別犬弓形蟲感染率沒有明顯差異。不同季節犬弓形蟲感染率變化較大,其中夏季血清抗體陽性率最高,為14.0%,春季血清抗體陽性率最低,為12.7%。不同年齡段犬弓形蟲感染率差異顯著,并且隨著年齡增大血清抗體陽性率呈上升趨勢,與崔麗麗等人的檢測結果基本相符[5]。
近些年犬群中弓形蟲感染率成為城市環境弓形蟲污染程度和人患弓形蟲病危險度系數的指示器[6]。犬感染弓形蟲主要經由腸道,因此犬主人在攜犬外出時應用引導繩牽引,防止犬在戶外舔食或接觸流浪貓排泄物,同時在家飼喂熟食或犬糧,避免犬感染弓形蟲[7]。
許多寵物主人缺乏科學的飼養知識,防疫觀念和自我保護意識也較差,且城市住宅多為高層建筑,人與寵物同室而居、過分親昵,大大增加了弓形蟲的傳播機會[8]。
犬主人應樹立科學養殖及防疫觀念,做到定期對犬進行弓形蟲病檢測,根據臨床診斷、流行病史調查及實驗室診斷等方法,做到早發現,早診斷,早治療。同時要注意日常衛生,與犬親密接觸后要認真洗手。特別注意的是,除非孕婦血清檢查證明已經有過弓形蟲感染,否則孕婦懷孕期間要避免接觸犬。
參考文獻:
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[8]張淼潔,王立林,曲 萍,等.我國人與犬、貓共患病防控存在的主要問題與對策建議[J].中國比較醫學雜志,2012,22(4):82 86.