蒙藥利喜咽喉膠囊抗炎作用及急性毒性研究

海海杰 吳七十三

(1.呼倫貝爾市扎蘭屯中蒙醫院，內蒙古 呼倫貝爾 162650;2.內蒙古民族大學蒙醫藥學院，內蒙古 通遼 028000)

利喜咽喉膠囊是在蒙醫驗方立西如克巴基礎上研制的新劑型，由丁香、木香、甘草、石膏、玉簪花、訶子等6味藥組成［1，2］。具有利肺，清咽等功效。用于外感咳嗽，聲音嘶啞，咽喉腫痛等病癥［1，2］。本文通過比較立西如克巴和利喜咽喉膠囊抗炎作用和小鼠急性毒性反應，評價立西如克巴改新劑型的必要性。

1 實驗材料

1.1 實驗藥品、試劑:立西如克巴，內蒙古通遼市奈曼旗蒙醫院提供，批號2009102602。利喜咽喉由內蒙古民族大學蒙醫藥學院研制，批號20091124、20091126、20091128的混合。本試驗中作氨酚咖匹林片為對照藥。角叉菜膠，sigma公司產品，由北京拜爾迪公司提供，批號015k0172。二甲苯，沈陽市東興試劑廠產品，批號20060504。

1.2 實驗儀器:BT25型電子分析天平，北京賽多利斯天平有限公司產品;MDF-U2086S型超低溫冰箱，日本產品;PV-200型足容積測定儀，成都泰盟科技有限公司產品。

1.3 實驗動物:昆明種小鼠，體重18g～22g，雌雄各半;Wistar大鼠，體重200～220g，雌雄各半，均由沈陽醫學院實驗動物中心提供，許可證號:SCXK-(吉)2007-0003。

2 實驗方法及結果

2.1 利喜咽喉膠囊對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響［3］:取小鼠90只，按體重隨機分為對照組、利喜咽喉低劑量組(0.325g/kg)，利喜咽喉中劑量組(0.750g/kg)、利喜咽喉高劑量組(1.500g/kg)、立西如克巴組(0.160g/kg)和陽性組(氨酚咖匹林片0.111g/kg)等6組，每組15只，雌雄分籠飼養。各給藥組分別灌胃相應藥物的0.5% 羧甲基纖維素鈉溶液(0.2ml/10g)，對照組灌胃同體積的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液，每天1次，連續7d。末次給藥后30min，取0.1ml二甲苯涂于各組小鼠右耳前后兩面致炎。1h后，將小鼠脫頸處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑6mm的打孔器分別在兩耳同一部位打下圓耳片，迅速用電子天平稱重，計算耳片炎癥腫脹度(右耳片減去左耳片重量等于腫脹度)。結果見表1。

結果顯示，利喜咽喉膠囊中、高劑量對小鼠二甲苯所致耳廓腫脹均具有明顯的抑制作用(P＜0.05)。

表1 利喜咽喉膠囊對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響 s·mg，n=15)

表1 利喜咽喉膠囊對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響 s·mg，n=15)

注:與空白組比較※P＜0.05

組別 給藥劑量(g/kg)耳廓腫脹度對照組-3.43 ±1.73利喜咽喉低劑量組 0.325 3.65 ±1.82利喜咽喉中劑量組 0.750 2.32 ±0.69※利喜咽喉高劑量組 1.500 1.98 ±0.88※立西如克巴組 0.160 3.56 ±1.64氨酚咖匹林片組 0.111 2.19 ±1.01※

2.2 利喜咽喉膠囊對角叉菜所致大鼠足腫脹的影響［4］:取大鼠72只，雌雄兼用，按體重隨機分為模型組、利喜咽喉低劑量組(0.22g/kg)、利喜咽喉中劑量組(0.44g/kg)、利喜咽喉高劑量組(0.88g/kg)、立西如克巴組(0.096g/kg)和陽性組(0.067g/kg)等6組，每組12只，雌雄分籠飼養。各給藥組大鼠分別灌胃相應藥的0.5%羧甲基纖維素鈉混懸液(2ml/100g)。模型組灌胃同體積的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液，每日1次，連續10d。建立模型前用容積法測量各組大鼠右后足跖容積。于末次給藥后30min，將各組大鼠右后足腱膜下注射1%角叉菜膠溶液0.1ml，在2h、4h、6h和8h后用足容積測定儀分別測量大鼠右后足跖容積，并進行相關組間t檢驗，結果見表2。

結果顯示，利喜咽喉對大鼠角叉菜膠致足腫脹4d之內抑制作用比較穩定(P＜0.05)，具有量效關系。立西如克從6d后開始出現作用(P＜0.05)，具有作用較晚的特點。根據藥物在本試驗中所表現出的作用時間，其體內停留時間、代謝速度等問題值得進一步研究。

表2 利喜咽喉膠囊對角叉菜致大鼠足腫脹的影響± s·ml，n=12)

表2 利喜咽喉膠囊對角叉菜致大鼠足腫脹的影響± s·ml，n=12)

注:與模型組比較 ※P＜0.05

組別 致炎前致炎后不同時間足跖腫脹度2h 4h 6h 8h模型組 1.97 ±0.36 2.31 ±0.23 2.35 ±0.38 2.24 ±0.38 2.21 ±0.41利喜咽喉低劑量組 1.70±0.14 1.93±0.17※ 2.09±0.24※ 1.91±0.20※ 1.88±0.12※利喜咽喉中劑量組 1.73±0.27 1.88±0.26 2.11±0.38※ 2.06±0.25 2.11±0.15利喜咽喉高劑量組 1.75±0.19 1.92±0.18※ 1.87±0.36※ 2.07±0.18 2.16±0.20立西如克巴組 1.76±0.21 2.09±0.21 2.12±0.22 2.00±0.34※ 2.07±0.29※陽性組 1.78 ±0.30 2.16 ±0.31 2.18 ±0.31 1.96 ±0.23※1.95 ±0.20

3 利喜咽喉膠囊小鼠最大給藥量實驗研究［5］

取昆明種小鼠60只，雌雄各半，按體重隨機分為立西如克巴組、利喜咽喉組和對照組等3組，雌雄分籠飼養。將小鼠禁食16h(自由飲水)后，立西如克巴組大鼠灌胃最大濃度(0.45g/ml)、利喜咽喉組最大濃度(2g/ml)的混懸液(0.3ml/10g)，灌胃1次。立西如克巴1日最大給藥量為30.8g/kg、利喜咽喉原材料為60g/kg;對照組按相同條件給予等量的生理鹽水。給藥后常規飼養，給藥后連續觀察動物的反映情況，連續觀察14d，分別于給藥前及給藥后第3、7、10、14d稱體重。每天觀察2次(上下午各1次)動物的外觀、行為、分泌物、排泄物等。記錄所有動物的死亡情況、中毒癥狀及中毒反應的起始時間、嚴重程度、持續時間、是否可逆等。結果見表3、表4。

結果顯示，小鼠1日最大給藥量立西如克巴為30.8g/kg/d時，15min內小鼠出現蹣跚走路，但未見睡眠現象，4h后出現脹肚、縱毛、活動緩慢及活動量少等現象，此現象延續1到2d;利喜咽喉灌胃給藥60g/kg/d時，15min內小鼠出現睡眠(翻正反射消失)現象，1h后恢復正常;4h后出現脹肚、縱毛、活動緩慢及活動量少等現象，此現象延續3到4d;小鼠均未見異常行為、體重下降和死亡，第14d尸解肉眼觀察未發現異常。提示立西如克巴、利喜咽喉經口給給予小鼠的急性毒性較小，測不出小鼠LD50?？烧J為臨床用藥安全性較好。

表3 立西如克巴和利喜咽喉膠囊對雌性小鼠體重的影響 ± s·g，n=20)

表3 立西如克巴和利喜咽喉膠囊對雌性小鼠體重的影響 ± s·g，n=20)

組別 給藥前 給藥后3d 給藥后7d 給藥后10d 給藥后14d對照組 34.1 ±4.9 34.4 ±4.8 35.7 ±5.2 36.7 ±5.2 37.3 ±4.7立西如克巴組 37.2 ±3.4 35.3 ±2.9 37.1 ±4.2 38.8 ±3.2 39.6 ±3.5利喜咽喉組 36.4 ±3.2 34.3 ±3.4 34.8 ±4.5 35.3 ±5.1 36.5 ±4.6

表4 立西如克巴和利喜咽喉膠囊對雄性小鼠體重的影響 ± s·g，n=20)

表4 立西如克巴和利喜咽喉膠囊對雄性小鼠體重的影響 ± s·g，n=20)

組別 給藥前 給藥后3d 給藥后7d 給藥后10d 給藥后14d對照組 31.0 ±1.9 31.7 ±2.0 32.4 ±1.9 33.6 ±2.3 34.0 ±1.9立西如克巴組 30.3 ±2.8 27.8 ±2.7 29.6 ±1.8 30.0 ±1.5 30.5 ±1.7利喜咽喉組 30.8 ±3.3 28.7 ±2.3 30.2 ±2.3 30.4 ±2.0 31.0 ±2.5

4 討論

按照蒙藥學及蒙醫方劑學理論分析，利喜咽喉膠囊中3味蒙藥為寒涼性，2味藥為溫性、1味為平性，故該復方屬涼性方劑。利喜咽喉膠囊對小鼠二甲苯致耳廓腫脹有顯著的抑制作用;對大鼠角叉菜膠致足腫脹亦有顯著的抑制作用。實驗結果表明，與原劑型立西如克巴的抗炎作用相比，利喜咽喉具有良好的抗炎作用，無急性毒性等不良反應。利喜咽喉膠囊對小鼠有效劑量為0.325g/kg～1.5g/kg;對大鼠的有效劑量為 0.22g/kg ～ 0.88g/kg。

［1］白清云.中國醫學百科全書·蒙醫學［M］.赤峰:內蒙古科技出版社，1986

［2］特木爾.蒙醫方劑學［M］.呼和浩特:內蒙古人民出版社，1986，290

［3］陳奇.中藥藥理實驗方法［M］.北京:人民衛生出版社，1993，356-361

［4］陳奇.中藥藥效研究思路與方法.［M］.北京:人民衛生出版社，2005，683 ～691

［5］衛生部藥政局.中藥新藥臨床前研究指導原則匯編(藥學、藥理學、毒理學)，北京，1993，203